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L929细胞,复苏细胞,L929价格

  • 产品/服务:L929细胞,复苏细胞,L929价格
  • 型 号:L929
  • 品 牌:ATCC
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2020-04-21
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:1785
产品简介

L929细胞,复苏细胞,L929价格,上海素尔生物科技有限公司致力于生物医药领域的技术研发与生物试剂的销售,力求为广大生物科技研究者提供优质快捷的贴心服务。公司集研发、销售、实验室技术服务于一体,并以...

产品详细介绍

L929细胞,复苏细胞,L929价格上海素尔生物科技有限公司致力于生物医药领域的技术研发与生物试剂的销售,力求为广大生物科技研究者提供优质快捷的贴心服务。公司集研发、销售、实验室技术服务于一体,并以多家欧美研究平台的技术实力为依托,向市场提供品质价格的超值服务,专业提供实验所需的各类细胞株,因子,抗体等多种生物试剂。公司细胞主要来源ATCCECACCDSMZJCRBSciencell等,以及少数外大学建系。轻小利,重品质。避浮夸,求务实。您的满意,将是我们不懈的追求。竭诚欢迎广大生物科技研究老师,前来咨询合作。

L929细胞,复苏细胞,L929价格 常见问题及解决办法:

1)对于生长缓慢的贴壁细胞:可采用适当的提高培养基中血清浓度,或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。

2)对于生长不均的贴壁细胞:在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长,而旁边则为一块空白),此时可将细胞进行消化,重新打散,贴壁,加入新培养基进行培养。

3)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以离心去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

L929细胞,复苏细胞,L929价格 之细胞消化不下来原因:

1)有可能是你的培养液没有去除干净,因为培养液可以中止消化。所以建议用PBS冲洗两次。然后再加EDTA.

2)加大EDTA的浓度 ,可以选择0.1%与trypsin混合使用,加大以上溶液的体积,可以用2ml

337度温度要够。

4)实时查看,当看到镜下细胞折光度有改变,就是有作用,然后用培养液将细胞冲洗下来。

5)用冰D-Hank's液洗细胞两次;

6)用刚解冻的冷的胰酶(注意不要37度孵育)1-2ml/100ml的培养瓶,开过口的和时间长的都不用。

免疫共沉淀(co-immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。

原理:

当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质x的抗体免疫沉淀x,那么与x在体内结合的蛋白质y也能沉淀下来。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。

优点:

1)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;

2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;

3)可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。

缺点:

1)可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用;

2)两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;

3)必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。

注意的问题:

1)细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。不能用高浓度的变性剂(0.2%SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂。

2)使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用。

3)使用对照抗体:

单克隆抗体:正常小鼠的IgG或另一类单抗

兔多克隆抗体:正常兔IgG

在免疫共沉淀实验中要保证实验结果的真实性,应注意以下几点:

1)确保共沉淀的蛋白是由所加入的抗体沉淀得到的,而并非外源非特异蛋白,单克隆抗体的使用有助于避免污染的发生。

2)要确保抗体的特异性,即在不表达抗原的细胞溶解物中添加抗体后不会引起共沉淀。

3)确定蛋白间的相互作用是发生在细胞中,而不是由于细胞的溶解才发生的,这需要进行蛋白质的定位来确定。

L929细胞,复苏细胞,L929价格 细胞株状态良好,饱满,光泽度好,活力强,传代次数少,价格优惠,详细关于CHO-K1细胞价格|培养条件|来源|生长状态|细胞形态|特征特性等致电:

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Caco-2细胞,传代细胞,Caco2细胞株 之角膜缘干细胞(原代培养):

吸弃培养液

少量pbs将细胞洗一遍

弃之

0.1%姨酶:0.02%EDTA(1:1)混合液1ml将细胞表面过一遍,弃之

0.1%姨酶:0.02%EDTA(1:1)混合液1ml加入培养瓶,置培养箱3~5分钟,看胞体变圆,用弯头吸管吹打瓶壁黏附的细胞

DMEM+20%FBS混合液1ml终止消化

800/ 离心 5分钟

弃上清

离心管中加入1mlPBS,将细胞吹打起来

800/ 离心 5分钟

弃上清

加入DMEM+20%FBS混合液1ml将细胞吹打起来

细胞悬液装入培养瓶

置培养箱20分钟

倒置显微镜下可见部分干扰的成纤维细胞贴壁

吸出细胞悬液12分装新的培养瓶

注:加带血清的培养基终止消化后再吹打容易起泡沫,影响操作,因此选择边消化边吹打。消化完毕后,本人用胎盘兰染色证实90%细胞存活,说明此操作合适。

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ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②试剂因素;③操作因素。下面就一些常见ELISA操作过程中的问题一一分析。

