Walker256(Walker-256)大鼠肝癌细胞

上海素尔细胞库为您提供Walker256(Walker-256)大鼠肝癌细胞（复苏细胞、冻存细胞）具体细胞培养条件，代数以及来源问题请与在线客服联系咨询。 》》在线客服QQ：1提供耐药细胞株，细胞染色...

上海素尔细胞库为您提供Walker256(Walker-256)大鼠肝癌细胞（复苏细胞、冻存细胞）具体细胞培养条件，代数以及来源问题请与在线客服联系咨询。 》》在线客服:提供耐药细胞株，细胞染色等技术服务。

Walker256(Walker-256)大鼠肝癌细胞描述：

生长特性：贴壁生长

微生物及支原体检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

Walker256(Walker-256)大鼠肝癌细胞培养条件：

完全培养基：90%RPMI-1640 +10%胎牛血清+1%P/S

血清我们推荐用:

GibcoFBS：10099-141或HycloneFBS：SH30084.03。优质血清，尽在上海素尔生物 www.biosuer.com ！

培养条件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%

安全性：所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。

Walker256(Walker-256)大鼠肝癌细胞冻存细胞处理方法：

收到细胞后，检查外包装是否完整，干冰是否完好，细胞冻存管是否完好且未溶解。如有破损、溶解等问题，请及时联系 400-1515-198。细胞若不立即复苏，请将细胞置于液氮中保存。若复苏请进行以下操作：

1. 75%酒精喷冻存管后，用干净的纸或酒精棉球擦拭冻存管，放入超净台。

2. 预热细胞完全培养基，准备一根新的 15mL 无菌离心管和一个无菌的 T25 细胞培养瓶。

3. 将 5ml 完全培养基添加到 T25 细胞培养瓶，备用。将 5ml 完全培养基添加到 15ml 离心管中，备用。

4. 准备 37℃水浴，迅速取出细胞，将冻存管放入水浴中快速摇晃使之融化。

5. 融化完全后的冻存管酒精棉球擦拭，在超净台中打开冻存管，用 1mL 移液器将细胞悬液取出，加入到准备好的含培养基的离心管中，混匀，放入离心机中， 1200rpm 离心3-5min。

6. 离心停止后取出离心管，小心地弃上清液，加入 1ml 完全培养基，轻吹打混匀成悬液，全部吸取转移到步骤 3 中准备的 T25 细胞培养瓶中，混匀后放置37℃，5%CO2 培养箱培养。

7. 次日于显微镜下观察细胞状态，视情况可换液或直接传代实验。

复苏细胞一般采用快速融化法，以保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞。

注：收到细胞后请及时处理，一周内发现细胞异常，请及时联系 ，并提供相关图片及说明！

Walker256(Walker-256)大鼠肝癌细胞贴壁细胞的传代:对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml完全培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入完全培养基后继续培养或实验。
Walker256(Walker-256)大鼠肝癌细胞悬浮细胞的传代:一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入完全培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入完全培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。

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