J774A.1细胞,小鼠单核巨噬细胞系

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产品名称:J774A.1细胞
中文名称:小鼠单核巨噬细胞系
形态特性:单核细胞/巨噬细胞样
生长特性:贴壁生长
特征特性:该细胞来源于BABL/cN小鼠,有抗体依赖的吞噬作用,生长受硫酸葡聚糖、PPD和LPS的抑制;可产生IL-1β和大量的溶菌酶。
J774A.1细胞;小鼠单核巨噬细胞系;培养条件:DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;传代方法:1:3~1:6传代;每周换液2~3次。
J774A.1细胞,小鼠单核巨噬细胞系 形态学观察法:
胞内出现颗粒或空泡。
细胞内如果出现颗粒物质,表明细胞处于非健康状态。
同样,细胞内出现空泡也说明细胞处于非健康状态。
细胞丧失双折射性:
如果发生在单层细胞:一个具有双折射性的正常细胞逐步失去这一特征(相差显微镜下细胞边缘成晕环),则提示该细胞已经死亡,即终干枯死亡。
如果发生在悬浮细胞:正常悬浮细胞清晰透明,如胞内出现颗粒或变浑浊表明细胞受损,甚至死亡。
怎样去除死细胞?单层培养的细胞死亡后,一般会漂浮起来,因此不需要特殊处理。
而悬浮细胞或原代培养细胞则要通过密度离心(如Ficoll梯度)方法收集死细胞。
细胞成活率检测实验
即刻检测实验——
染料柜染实验:原理——萘黑、台盼蓝以及很多其他染料均不能透过活细胞。概要——将细胞悬液与染料混匀,在低倍显微镜下检查。材料包括无菌材料,即细胞;生长液;0.25%胰酶;PBSA.非灭菌材料即:血细胞计数板;生存力染料;巴斯德吸管;显微镜;手执计数器。操作步骤:
1、用胰蛋白酶消化或离心,重悬制备高深度的细胞悬液
2、取一块干净的血细胞计数板,将盖玻片固定在适当位置上。
3、将一<滴细胞悬液和一滴(台盼蓝)或四滴(萘黑)染料混匀/li>
4、加至血细胞计数板的计数室中。
5、静置1~2min(但不要放置很久,否则活细胞会受到损伤而吸收染料)。
6、将计数板置于显微镜下,用10倍物境找到计数网格。
7、计数细胞总及着色细胞的数目。
8、清洗血细胞计数板,放入盒内。
实验分析-计算未着色细胞的百分数,该数字即为本方法所得出的细胞生存力百分数。
据统计,原代培养细胞成活率一般为50%~90%。细胞系一般为90%~存活。冻融细胞一般为50%~80%存活。
J774A.1细胞,小鼠单核巨噬细胞系 相关同类细胞株细胞系:
DC2.4细胞 Hyclone1640+10% FBS
HT22,小鼠海马神经元细胞 Hclone MEM(货号:SH30024.01B)+10% FBS
小鼠脑微血管内皮细胞bEND.3 DMEM高糖+10% FBS
人肺微血管内皮细胞(HPMEC) DMEM高糖+10% FBS
RAW264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 "90%DMEM高糖+10%胎牛血清血清我们推荐用:
GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。
培养条件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%"
NCI-H446 人小细胞肺癌细胞 培养条件是:90%RPMI-1640+10%胎牛血清
RS4:11细胞 培养条件是: 1640培养基+10% FBS
HBE细胞 人支气管细胞
HT22,小鼠海马神经元细胞 GIBCO(高糖DMEM+10%胎牛血清)
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3T3-L1细胞 美国GIBCO的DMEM能含HEPs更好,PH7.2+10% 胎牛血清
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HT-22细胞 DMEM高糖培养基+10%FBS
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MC38 细胞,结肠癌细胞 贴壁 1640培养基+10%FBS
NB4(NB-4)人急性早幼粒白血病细胞 GIBCO(1640+10%胎牛血清)
Hs578Bst 细胞 GIBCO(高糖DMEM+10%胎牛血清)
NCI-H526 来源美国ATCC RPMI-1640+10%FBS 悬浮类细胞
TC-1细胞 GIBCO(1640+10%胎牛血清)
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H22细胞 1640+10% FBS
EA.hy926,人脐静脉细胞融合细胞
小鼠骨髓瘤细胞 Sp2/0
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