1.样品稀释

酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性。因此,国外检测血清抗体的试剂盒,均规定将血清稀释至适当的倍数,以降低非特异性反应,使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性。但是,有些用户未能严格按使用说明书操作,如某些产品应取10μl样品进行稀释,个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释,由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够,因此造成样品稀释倍数不准确,检测结果出现问题。

2.试剂盒平衡

试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(25),一般需在室温放置2030分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分。冬季室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟。

3.样品和试剂的混匀

稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性。

4.加样

在现在的ELISA商品试剂盒中,必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。

5.温育

温育是ELISA测定中影响测定成败为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和28℃。一些操作者,擅自改变说明书操作,使用自己喜欢的温育时间和温育温度,这样造成一些不必要的麻烦。因为,不同试剂盒有不同的温育时间和温育温度的选择,随意更改温育时间或者温育温度将导致试验结果出现偏差。

6.洗板

固相免疫测定技术是一种非均相免疫测定技术,需以洗涤操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反应温育过程中吸附的非特异成份分离开来,以保证ELISA测定的特异性。洗板对于ELISA测定来说,也是其关键的一步。洗液尽量不要溢出孔外;加洗液后要静置1分钟,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及时更换吸水纸,尤其是拍过酶标记物的吸水纸一定要弃去,否则可能影响试验结果。

7.边缘效应

使用96孔板的ELISA测定中,常发现有“边缘效应”,即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应”,并且可提高测定的重复性。

8.显色

显色一定要控制时间,根据试剂盒说明操作即可。一般来说,显色时间过短,结果偏低;显色时间过长,空白增高或者非特异性显色增加。

9.比色

比色要注意波长的选择。以TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有使用,而前者比色波长为450nm,后者为492nm,滤光片需根据要求随时更换。因此,容易出现滤光片错用的问题。

其次,单波长或双波长比色选择的问题。所谓的单波长比色即是通常的以对显色具有zui大吸收的波长如450nm492nm进行比色测定;而双波长双色则酶标仪在敏感波长如450nm和非敏感波长如630nm下各测定一次,敏感波上下的吸光度测定值为样本测定酶反应特异显色的吸光度与板孔上指纹、刮痕、灰尘等脏物所致的吸光度之和;非敏感波长下测定即改变波长至一定值,使得样本测定酶反应特异显色的吸光度值为零,此时测得的吸光度即为脏物的吸光度值。后酶标仪给出的数值为敏感波长下的吸光度值与非常感波长下的吸光度值的差。因此,双波长比色测定具有能排除由微滴板本身、板孔内标本的非特异吸收、指纹、刮痕、灰尘等对特异显色测定吸光度的影响的优点。由于ELISA测定中单个空白孔的非特异吸收上有一定程度的不确定性,也就是说每次测定或同次测定空白孔位置的不同均有可能得到不同吸光度测定值,故而在ELISA测定比色时,是使用双波长比色。

suer 35.1 杂交瘤细胞抗CD2

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suer 95-D 人高转移肺癌

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suer A2780 人卵巢癌细胞

suer A3 T淋巴细胞白血病细胞

suer A-375 人恶性黑色素瘤细胞

suer A-431 人表皮癌细胞

suer A498 人肾癌细胞

suer A549 人肺癌细胞

suer A-673 人横纹肌瘤细胞

suer A7r5 大鼠胸大动脉平滑肌细胞

suer A9 小鼠皮下结缔组织细胞

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suer ACC-3 人腺样囊性癌

suer ACHN 人肾透明细胞癌细胞

suer AE-1 杂交瘤细胞抗AChE

suer AE-2 杂交瘤细胞抗AChE

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suer AN3CA 人子宫内膜腺癌细胞

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suer ARO 甲状腺癌细胞(未分化)

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suer ATT-20 小鼠垂体瘤

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suer LoVo 人结肠癌细胞

suer LS-174-T 人结肠腺癌细胞

suer LTEP-A2 人肺腺癌

suer LX-2 人肝星形细胞

suer MA-104 恒河猴肾细胞

suer MC3T3-E1 小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14

suer MC3T3-E1 Subclone 14 小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14

