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鸟ELISA试剂盒的试验方法

发布时间:2017-12-21浏览次数:887返回列表

    作为一名试验君,对于ELISA试剂盒的操作知识,应用有所了解,下面,我们来了解下鸟ELISA试剂盒的试验方法。
    一、操作步骤 
    1、取出试剂盒室温平衡30min,取出血样放至室温。 
    2、配标准品:取150uL标准品加入150uL标准品稀释液稀释,依次稀释5次。 
    3、加样:分别于各反应孔中加入标准品50uL,样品40UL,标准品做复孔,样品做3孔。 
    4、分别于样品孔中加入10UL抗体。 
    5、标准品和样品孔中分别加入50uL链酶亲和素-HRP,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃温育60min。 
    6、配洗涤液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。 
    7、洗涤:小心揭开封板膜,弃去液体,甩干,每孔加200uL洗涤液,静置30s后弃去,如此重复5次,拍干。 
    8、显色:每孔先加入显色剂A 50uL,再加显色剂B 50uL,轻轻震荡混匀,37℃避光显色6min。 
    9、 终止:每孔加入终止液50uL,终止反应(此时蓝色立即转为黄色)。 
    10、测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度。测定应在加终止液10min之内进行。 
    11、保存结果,收拾桌面。 
    12、分析处理数据 
    二、鸟ELISA试剂盒注意事项
    1、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
    2、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
    3、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
    4、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
    5、有效期:6个月。
    6、本操作说明适用于48T试剂盒,但48T试剂盒所有试剂减半。

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