WE0176 血液基因组DNA提取试剂盒

血液基因组DNA提取试剂盒是高品质的DNA提取纯化产品，由北京百奥莱博供应，本产品用于科学研究，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多血液基因组DNA提取试剂盒等DNA提取纯化产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括血液基因组DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：血液基因组DNA提取试剂盒
英文名称：BalbGen Blood DNA Kit
产品货号：WE0176
产品规格：可处理50ml血液|可处理200ml血液

  本试剂盒提供了一种快速、灵活的方法，适用于新鲜或冷冻全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的样品)提取总DNA，包括基因组DNA和线粒体DNA。本品可以灵活处理0.1-20ml的全血，采用非离心柱的方法，无需使用苯酚、氯fǎng等有机溶剂，有效去除蛋白、色素、脂类及其它抑制性杂质污染。整个过程在一个管中操作，减少了污染及样本混淆的风险。提取的DNA产量高、质量好，可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot以及文库构建等实验。

试剂盒组成：

组份	可处理50ml血液	可处理200ml血液
Buffer FG1	2×65ml	2×260ml
Buffer FG2	30ml	120ml
Buffer GE	15ml	60ml
蛋白酶K	3 mg	12.5mg
蛋白酶K 储存液	1.25ml	1.25ml

保存条件：Buffer FG1 2～8℃，其他组分室温(15～30℃)。

产品特点
1、纯度高：提取的基因组DNA可直接用于下游PCR、荧光定量PCR、酶切等各种实验。
2、提取量大：可从0.1-20ml的全血中提取DNA，无需使用苯酚、氯fǎng等有机溶剂。
3、兼容性强：适用于处理各种血液和细胞样本。

自备试剂：异丙醇、70%乙醇

实验前准备及重要注意事项：
1、向蛋白酶K 中加入用量(0.3ml/1.25ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、所有离心操作均在室温下完成。
3、血液样品反复冻融，会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。所得基因组DNA也应尽可能避免反复冻融，以免降解。如果提取冷冻血液的基因组DNA，建议37℃水浴，迅速解冻后再进行后续操作。
4、血液样品的储存：
1)短期保存：已加入抗凝剂的血液样品可在2～8℃储存zuì多10天，对于某些实验例 如Southern杂交等，需要得到完整全长的基因组DNA，请将血液样品在2～8℃储存不超过3天，此时基因组DNA的降解程度较轻。
2)长期保存：已加入抗凝剂的血液请置于-70℃保存(如果提取的是高分子量的DNA，推荐使用EDTA作为抗凝剂)。

操作步骤：

一、从100～900μl全血中提取基因组(以300μl血液处理量为例)
1、取300μl全血于2ml离心管(自备)中，加入300μl(样本等体积)Buffer FG1，上下颠倒混匀5次，10000×g离心30秒，弃上清。
2、再向离心管中加入450μl(1.5倍样本体积)Buffer FG1，涡旋震荡，使沉淀完全分散。10000g离心30秒，弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上，放置2分钟。
注意：在少情况下沉淀可能会松弛，所以要缓慢倒掉上清。将离心管倒置在吸水纸上，可以减少管壁上清的回流。
3、按照附表配制Buffer FG2与蛋白酶K 的混合液(比例100:1)。
注意：此混合液zuì好现用现配.井在配好后1小时之内用完。
4、加入150μl的Buffer FG2与蛋白酶K 的混合液，立即涡旋混匀至溶液无团块。
注意：
1)如果有多个样品同时操作，加入Buffer FG2/蛋白酶K 混合液后立即涡旋震荡，不要等所有样品部加完后再震荡。
2)通常涡旋震荡3-4次.毎次5秒，可以使沉淀充分悬浮，如果涡旋震荡后发现沉淀中含胶状物质可以再加入30μl的Buffer FG2/蛋白酶K 混合液，再次混旋混匀。
5、65℃孵育10分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：如果样品颜色从红色变成橄榄绿说明蛋白消化完全。
6、加入150μl导丙醇，上下颠倒彻底混匀直至出现丝状或簇状基因组DNA。
注意：与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要。如果样品中白细胞含量少，可能看不到DNA，则至少上下频倒高心管20次确保沉淀完全。
7、10000×g离心5分钟。
注意：如果沉淀贴壁不牢，可以适当延长离心时间或増大离心力。
8、弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上吸干。
注意：少数时候沉淀可能贴壁不牢，注意不要吸弃沉淀。
9、加入300μl的70%乙醇，涡旋震荡5秒，10000×g离心5分钟，弃上清。
注意：如果沉淀贴壁不牢，可以适当延长离心时间或増大离心力。
10、把离心管倒置于干净的吸水纸上5分钟，确保沉淀在管中 。
注意：在管底可见白色的DNA沉淀，在少情況下沉淀可能会松弛 ，所以要缓慢倒掉上清。
11、空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净(至少5分钟)。
注意：乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、 PCR等)实验，但避免过度干操DNA沉淀，因过度干燥会使DNA难于溶解。
12、加入200lμl的Buffer GE，低速涡旋5秒，65℃孵育1小时溶解DNA，期间轻弹数次助溶。-20℃保存DNA。
注意：如果DNA没有完全溶解，可室温过夜。如果使用少量的FG3溶解DNA，建议延长孵育时间。

