许多童鞋都经历过做了很多次ELISA试验，却还是得不出好结果。其实，实验方法虽然成熟，但是操作的时候一不留神，结果就可能毁于一旦。接下来，小鼠ELISA试剂盒厂家浅谈试验操作中不容忽视的关键点，看看你有没有忽略过以下点：

1、浓洗刷液可能会有结晶析出，ELISA试剂盒稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响成果。

2、各步加样均应运用加样器，并常常校正其正确性，以避免实验误差。一次加样时刻zui佳控制在5分钟内，如标本数目多，引荐运用排枪加样。

3、在细胞收集、总蛋白提取整个操作都要尽量在冰上进行。提前开离心机预冷。

4、电泳用自来水冲洗干净后，要再用蒸馏水冲洗，晾干。

5、灌胶前玻板一定要对齐夹紧。曾有过整个下午都在漏胶花胶的惨痛经历。

6、用胶片曝光的时候一定要快进快出，胶片可事先折个小角。胶片容易刮花，接触的时候要特别小心，万一划伤了目标条带真是心痛到说不出话。

7、小鼠ELISA试剂盒从冷躲环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装进密封袋中保留。

8、转膜前，膜事先用甲醇激活，转膜时zui好把转膜槽放置在冰浴中进行转膜。

9、孵育的时候不要好几张膜叠在一起摩擦摩擦，这对结果也会有影响。

10、本试剂不一样批号组分不得混用。显色剂B请避光保留。

11、严厉依照说明书的操纵进行，ELISA试剂盒实验成果断定有必要以酶标仪读数为准。

12、如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔榜孔的OD值），请先将样本稀释必定倍数（n倍）后再测定，核算时请zui终乘以稀释倍数（×5×n）。

13、封板膜只限一次性运用，以避免穿插污染。