ZN1984 Cy3标记亲和素

产品简介
Cy3标记亲和素由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品仅用于生物化学研究方面,我公司的Cy3标记亲和素品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括Cy3标记亲和素(荧光素标记亲和素)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Cy3标记亲和素(荧光素标记亲和素)
英文名称:Cy3 Co
产品货号:ZN1984
产品规格:100μl
保存条件:置4℃保存一年,注意避光。
试剂内容:1ml CY3 标记Avidin 含 1mg 亲和纯化 Avidin,F/P==3-9/1,0.01M PBS,1%BSA,0.01%Thimerosal。其中Avidin经化学修饰,等电点由pH10降为pH6.5。
标记方法:Cy3 标记采用 Bayer,E.,et al.所研究的方法。(参考文献:Bayer,E.,et al.,Meth.Enzymol.,62,308(1979)
使用方法:
Cy3标记试剂稀释液:PBS或TBS 缓冲液,加入试剂级 BSA至1%。
使用上述稀释液,免疫荧光法按 1:50-100 稀释。具体的稀释度须自己预先确定。
稀释后溶液应于当天使用,未用完的应弃置。
CY3在554nm激化,在568-574nm发射荧光,呈鲜艳红色。
注意事项:请离心后,再使用。
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名称:Lo
货号:SV0911
规格:500次(50μl体系)|100次(50μl体系)
概述:
Lo
Lo
Lo
其它剂型:
为了加样方便,Lo
浓度:
2,500units/ml。
名称:T4 多聚核苷酸激酶(3′磷酸酶活性缺失)
货号:SV1045
规格:1KU|200U
特性:
DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化,以便进行连接反应。
DNA 或 RNA 的末端标记,用作探针和进行 DNA 测序
用 T4 多聚核苷酸激酶(M0201)除去 3´ 磷酸基团
T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化,制备pNp 底物,用于添加到 DNA 或 RNA的 3´ 端
用 T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记
概述:
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链 DNA 或 RNA)的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶(M0201)还具有 3´ 磷酸酶活性,将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶(M0236)具有所有激酶的活性,但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
来源:
重组 E. coli 菌株,克隆有 T4 多聚核苷酸激酶或修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
反应条件:
1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),10 mM MgCl2,5 mM DTT],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
注意事项:
达到zuì佳酶活力,需要新鲜缓冲液(在旧缓冲液中,由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力)。
放射性标记反应:
50 μl 反应体系中,用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应(放射性和非放射性)操作流程请联系我们咨询。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率,可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前,先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟,然后冰上冷却,并加入 5%(W/V)的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性,但是为了适用于高活力的放射性标记反应:,在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
一般来说,进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下,T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接,无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态,则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。
质保声明:
T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)经过严格的质控检测,确保该产品具有zuì高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位即 1 个 Richardson 单位,指 37℃条件下,30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量(1)。
浓度:
10,000 units/ml。
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