suer MCF-10A 人正常乳腺上皮细胞

suer MCF7 人乳腺癌细胞

suer MDA-MB-231 人乳腺腺癌

suer MDA-MB-415 人乳腺腺癌细胞

suer MDA-MB-435 人乳腺癌高转移细胞

suer MDA-MB-435S 人乳腺导管癌

suer MDA-MB-436 人乳腺腺癌细胞

suer MDA-MB-453 人乳腺癌细胞

suer MDA-MB-468 人乳腺癌细胞

suer MDBK (NBL-1) 牛肾细胞

suer MDCK 狗肾细胞

suer MDCK(NBL-2) 狗肾细胞

suer ME12 人前列腺癌

suer ME-180 人子宫颈表皮癌细胞

suer MEF 小鼠胚胎成纤维细胞

suer MFC 小鼠胃癌细胞

suer MG-63 人骨头肉瘤细胞

suer MGC80-3 人胃癌细胞

suer MHCC97-H 高转移人肝癌细胞

suer Miapaca2 人胰腺癌细胞

suer MKN-28 人胃癌细胞

suer MKN-45 人胃癌细胞

suer MLTC-1 小鼠睾丸间质细胞瘤细胞

suer MNK-7 人乳癌

suer MNNG/HOS Cl 人骨肉瘤细胞

suer MOLT-4 人急性淋巴母细胞白血病细胞

suer MR1 仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤

suer MRC-5 人胚肺细胞

suer MS1 小鼠胰岛内皮细胞

suer MS751 人子宫颈表皮癌细胞

suer MSTO-211H 人肺癌细胞株

suer Mv.1.Lu(NBL-7) 貂肺上皮细胞

suer NAMALWA Burkitt's淋巴瘤细胞

suer NCI-H1299 人非小细胞肺癌细胞

suer NCI-H1395 人肺腺癌细胞

suer NCI-H1650 人非小细胞肺癌细胞

suer NCI-H1975 人肺腺癌细胞

suer NCI-H2452 人间皮瘤细胞

suer NCI-H292 人肺癌细胞(淋巴结转移)

suer NCI-H358 人非小细胞肺癌细胞

suer NCI-H446 人小细胞肺癌细胞

suer NCI-H460 人大细胞肺癌细胞

suer NCI-H661 人大细胞肺癌细胞

suer NCI-H716 人结直肠腺癌细胞

suer NCI-N87 人胃癌细胞

suer NCTC clone 929 小鼠成纤维细胞

suer Neuro-2a 小鼠脑神经瘤细胞

suer NIH/3T3 小鼠胚胎细胞

suer NIH-3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪)

suer NIT-1β 小鼠胰岛素瘤β细胞

suer NP69 人永生化鼻咽上皮细胞系

suer NR8383 大鼠肺泡巨噬细胞

suer NRC-5 人胚肺

suer NRK 大鼠肾细胞

suer NRK-52E 大鼠肾细胞

suer OC3 人卵巢癌细胞株

suer OK 负鼠肾细胞

suer OKT 11 杂交瘤细胞抗CD2

suer OKT 3 杂交瘤(CD3)

suer OP9 小鼠骨髓基质细胞

suer OS-RC-2 人肾癌细胞

suer OV56 人卵巢癌细胞

suer OV90 人卵巢癌细胞

suer OVCAR3 人卵巢癌细胞

suer OVCAR4 人卵巢癌细胞

suer OVISE 人卵巢癌细胞

suer OVSAHO 人卵巢癌细胞

suer OVTOKO 人卵巢癌细胞

suer P19 小鼠畸胎瘤细胞

suer P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 小鼠骨髓瘤细胞

suer P388 小鼠淋巴样瘤

suer P388D1 小鼠淋巴样瘤细胞

suer P3X63Ag8 小鼠骨髓瘤细胞

suer P3X63Ag8.653 小鼠骨髓瘤细胞

suer p69 前列腺癌

suer P815 小鼠肥大细胞

suer PA317 小鼠胚胎成纤维细胞

suer PANC-1 人胰腺癌细胞

suer PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3] 杂交瘤细胞CD25

suer PC-12 大鼠嗜铬细胞瘤

suer PC-12(低分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化)

suer PC-12(高分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)

suer PC-12(未分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化)

suer PC-13 人前列腺癌

suer PC-3 人前列腺

suer Phix-293T 人胚肾细胞(Ad5DNA)

