1.先将冻存管放入4℃冰箱，约40min。

2.接着置于-20℃冰箱，约30-60min。

3.置于-80超低温冰箱中放置过夜。

4.置于液氮罐中长期保存。

5同时做好冻存记录，在自己的笔记本和冻存记录本上均要记录。

注意事项：

1.使用DMSO前，不需要进行高压灭菌，它本身就有灭菌的作用。高压灭菌反而会破华它的分子结构，以至于降低冷冻保护效果。在常温下，DMSO对人体有害，故在配制时Z好戴上手套操作。

2.不宜将冻存细胞放置在0℃～-60℃这一温度范围内过久，低温损伤主要发生在这一温度区内，是“危险温区”。

3.注意定期检查液氮罐内液氮量，及时添加。