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产品详情

KFS186 Annexin V-FITC/P

  • 产品/服务:KFS186 Annexin V-FITC/P
  • 型 号:KFS186
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-05-09
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:864
产品简介

Annexin V-FITC/P由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品用于科学研究,我公司专注于细胞凋亡与增殖产品的研发、生产和供应,为您提供的Annexin V-FITC/P质量可靠,批间差小,且价格公道,热切盼望您选购我们的产品。...

产品详细介绍

特别提示:包括Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒
英文名称:Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
产品货号:KFS186
产品规格:10T|20T|50T|100T

在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素FITC 标记,以标记了的Annexin V 作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。

碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V 与PI 匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本)。

注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-FITC,Propidium Iodide (PI)避光保存及使用。对于Annexin V-FITC 这个组份,建议您在收到产品之后,分装为小份避光保存于-20℃,即用即取。
3. Propidium Iodide(PI)有毒,操作时要戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。

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KFS186 Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒 10T|20T|50T|100T
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货号:SNM508
规格:1000T|500T

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货号:SNM531
规格:50T|20T

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货号:KFS196
规格:20T|200T
TUNEL 检测同时需要设阳性和阴性对照,以显示试验的客观性及准确性。可使用本试剂盒制备阳性片(使用客户自备样本),其后续步骤与待测样本同样进行。

名称:Caspase 9荧光法检测试剂盒(AFC)
货号:KFS207
规格:20T|50T|100T
本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织Caspase-9 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中Caspase-9 为关键的执行分子,与DNA 断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-9 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;但在细胞发生凋亡阶段,它被激活,活化的Caspase-9 由两个大亚基和两个小亚基组成,裂解相应的胞浆胞核底物,zuì终导致细胞凋亡。Caspase-9 荧光检测试剂盒就是将Caspase-9 序列特异性的多肽偶联至发色基团。当底物被Caspase-9 剪切后,发色基团即游离出来,可通过荧光酶标仪测定其荧光强度(激发波长=485nm,发射波长=535nm)。

注意事项
1. Caspase-9 Substrate 避光保存及使用。
2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-9 活化的机制,这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-9 活性无明显改变,需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。
3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织50~100mg,以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求,因为Caspase-9 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关,如测定的RFU 值偏低,可以通过适当延长反应的时间,如果值还是不高,可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。

名称:Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒
货号:KFS208
规格:100T|50T
凋亡早期的重要特征之一是半胱氨酸特异性蛋白酶——caspase家族蛋白的活性激活。这一类酶可以参与到一系列的生化反应中,响应凋亡早期信号并导致相应的蛋白底物剪切,继而引发细胞解体。目的底物可识别的序列包含天门冬氨酸残基,剪切发生在序列的羰基段。

Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒采用的荧光底物为原料,可以检测凋亡细胞中激活的caspase3/7.这种具有膜亲和型的检测试剂盒由一个4氨基的小肽(DEVD)和一种核酸结合染料。凋亡发生时,caspase3/7蛋白被激活,从而剪切caspase3/7识别序列DEVD肽段。剪切底物后,游离的核酸染料与DNA结合,从而发出亮绿色荧光信号。

操作步骤
1.1 以合适的培养基悬浮细胞或贴壁细胞,加入合适的化合物或药物,刺激细胞诱导凋亡。
1.2 去除药物或化合物,以新鲜培养基洗涤细胞2-3次,更换新鲜培养基后,以1μL/mL的量加入caspase3/7检测液,使得caspase3/7检测试剂工作液浓度为1μM。(注意: Caspase3/7 检测试剂工作液浓度为0.5μM~2μM,您根据细胞量以及培养液的体积进行调整优化。)
1.3 37℃,避光孵育30min,或室温孵育45-60min。
1.4 荧光显微镜观察拍照或荧光光度计读数。

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