【贮存】
人白细胞弹性蛋白酶(HLE)ELISA试剂盒应在2-8°C下保存。
【试剂盒的组分】
| 组分 |
装量 |
组分 |
装量 |
| 酶标板 |
96孔/48孔 |
显色液(TMB) |
15ml/瓶 |
| 校 |
1瓶 |
样品稀释液 |
30ml/瓶 |
| 阴性对照 |
1瓶 |
浓缩洗板液(10X) |
100ml/瓶 |
| 阳性对照 |
1瓶 |
终止液 |
15ml/瓶 |
| 酶联物 |
15ml/瓶 |
|
|
【试剂盒规格】 大规格96T/盒、小规格48T/盒
【标本要求】
人白细胞弹性蛋白酶(HLE)ELISA试剂盒标本在室温(20-25°C)保存不得超过8小时。在2-10°C保存不得超过48小时。如长久保存应置于-20°C或更低。避免标本反复冻融。
【试验前准备】
1.浓缩洗涤液(10X)用双蒸水稀释成1X(至1000ml)。未用完的放回2-8°C。
2.血清标本和试剂盒在使用前应恢复至室温(20-25°C)。
3.阳性对照、校、阴性对照和病人的血清样品用样本稀释液按1:21倍数稀释(即10ml阳性对照/校/阴性对照/病人血清样品加入200ml样品稀释液中)并充分混匀。
【操作步骤】
1.加样:分别取稀释过的阴性对照、阳性对照、校和血清样品100ml加入到对应的反应孔中;取100ml样本稀释液加入到对应孔中作为试剂空白对照。
2.温育:温度:室温(20-25°C) 时间:25±5分钟。
3.洗板:5次。
洗板
方式 |
步 骤 |
手工
洗板 |
①甩掉孔中的液体。②在每个孔内加入洗板液,确保孔中无气泡。③重复以上两步,洗板5次。④甩掉孔中的洗板液,并在纸巾上拍干至目测微孔中无残留液。收集洗板液至废液缸中,并在实验完毕后用0.5%次氯酸钠处理。 |
自动
洗板 |
在自动洗板机上设定洗液体积300-350ml/孔,洗板次数五次。洗完后置于纸巾上拍干。 |
4.加入酶联物:每孔中加入酶联物100ml。
5.温育:温度:室温(20-25°C) 时间:25±5分钟。
6.洗板:重复步骤3的操作进行洗板。
7.加入显色液(TMB):每孔中加入TMB 100ml。
8.温育:温度:室温(20-25°C) 时间:10-15分钟。
9.加入终止液:每孔加入终止液50ml以终止反应。
10.读数:在加入终止液30分钟内,将微孔板置于450nm波长下读取每个孔的光密度值,以空白试剂作对照。
【结果判定】
1.质量控制
校、阳性对照、阴性对照的OD值应符合以下要求:
|
项目
|
OD值范围
|
|
阴性对照
|
≤0.250
|
≤0.9
≥1.25
|
|
校
|
≥0.300
|
|
阳性对照
|
≥0.500
|
注:如不符合上述要求,认为本次试验无效应重复试验。
2.结果计算
标本参考值= (CF值标于盒内附的不干胶标签上)
参考值判断:
| 结果 |
标本参考值 |
| 阴性标本 |
≤0.90 |
| 可疑标本 |
0.91-1.09 |
| 阳性标本 |
≥1.10 |
【参考值】
呈阴性(标本参考值≤0.90),每个实验室应根据当地的实际情况建立自己的正常值参考范围。
【注意事项】
1.酶标板应平衡到室温后从铝箔袋中取出,剩余的板条立即放回铝箔袋中并封好(保留铝箔袋)。
2.试剂和样本的交叉污染会导致错误的结果。
3.避免不同批次的试剂混合使用。
10137 无菌检验用洗脱液 250g/瓶 含 PBS,用于样品的制备(消 毒技术规范)
10138 胰蛋白胨生理盐水溶液(TPS) 250g/瓶 用于样 品稀 释(国 家消 毒技 术规 范)
