生化需氧量是指在有溶解氧的条件下，好氧微生物在分解水中有机物的生物化学氧化过程中所消耗的溶解氧量。同时亦包括如硫化物、亚铁等还原性无机物质氧化所消耗的氧量，但这部分通常占很小比例。

有机物在微生物作用下好氧分解大体上分为两个阶段。 

1 含碳物质氧化阶段，主要是含碳有机物氧化为二氧化碳和水；

2 硝化阶段，主要是含氮有机化合物在硝化菌的作用下分解为亚硝酸盐和硝酸盐。约在5-7日后才显著进行。故目前常用的20℃五天培养法（BOD5法）测定BOD值一般不包括硝化阶段。 

BOD是反映水体被有机物污染程度的综合指标，也是研究废水的可生化降解性和生化处理效果，以及生化处理废水工艺设计和动力学研究中的重要参数。 

（一）五天培养法（20℃）
（1）方法原理

    水样经稀释后，在20±1℃条件下培养5天，求出培养前后水样中溶解氧 含量，二者的差值为BOD5。若水样五日生化需氧量未超过7mg/L，则不必进行稀释，可直接测定。

（2）稀释水

Ø稀释水一般用蒸馏水配制，先通入经活性炭吸附及水洗处理的空气，曝气2-8小时，使水中DO接近饱和，然后20℃下放置数小时。临用前加入少量氯化钙、氯化铁、硫酸镁等营养溶液及磷酸盐缓冲溶液，混匀备用。稀释水的pH值应为7.2，BOD5＜0.2mg/L。 

（3）水样的稀释倍数

1）根据OC（地面水）或CODcr（工业废水）值估计，分别乘上相应系数；

2）根据经验等估计。

（4)测定结果计算
1）对不经稀释直接培养的水样：BOD5（mg/L）= D1- D2
2）对稀释后培养的水样：
BOD5（mg/L）=[（D1-D2）-（B1-B2）f1]/f2 

(5)特殊水样的处理

若废水中含有毒物质浓度高，而有机物含量不高时，可在污水中加入有机质（葡萄糖），人为提高稀释倍数，在计算时再减去葡萄糖的BOD5值。

水样中如含少量氯，一般放置1－2h可自行消失。

（二）其他方法

利用BOD测定仪测定