ChangLiver细胞，ChangLiver细胞株

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北京协和医院感染内科李太生等历时10年完成的一项大规模健康人群免疫功能研究，在上次揭示了健康人群免疫功能指标（即外周血淋巴细胞亚群）的各年龄段正常参考值范围以及其随年龄变化趋势。

论文日前发表在衰老领域影响因子排名一的《衰老（Aging）》杂志上，被认为是淋巴细胞亚群研究在人类健康领域的又一重要应用。

在“十二五”重大科技支撑项目基金资助下，课题组按照卫生组织定义的“健康”标准，从2006年以来在该院门诊及病房进行健康查体的人群中，筛选出年龄在18岁～80岁之间的1068位健康人，分为青年（18岁～44岁）、中年（45岁～64岁）、老年（65岁以上）三个年龄组，进行外周血淋巴细胞及其亚群的11项检测。在检测人的T细胞、B细胞及NK细胞等三大类淋巴细胞的基础上，进一步测出被称为“免疫系统指挥中枢总司令”的CD4细胞总数及其“属下各兵种”纯真亚群、记忆亚群、功能亚群、激活亚群及凋亡亚群等的具体数值，为判断个体免疫功能是否“早衰”提供了参考值。

研究发现，随年龄增长，人体B细胞及NK细胞未见明显波动。T淋巴细胞总数从1403个单位降至1198个单位，意味着免疫功能下降。

CD4细胞总数变化不大，青年组、中年组、老年组CD4均值分别为690、708、698。但受CD4指挥的两大军种，“现役部队”——记忆细胞总数和“民兵预备役”——纯真细胞总数却呈现明显的此消彼长态势。其中，纯真细胞均值在青年组、中年组、老年组分别为271、249、226，而记忆细胞的均值在青年组、中年组、老年组分别为419、459、472个单位。

李太生说，这就好比一个遇到突发重大安全事件，如果兵力不够，就会紧急征调“民兵预备役”入伍转为“现役部队”。既往研究证实，机体每遇到外界抗原刺激，就有一部分纯真细胞增殖分化为记忆细胞，迅速发挥抵抗病原体功能。根据本研究数据推测，随着年龄的增长、机体的衰老，更多纯真细胞被征调形成记忆细胞，因而纯真细胞越来越少，相反记忆细胞越来越多。这就部分解释了，老年人正是因为缺少了纯真细胞的储备，一旦发生感染很难控制。如果拥有比同龄人更多的纯真细胞，则意味着更高的“免疫力储备”和免疫系统衰老的放缓。

人体淋巴细胞中的抗原递呈细胞在机体被病原体感染时，会通过一个叫“CD28”的重要辅助信号受体，向CD4传递预警信号，由CD4前往执行“轰炸”任务。李太生说，研究还发现，随年龄增长，人体免疫细胞CD28会越来越少，导致信号传递能力衰减，使淋巴细胞不能及时识别和清除外界病原微生物，机体对病原体的抵抗能力下降。这一点解释了老年人接种疫苗效果差的原因。

李太生说，目前临床使用的血常规化验单中，淋巴细胞的正常值参考范围是一个忽略年龄分化的平均值。举例来说，套用旧的参考值，老年人的免疫功能显然会被“低估”。本研究建立的健康人群各年龄段淋巴细胞亚群参考值，将使临床对人类免疫功能的评价更加。

产品名称：ChangLiver细胞，ChangLiver细胞株

中文名称：人张氏肝细胞

来源：肝脏

种属：人

生长状态：贴壁生长|悬浮生长|半贴壁

细胞形态：上皮样|成纤维样|圆形|球形|梭形|不规则形态

质控：无支原体、无污染|符合标准

周期：冻存细胞3-4个工作日发货，复苏细胞1-2周发货

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ChangLiver细胞，ChangLiver细胞株细胞吹打经验之谈：

急速的反复吹打肯定容易产生泡沫，这对细胞不利，所以我们要尽量避免。在操作时尽量选用较大口的吸管，吸液时先将吸管内空气排空，再深入液面以下吸液，吹打细胞时，尽量沿着壁吹出液体，操作轻柔，就可zui大程度避免泡沫的产生！

1.有一些细胞可以不用消化液就能够吹打下来。个人认为能不用消化液是的。譬如巨噬细胞。一直维持巨噬细胞，每次传代都不用消化液，吹打的时候一般会用瓶内未换的剩余旧培养液，这样比用新的培养基可以减少点泡沫的生成。当然这个一定要求原培养基未被污染。

2. 吹打的时候我们都知道要一点挨着一点吹，这样不会漏掉地方。而每次都会先沿着两条对角线的方向吹打，然后再按照横着或者是竖着吹打。这样就可以比较容易把细胞吹下来，因为先细胞的各个方向都受力了，而且比较均匀，细胞比较容易下来，而且对细胞形态的维护比较好。

3.对胶头滴管的要求。胶头滴管头部是做成弯曲45度角的形状，一般都是自己用止血钳夹住头部在酒精灯上烧弯。发现，如果吹打的时候，滴管的头部边缘如果是和吹打平面平行的话，反而容易产生泡沫，贴在底部吹，也容易产生泡沫，是能够有一个角度顺着你吹打的方向和滴管一致。并且稍微远离吹打面，这样滴管内的液体容易流出，阻力会减小，就不会产生那么多的泡沫了。

4.控制吹打的节奏，急速地吹打会很快地产生泡沫，用力越大，越容易产生。是能够把握住自己的力度和节奏，有条不紊的吹打。是以自己拿滴管用手的轻松程度为准，如果刚吹几下很快就累的话，那就证明是节奏过快。吹完都不累的话那就是太慢力度也不够。一般在吹完一遍时指头发困会比较好。这样的节奏能够比较快速而且有效地完成。

觉得关键的操作是不要吹打到底。

培养细胞多年，避免气泡产生要注意以下两点：

1 吹打用的培养基不能太少，如果只有1-2mL，气泡难以避免；

2 吸管每次打出液体后立刻深入液面下吸取液体。

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