SV1501 肽 N-糖苷酶 F

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特别提示：包括肽 N-糖苷酶 F在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：肽 N-糖苷酶 F
英文名称：Peptide N-glycosidase F
产品货号：SV1501
产品规格：75KU|15KU

特性:
去除糖蛋白的 N-连接糖
概述:
肽 N-糖苷酶 F，即 PNGase F，是一种酰氨酶，可以在 N-连接糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分zuì内侧的 N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间进行切割。PNGase F 还以不含甘油的形式提供，便于在 HPLC 方法中取得zuì佳效果。
来源:
从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化。
反应条件:
将糖蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中，37℃ 温育进行反应。热失活:75℃ 10 分钟。
随酶提供的试剂:
10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 2 缓冲液
10% NP-40
分子量:
36,000 daltons。
质量保证:
无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶 F1、F2和 F3 活性，无蛋白水解活性。
单位定义:
1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下 1 小时 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量（65 我公司units = 1 IUB milliunit）。
浓度:
500,000 units/ml。
注意事项:
已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。
要使天然糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。

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货号	名称	规格
WE0217	无RNA酶水	100ml
SV0829	BalbBuffer 3.1 （10X）	5ml|1.25ml
SV0893	oneTaq Quick-Load 2X Master Mix（提供 GC 缓冲液）	500次(50μl体系)|100次(50μl体系)
SV0899	oneTaq 2X Master Mix（提供标准缓冲液）	500次(50μl体系)|100次(50μl体系)
SV0906	血源扩增 Hemo KlenTaq	1000次(25μl体系)|200次(25μl体系)

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名称：红细胞裂解液
货号：WE0218
规格：100ml
  本产品是利用细胞内外盐离子浓度差可导致细胞膜胀破的原理来裂解红细胞，主要用于实验中红细胞的去除，比如：淋巴细胞的分离纯化，经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。

使用方法：
1、向1倍体积的新鲜全血中加入3倍体积的红细胞裂解液(如1ml新鲜全血加入3ml红细胞裂解液)轻轻涡旋或颠倒混匀。
注意：如果对新鲜组织细胞进行处理，需经胰酶等消化成单个细胞悬液，离心收集细胞后再进行后续操作。
2、冰上孵育15分钟，其间轻轻涡旋混匀两次。
注意：红细胞裂解后，溶液应该是清亮透明的。
3、4℃，450×g离心10分钟收集白细胞，小心吸弃上清液。
4、向以上沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液，轻轻涡旋充分重悬白细胞(如起始血液为1ml，则加入2ml的红细胞裂解液)。
5、4℃，450×g离心10分钟收集白细胞，小心并彻底吸去上清液。
6、重悬细胞，用于后续实验。
注意：如提取RNA，zuì好从此步开始使用无RNase的溶液进行。

储存条件：室温(15～30℃)

名称：稀释液 B
货号：SV0824
规格：5ml|5ml
概述:
如果在使用过程中需要稀释内切酶，建议稀释后浓度不要低于 1,000units/ml。详细信息请参见 282 页，根据内切酶产品货号查阅限制性内切酶的稀释兼容性表选择稀释液的种类，表中列出了所有内切酶所需稀释液种类。
贮存条件:
-20℃。
稀释液成分:
稀释液A:
50mM KCl，10mM Tris-HCl，0.1mM EDTA，1mM dithiothreitol，200 μg/ml BSA，50% 甘油(pH 7.4 @
25℃)。
稀释液B:
300mM NaCl，10mM Tris-HCl，0.1mM EDTA，1mM dithiothreitol，500 μg/ml BSA，50% 甘油(pH 7.4 @25℃)。
稀释液C:
250mM NaCl，10mM Tris-HCl，0.1mM EDTA，1mM dithiothreitol，0.15% Triton X-100，200 μg/ml BSA，50% 甘油(pH 7.4 @ 25℃)。
注意:以上稀释液不能用于稀释嗜热聚合酶。

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