【贮存】
人环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒应在2-8°C下保存。
【试剂盒的组分】
| 组分 |
装量 |
组分 |
装量 |
| 酶标板 |
96孔/48孔 |
显色液(TMB) |
15ml/瓶 |
| 校 |
1瓶 |
样品稀释液 |
30ml/瓶 |
| 阴性对照 |
1瓶 |
浓缩洗板液(10X) |
100ml/瓶 |
| 阳性对照 |
1瓶 |
终止液 |
15ml/瓶 |
| 酶联物 |
15ml/瓶 |
|
|
【试剂盒规格】 大规格96T/盒、小规格48T/盒
【标本要求】
人环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒标本在室温(20-25°C)保存不得超过8小时。在2-10°C保存不得超过48小时。如长久保存应置于-20°C或更低。避免标本反复冻融。
【试验前准备】
1.浓缩洗涤液(10X)用双蒸水稀释成1X(至1000ml)。未用完的放回2-8°C。
2.血清标本和试剂盒在使用前应恢复至室温(20-25°C)。
3.阳性对照、校、阴性对照和病人的血清样品用样本稀释液按1:21倍数稀释(即10ml阳性对照/校/阴性对照/病人血清样品加入200ml样品稀释液中)并充分混匀。
【操作步骤】
1.加样:分别取稀释过的阴性对照、阳性对照、校和血清样品100ml加入到对应的反应孔中;取100ml样本稀释液加入到对应孔中作为试剂空白对照。
2.温育:温度:室温(20-25°C) 时间:25±5分钟。
3.洗板:5次。
洗板
方式 |
步 骤 |
手工
洗板 |
①甩掉孔中的液体。②在每个孔内加入洗板液,确保孔中无气泡。③重复以上两步,洗板5次。④甩掉孔中的洗板液,并在纸巾上拍干至目测微孔中无残留液。收集洗板液至废液缸中,并在实验完毕后用0.5%次氯酸钠处理。 |
自动
洗板 |
在自动洗板机上设定洗液体积300-350ml/孔,洗板次数五次。洗完后置于纸巾上拍干。 |
4.加入酶联物:每孔中加入酶联物100ml。
5.温育:温度:室温(20-25°C) 时间:25±5分钟。
6.洗板:重复步骤3的操作进行洗板。
7.加入显色液(TMB):每孔中加入TMB 100ml。
8.温育:温度:室温(20-25°C) 时间:10-15分钟。
9.加入终止液:每孔加入终止液50ml以终止反应。
10.读数:在加入终止液30分钟内,将微孔板置于450nm波长下读取每个孔的光密度值,以空白试剂作对照。
【结果判定】
1.质量控制
校、阳性对照、阴性对照的OD值应符合以下要求:
|
项目
|
OD值范围
|
|
阴性对照
|
≤0.250
|
≤0.9
≥1.25
|
|
校
|
≥0.300
|
|
阳性对照
|
≥0.500
|
注:如不符合上述要求,认为本次试验无效应重复试验。
2.结果计算
标本参考值= (CF值标于盒内附的不干胶标签上)
参考值判断:
| 结果 |
标本参考值 |
| 阴性标本 |
≤0.90 |
| 可疑标本 |
0.91-1.09 |
| 阳性标本 |
≥1.10 |
【参考值】
呈阴性(标本参考值≤0.90),每个实验室应根据当地的实际情况建立自己的正常值参考范围。
【注意事项】
1.酶标板应平衡到室温后从铝箔袋中取出,剩余的板条立即放回铝箔袋中并封好(保留铝箔袋)。
2.试剂和样本的交叉污染会导致错误的结果。
3.避免不同批次的试剂混合使用。
Casein 干酪素 500g
NZCYM Agar-capsule 培养基,培养基批发 5capsules
NZYM Agar capsule 培养基,培养基批发 5capsules
SOC Broth-capsule 培养基,培养基批发 5capsules
LB Broth-capsules 培养基,培养基批发 5capsules
Polypeptone 多聚蛋白胨 500g
Peptone 蛋白胨 500g
Peptone, bacteriological 蛋白胨 500g
Agar B 琼脂B 500g
人环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒
Beef Extract 牛肉浸膏 500g
Carrageenan 卡拉胶 500g
Nutrient agar 营养琼脂 100g
SOB Broth-capsule 培养基,培养基批发 5capsules
SOB Agar-capsule 培养基,培养基批发 5capsules
NZM Broth-capsule 培养基,培养基批发 5capsules
NZM Agar-capsule 培养基,培养基批发 5capsules
NZYM-capsule 培养基,培养基批发 5capsules
Agar 琼脂粉 500g
Agar A 琼脂A 100g
Agar D (Purified Agar) 纯化琼脂 500g
Casamino Acid 酪蛋氨基酸(酪蛋白水解物) 500g
Malt Extract 麦芽浸膏 500g
Yeast Extract 酵母浸膏 500g
HYLB-Capsules 培养基,培养基批发 5capsules
Peptone 140 (Soytone) 蛋白胨-140 100g
Peptone-A (From Meat) 蛋白胨A 100g
Peptone-B (Soy Protein Enzymatic Hydrolysate) 蛋白胨B 500g
Peptone-C (Peptonized Milk) 蛋白胨C 500g
Peptone-D (Protease peptone) 蛋白胨 D 100g
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