10111 pH7.0 缓冲氯化钠蛋白胨溶液 250g/瓶 用于药品样品的稀释(USP)
11018 氯化钠胰蛋白胨稀释液 250g/瓶 用于样品的制备与稀释(SN)
10126 蛋白胨-盐溶液 250g/瓶 用于样品的稀释(NY)
10121 酪胨-大豆卵磷脂-吐温 20 液体培养基,培养基批发 250g/瓶 用于药品稀释(USP),每 96ml 培养 基中添加 41 支 20106(吐温 20)
10181 0.1%蛋白胨水培养基,培养基批发 250g/瓶 用于药品稀释(药典)
12001 Amies 运送培养基,培养基批发 250g/瓶 用于致病菌标本的采集、运输和保存
12002 Cary-Blair 氏运送培养基,培养基批发 250g/瓶 用于致病菌标本的采集、运输和保存
12003 Stuart 运送培养基,培养基批发 250g/瓶 用于致病菌标本的采集、运输和保存
12005 改良运送培养基,培养基批发 250g/瓶 用于运送厌氧菌标本
10139 溴甲酚紫蛋白胨培养液 250g/瓶 用于灭菌与消毒鉴定试验(消毒 技术规范)
10122 标准Ⅰ号营养琼脂 250g/瓶 用于细菌培养,营养丰富,可做血琼 脂基础培养链球菌等苛养菌
10177 标准Ⅰ号营养琼肉汤 250g/瓶 用于细菌培养,营养丰富
10128 标准Ⅱ号营养琼脂 250g/瓶 用于培养非苛氧的细菌,也用于奶制 品中细菌总数的测定
10129 m-TGE 肉汤 250g/瓶 用于滤膜法测定奶制品中的菌落总 数
10131 AC 肉汤 250g/瓶 用于常见微生物的培养和不含防腐 剂的样品的检测
10124 2216E 液体培养基,培养基批发 250g/瓶 用于海生细菌的增菌培养
10812 胰蛋白胨大豆肉汤(TSB) 250g/瓶 用于细菌的增菌、培养
11210 Dey/Engley 中和肉汤基础 250g/瓶 用于化妆品样品的制备和卫生环境 中细菌的培养,每升培养基,培养基批发中需添加1 支 20204
10132 Dey/Engley 中和琼脂基础 250g/瓶 用于卫生环境中微生物的培养,每升 培养基,培养基批发中需添加 1 支 20204
10301 缓冲蛋白胨水(BPW) 250g/瓶 用于沙门氏菌、阪崎肠杆菌前增菌, 也可用于其它细菌的培养
人白细胞弹性蛋白酶(HLE)ELISA试剂盒
10803 豆粉琼脂血液 250g/瓶 每 100ml 培 养 基 中 添 加 5ml~10ml50701,配制成血琼脂平板,用于细 菌培养或溶血试验
10704 哥伦比亚血琼脂基础 250g/瓶 广泛用于细菌,尤其是弯曲杆菌、链 球菌等苛养菌的培养,每 100ml 培养 基中添加 5ml~10ml 50701
11405 血琼脂基础血液 250g/瓶 每 100ml 培 养 基 中 添 加 5ml~10ml50701,配制成血琼脂平板,用于细 菌培养或溶血试验
10805 脑心浸出液肉汤(BHI) 250g/瓶 用于细菌的增菌和培养
10193 脑心浸出液琼脂(BHIA) 250g/瓶 用于细菌尤其是苛养菌的培养
10204 营养肉汤普通 250g/瓶 用于细菌的增菌、复壮等
11009 硫乙醇酸盐流体培养基,培养基批发 250g/瓶 用于浑浊制品需氧菌无菌试验
10116 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 250g/瓶 用于低酸性罐头食品无菌检验
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