细胞名称

草鱼肾细胞； GIK

种属

草鱼

生长状态

贴壁生长

培养条件

培养基类型：RPMI 1640培养基

FBS（Gibco16000044）: 10%

抗生素：双抗

培养条件：37℃，CO2: 5%

传代方法

收到细胞后，在倒置显微镜下观察细胞生长状态：

如果没长满，将培养瓶用75%酒精消毒后在超净台内更换新鲜培养液，继续培养。

如果细胞已经长满（约80%-90%）则传代后继续培养。

贴壁细胞传代方法：

1 弃去培养基，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。

2 加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），让胰酶与大部分细胞接触后放入37℃培养箱内，随时观察细胞状态变化，待细胞大部分变圆后加完全培养基终止消化。

悬浮细胞传代方法：可以直接传代也可以离心法传代。

1 直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后，将上清吸掉1/2-2/3，吹打细胞形成细胞悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

2离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内， 1000rpm，5分钟，去除上清，加新的培养液到离心管内，吹打细胞形成细胞悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

 一般没有特殊说明，细胞一般是一传二。

冻存方法

70% 完全培养基，20%FBS，10%DMSO，现用现配。

储存：液氮中长期保存。

注

1 观察细胞在低倍镜下观察，便于整体估计细胞密度。

2 在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落，可离心吹打后重新种入瓶中培养。

3 收到细胞后若发现培养瓶破损、细胞污染等，请拍照并在三天内与我们联系。