ELISA常见样本的处理方法—组织样本

  ELISA(酶联免疫吸附剂测定)是一种快速、灵敏、准确可靠的一种定量分析方法，样本的处理对于ELISA实验的成功有着举足轻重的作用。利用ELISA进行检测的样本类型包括常见的血液(血清、血浆)，组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水、前列腺液、精液、阴道分泌物等，这些样本收集的时间、处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果。下面古朵生物就常见ELISA组织样本处理方法的整理，希望对您有所帮助。

  组织样本一般是制成组织匀浆，处理方法如下：

  取适量组织块，于预冷PBS(0.02mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液，称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);

  可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入 5-10ml预冷PBS(组织与 PBS 的质量体积比建议为 1:5，即1g 样本加入 5ml PBS)进行充分研磨(有条件实验室可选用机器匀浆)，该过程需在冰上进行;得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温;反复冻融法可重复 2 次)。

  将制备好的匀浆液于5000×g 离心5分钟，留取上清即可检测。

  如果样本需要长期保存，请添加蛋白酶抑制剂。根据实验需要，组织匀浆样本可先定量总蛋白，以便于统计分析数据。某些组织样本如肝脏，肾脏，脑组织会有假阳性反应。

  处理样本的过程就是收集目标蛋白的过程，由于蛋白容易变性，降解，故该过程应尽量温和。样本处理之后的储存也非常重要，尤其注意不要反复冻融，样本处理之后可分装密封保存，4℃保存应小于 1 周，-20℃不应超过 1 个月，-80℃不应超过2个月。在标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之融解。样本的处理是实验成功的步，以上就是关于常见样本处理方法的一个简述，供研究者参考。

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