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人卵巢癌细胞系实验过程

发布时间:2017-03-23浏览次数:1218返回列表

 人卵巢癌细胞系实验过程
1.人卵巢癌细胞系实验所需的材料
1.1.CAOY3,使用%15的小牛血清L-15培养达到饱和湿度。二氧化碳含量为5%,温度为37摄氏度的温箱内培养。
1.2.保尔佳。国外某制药厂生产。
1.3.卡铂、甲氨喋吟以及5—FU都为市场销售的针剂。
1.4.MTT,250毫克每瓶,使用生理盐水将其配置成5毫克每毫升的溶液,存放在4摄氏度的环境下,且要避开阳光的照射。
1.5.二甲基亚砜,市场上销售的分析纯试剂。
1.6.酶联免疫检测仪。
1.7透射电子显微镜,采用日历H-600型号。
2.人卵巢癌细胞系实验实验方法
2.1.药物的抑制作用的测试。将处在指数增殖期的细胞消化,配成溶度是200000个每毫升的单细胞悬液,将96孔板加入进去,每个加入细胞的悬液是0.1毫升,细胞的数量为20000个每孔。把96孔板放置在37摄氏度温箱内培养一天,当细胞贴壁良好后,将每班设为对照组以及观察组,观察组每孔加入少量的含药液的培养基0.1毫升,同样,对照组加入相同量的培养基。根据公式C=(50×D)/5000×1000/50%,即可计算出要溶度(其中D为临床常用的溶度,单位是mg/kg每天,C是体外常用的溶度,单位是拼ug/ml),使其药物的溶度是C、10、C/10、C/100。把加入药后的96孔板分为两组后放置在37摄氏度的温箱内,分别培养一天以及3天(一天24小时)。在培养快要结束的前4小时,将96孔板加入0.01毫升的MTT溶液。当培养结束后,要将孔内的液体去除,再每孔加入0.2毫升的DMSO,摇晃震荡30分钟,使用酶联免疫检测仪比色,测量出的波长是490纳米,参考波长为450纳米。根据公式(1-B/A)×100%(A、B分别是对照组以及观察组的光密度值),即可计算出药物的抑瘤率。此实验应该重复4次,采用F检验或者t检验进行信息处理。
3.人卵巢癌细胞系增殖抑制作用的研究
据有关文件记载,上世纪八十年代末就对保尔佳的抗肿瘤作用进行过报道,在此之后,越来越的多的报道显示:保尔佳在治疗恶性肿瘤中发挥的作用越来越显著。不过,对于治疗卵巢癌的相关报导却很少,基础性研究更是没有。本文研究显示:在24小时作用下,保尔佳对于人卵巢癌CAOV3细胞的增殖抑制作用和卡铂等化疗药物相似,并没有显著的差异性可言。在3天时间的作用下,其保尔佳的抑制瘤肿效果明显比5-FU更低,而和别的化疗药物没有显著的差异。这样充分说明,保尔佳能够作为一种抗击肿瘤的药物,单独的使用于卵巢癌病人身上。该要没有明显的副作用,且可以提升机体的免疫能力。因此,更适用于不能接受普通治疗的晚期患者。

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