MKN-45| MKN-45现货|人胃癌细胞

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MKN-45| MKN-45现货|人胃癌细胞注意事项：

1、客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置半小时后在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行拍照（建议收到细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100，200各两张，拍摄照片应清晰），排除细胞本身污染的情况；

2、细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。从细胞资源中心获得细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。如有问题一时间跟我们联系 ！

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完全培养基：90%RPMI-1640 +10%胎牛血清+1%P/S

血清我们推荐用:Gibco FBS-10099-141 或SERANA 北美 S-FBS-US-015

培养条件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%

MKN-45| MKN-45现货|人胃癌细胞传代方法：

收到细胞后，在倒置镜下(是在 4X 物镜)观察整个细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内， 严 格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml 新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用 PBS（不含钙,镁离子）洗 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱 1-3 分钟预热，之后翻转培养瓶 10-30 秒后，在倒置显微镜下 观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按 6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的一次传代一般是一传二。 注：1、观察细胞在低倍镜（4 或 5X 物镜)下进行，否则不能准确判 断细胞的传代密度。看细胞的形态请在 10 或 20 物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻 存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与 我们联系。

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