BTN3672 植物DNA提取试剂盒

产品简介
植物DNA提取试剂盒的品牌是百奥莱博,是优质的DNA提取纯化产品,本制品用于科研试验,本产品质量好,且具价格,深为用户称道,了解更多植物DNA提取试剂盒等DNA提取纯化产品请联系我司咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括植物DNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:植物DNA提取试剂盒
英文名称:Plant DNA extraction kit
产品货号:BTN3672
产品规格:50次
本试剂盒是根据经典的方法改良得到的专门用于提取新鲜或冷冻植物组织基因组DNA(包括叶绿体DNA和线粒体DNA)的试剂盒。
产品特点:
1. 操作快速,整个过程在30分钟内即可完成。
2. 纯度高,A260/A280在1.9左右,可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。提取得到的DNA大小在30-50Kb 之间。
3.产率高,高于大多数同类产品(尤其是基于离心柱的提取产品)。
4. 安全,本试剂盒对人体,无腐蚀性和刺激性气味。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 40ml |
| 溶液B | 20ml |
| RNase A溶液(10mg/mL) | 0.75ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,RNase A溶液4℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B比较粘稠,用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取0.75mL 加入到10-15mL塑料离心管(常用于培养细菌用)中并放置于65℃待用。
2. 称取植物组织0.1-0.3g左右,剪成微小的碎片,转移到装有溶液A的离心管中短暂匀浆。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。也可以液氮研磨后将粉末加入到预热的溶液A中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞,因为其中的主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。
3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5mL塑料离心管中。注意:匀浆液较为粘稠,可将1mL 枪头剪去一截后用于转移匀浆液,不能吸取的植物碎片可倒入。
4.在匀浆液中加入0.5倍体积 65℃预热的溶液B,颠倒数次混匀。由于溶液B比较粘稠,可以将1mL 枪头剪去一截再吸取。
5. 加入15μl的RNase A溶液(10mg/mL)。
6. 65℃放置3~5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
7. 加入200μl自备lǜ仿,震荡器上充分震荡混匀30秒。
8. 12000~15000g室温离心2分钟,此时两相交界面将有白色膜状物,小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。
9. 加入1倍体积(约750μl)的自备的异丙醇到上清液中,盖紧盖子后用手上下颠倒30秒混匀。此时一般将有絮状DNA沉淀出现。
10. 12000~15000g室温离心3分钟。此时管底将有微小DNA沉淀,小心弃上清,注意不要丟弃DNA沉淀。
11.在离心管中加1mL 75%乙醇,短暂震荡,12000~15000g室温离心3分钟,弃上清。
12. 重复上述操作一次。
13. 短暂离心,小心吸弃残留的液体(此步不要省略,否则残留的液体含乙醇将会影响DNA电泳、酶切和PCR等反应),室温晾干。
14. 加入50-100μl自备的TE缓冲液充分溶解DNA沉淀。直接取5-10μl电泳检测DNA,其余放冰箱备用。
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产品特点:
1. 微量提取,一次可以处理300mg左右的骨骼(但需要先将骨粉变成骨粉)。
2. 柱式操作,方法简单,整个过程只需要40-60分钟。
3. 得到的DNA分子量不均匀,一般在20 Kb到100bp之间,具体取决于骨骼的新鲜程度,骨粉的加工方法等。
4. 得到的DNA可以直接用于PCR或荧光PCR反应。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50mL |
| 溶液B | 15mL |
| 溶液C | 30mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| DNA洗脱液2.0 | 10mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 骨粉的制备:用自备酒精将骨骼表面擦洗干净,以防污染物对后续PCR的影响,然后用骨钻在处理干净的骨骼区域钻取骨粉。对于已经制备好的、商品化的骨粉,可以跳过此步,直接进入下一步。
2. 用天平称取0.2克骨粉,转移到2mL塑料离心管中。
3. 加入1mL溶液A到骨粉中,充分振荡30秒混匀。(注意:溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用,且骨粉加到溶液A中后会特别黏稠,需使劲振荡混匀。)
4. 65℃水浴放置30分钟。
5. 加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备lǜ仿,充分振荡30秒混匀。
6. 12000rpm室温离心3分钟,小心将上清液转移到一个新的塑料离心管中。
7. 加入0.5mL溶液C,颠倒混匀。
8. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后需要 12000rpm室温离心1分钟,并弃收集管中的穿透液。
9. 加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
10. 再加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
11. 12000rpm室温离心半分钟,弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要,否则残留的液体会抑制后续的PCR。
12. 将离心吸附柱套入到一个自备的干净的1.5mL塑料离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30μL DNA洗脱液,然后室温放置2分钟。如果先将DNA洗脱液预热到60-80℃再使用,效果更佳。
13. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为骨骼DNA。
14. 取少量进行电泳检测。注意:一般DNA都呈现弥散状,分布在20 Kb到100bp这一广泛的范围,其比例跟骨骼(或骨粉)的新鲜程度、加工过程(对骨粉)等因素密切相关。
15. DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。
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