suer PIEC 猪髋动脉内皮细胞

suer PK136 小鼠X小鼠

suer PK-15 猪肾细胞

suer PLC/PRF/5 人肝癌亚力山大细胞

suer Psi2 DAP 小鼠胚胎成纤维细胞

suer PSN1 人胰腺癌细胞

suer Pt K1 (NBL-3) 袋鼠肾细胞

suer QCY-7703 人肝癌细胞

suer QGY-7701 人肝癌细胞

suer QGY-7703 人肝癌

suer QGY-Q3* 人肝癌

suer R 1610 仓鼠肺细胞

suer R15 大鼠肝癌

suer RAG 小鼠肾腺癌细胞

suer Raji Burkitt's淋巴瘤细胞

suer RAW264.7 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞

suer RBE 人肝胆管癌细胞

suer RBL-2H3 大鼠嗜碱性细胞白血病细胞

suer RD 人恶性胚胎横纹肌瘤细胞

suer Reh 人急性非BT淋巴细胞白血病

suer Renca 小鼠肾癌细胞

suer RF/6A 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞

suer RH-35 大鼠肝癌细胞

suer RIN-m 褐鼠胰岛素瘤上皮细胞

suer RKO 人结肠腺癌细胞

suer RKO-AS45-1 人结肠癌转基因细胞

suer RKO-E6 人结肠癌转基因细胞

suer RL95-2 人子宫内膜癌细胞

suer RM-1 小鼠前列腺癌细胞

suer RSC96 大鼠雪旺细胞

suer RT4 人膀胱移行细胞乳头瘤细胞

suer RWPE-1 人正常前列腺上皮细胞

suer rwpe2 人前列腺正常细胞

suer S-180 小鼠腹水瘤细胞

suer Saos-2 人成骨肉瘤细胞

suer ScaBER 人膀胱鳞癌

suer SCC-25 人舌癌细胞

suer SF-268 人神经癌细胞

suer SF-295 XG恶性胶质瘤细胞

suer SGC7901 人胃腺癌细胞

suer SHG-44 脑胶质瘤

suer SH-SY5Y 人神经母细胞瘤细胞

suer SHZ-88 大鼠乳腺癌细胞

suer SiHa 人子宫颈鳞癌细胞

suer SK-BR-3 人乳腺癌细胞

suer SK-HEP-1 人肝癌细胞

suer SK-MES 人肺鳞癌细胞

suer SK-MES-1 人肺鳞癌细胞

suer SKMG4 人胶质瘤细胞

suer SK-N-BE(2) 人神经母细胞瘤细胞

suer SK-NEP-1 人肾母细胞瘤细胞

suer SK-N-SH 人神经母细胞瘤细胞

suer SK-OV-3 人卵巢癌细胞

suer SKRC39 人肾乳头状细胞癌细胞

suer SMMC-7721 人肝癌细胞

suer SP2/0 小鼠骨髓瘤细胞

suer SPC-A-1 人肺腺癌细胞

suer SUNE1 人鼻咽癌细胞

suer SUP-B15 Ph+急淋白血病细胞系

suer Super Tube 狗肾细胞

suer SV40 MES 13 小鼠肾小球系膜细胞

suer SV-HUC-1 人输尿管上皮永生化细胞

suer SW 1353 人软骨肉瘤细胞

suer SW 780 人膀胱移行细胞癌

suer SW 982 人滑膜肉瘤细胞

suer SW038-C2 人脑胶质母细胞瘤细胞

suer SW1116 人结肠癌细

suer SW-13 人肾上腺皮质小细胞癌细胞

suer SW-1573 人非小细胞肺癌

suer SW1990 人胰腺癌细胞

suer SW403 人结肠癌细胞

suer SW480 人结肠腺癌细胞

suer SW579 人甲状腺鳞癌细胞

suer SW620 人结肠癌细胞

suer SW626 人卵巢癌细胞

suer T-24 人膀胱移行细胞癌细

suer T47-D 乳腺管癌

suer PC-9 人肺腺癌细胞

suer T84 人结肠腺癌肺转移细胞

suer Tca-8113 人舌鳞癌细胞

suer TE-1 人食管癌细胞

suer THP-1 单核细胞瘤

suer TM3 小鼠睾丸间质细胞

suer TOV-112D 人卵巢癌细胞

suer TOV-21G 人卵巢癌细胞

suer TSCCA 人舌鳞癌细胞

suer TT 人甲状腺导管癌细胞

suer U-118 MG 人脑星形胶质母细胞瘤

suer U-2 OS 人骨肉瘤细胞

suer U226 人骨髓瘤细胞

suer U251 人脑星形胶质瘤细胞

suer U266 骨髓瘤细胞株

suer U87 人脑胶质瘤细胞

suer U-87 MG 人脑星形胶质母细胞瘤

suer U937 人组织细胞淋巴瘤细胞

suer UMNSAH/DF-1 鸡胚成纤维细胞

suer UMR-106 大鼠骨肉瘤细胞

suer UM-UC-3 人膀胱移行细胞癌

suer V79 仓鼠肺细胞

suer VERO 非洲绿猴肾细胞

suer VX2 兔肝癌细胞

suer Walker-256 大鼠肝癌细胞

suer WERI-Rb-1 人视网膜神经胶质瘤细胞

suer WI-38 人胚肺细胞

suer WiDr 人大肠癌细胞

suer WISH 人羊膜细胞

suer WPMY-1 人正常前列腺基质永生化细胞

suer Y1 小鼠肾上腺皮质瘤细胞

suer Y3-Ag 1.2.3 大鼠骨髓瘤细胞

suer Yac-1 小鼠淋巴瘤细胞

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