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猪ELISA试剂盒试验时须注意的细节

发布时间:2018-01-08浏览次数:986返回列表

    为了保证实验的成功,猪ELISA试剂盒试验时须注意以下的一些细节:
    1、实验板孔加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应孔的孵育时间一致。 
    2、固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维   素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。 
    3、包被抗体或抗原的选择:将抗体或抗原吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一   般要求PH在9.0~9.6之间。 
    4、酶标记抗体工作浓度的选择:先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。然后再固定其   它条件或采取“方阵法",在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
    5、取出板条前恢复到室温后再打开外包装袋,实验中不用的板条立即放回包装中,密闭封口,其余不用试剂应盖好。  
    6、实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。  
    7、洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水。 
    8、试剂盒内试剂请在保质期内使用,不同批号试剂不要混用。 
    9、酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而   本身无色。有些供氢体有潜在的致癌作用,ELIAS试剂盒应注意防护。
    10、1000pg/ml以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。大于1000pg/ml 的样品应以标准稀释缓冲液稀释后重做。在结果分析时,结合考虑相应的稀释度。
    11、按猪ELISA试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于  洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用  试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。

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