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细菌的培养和生长现象的观察
发布时间:2013-07-29浏览次数:1730返回列表
一、实验目的
1.了解常用培养基的种类。
2.掌握无菌操作,建立无菌观念。
3.初步掌握细菌接种技术。
4.学会观察细菌在常用培养基上的生长现象。
二、实验材料
1.菌种葡萄球菌、大肠埃希菌。
2.培养基普通琼脂平板、斜面培养基、半固体培养基、液体培养基。
3.器材接种环、接种针、酒精灯、培养箱、试管架等。
三、实验内容
(一)细菌的接种方法
平板划线接种法分离培养法)
【实验原理】
通过在平板上划线,将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的散开,使单个细菌能固定在一点生长形成单个菌落,以达到分离纯种的目的。若需从平板上获取纯种,则挑取一个菌落做纯培养。
【操作方法】(分段划线法)
1.右手拿接种环,烧灼冷却后,以无菌操作方法蘸取细菌标本少许。
2.左手持琼脂平板,以左手拇指和食指将平板盖启开,右手将取了菌液的接种环伸人平板,将已葫菌的接种环在琼脂表面密集而不重叠地来回划线,面积约占整个平板的1/6- 1/5,此为区划线。
3.将接种环置于火焰上灭菌,冷却后(可接触平板试之,如不融化琼脂,即已冷却),开始第二区来回划线,且在开始划线时与区的划线相交数次(2-3次为宜),以后划线不再相交。
4.后用同样方法进行第三区,必要时也可继续第四区、第五区划线(图5-1)

【注意事项】
1.严格无菌操作,避免空气及呼吸道中的细菌落人培养墓内。
2.划线接种时,角度、力度要掌握好,接种环与琼脂成30°~40°角轻轻接触,利用腕力滑动,切忌划破琼脂,并充分利用平板的表面积,以达到分离的目的。