二、从1～5ml全血中提取基因组(以3ml血液外理量为例)
1、取3ml全血于15ml离心管(自备)中，加入3ml(样本等体积)Buffer FG1，上下颠倒混匀5次，2500×g离心5分钟，弃上清。
2、再向离心管中加入4.5ml(1.5倍样本体积)Buffer FG1，涡旋震荡，使沉淀完全分散。2500×g离心5分钟，弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上，放置2分钟。
注意：在少情况下沉淀可能会松弛 ，所以要缓慢倒掉上清。将离心管倒置在吸水纸上，可以減少管壁上清的回流。
3、按照附表配制缓冲液FG2与蛋白酶K 的混合液(比例100:1)。
注意：此混合液zuì好现用现配，井在配好后1h之内用完。
4、加入1.5ml Buffer FG2/蛋白酶K 混合液，立即涡旋混匀至溶液无团块。
注意：
1)如果有多个样品同时操作，加入Buffer FG2/蛋白酶K 混合液后立即涡旋振荡，不要等所有样品都加完后再震荡。
2)通常涡旋震荡3-4次，毎次5秒可以使沉淀充分悬浮，如果涡旋震荡后发现沉淀中含胶状物质可以再加入300lμl的Buffer FG2/蛋白酶K 混合液，再次涡旋混匀。
5、65℃孵育10～30分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：如果样品额色从红色变成橄榄绿说明蛋白消化完全。
6、加入1.5ml导丙醇，上下颠倒彻底混匀直至看到DNA。
注意：与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要。如果样品中白细胞含量少，可能看不到DNA，则至少上下颠倒离心管20次确保沉淀完全。
7、2500×g离心5分钟。
注意：如果沉淀贴壁不牢，可以造当延长离心时间或増大离心力。
8、弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上吸干。
注意：在管底可见自色的DNA沉淀，在少情况下沉淀可能会松弛 ，所以要缓慢倒掉上清。
9、加入1.5ml的70%乙醇，涡旋震荡5秒，2500×g离心5分钟，弃上清。
注意：如果沉淀贴壁不牢.可以适当延长离心时间或増大离心力。
10、把离心管倒置于干净的吸水纸上5分钟，确保沉淀在管中 。
注意：在少情况下沉淀可能会松弛，所以要缓慢倒掉上清。
11、空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净(至少5分钟)。
注意：乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、 PCR等)实验，但避免过度干燥DNA沉淀，因过度干燥会使DNA难于溶解。
12、加入300μl的Buffer GE，低速涡旋5秒，65℃孵育1小时溶解DNA，期间轻弹数次助溶。一20℃保存DNA。
注意：如果DNA没有完全溶解，可室温过夜。如果使用少量的FG3溶解DNA，建议延长孵育时间。

三、从6～20ml全血中提取基因组(以10ml血液处理量为例)
1、取10ml全血于50ml离心管(自备)中，加入10ml Buffer FG1，上下颠倒混匀5次，2500×g离心5分钟。
2、再向离心管中加入15ml Buffer FG1，涡旋震荡，使沉淀完全分散。2500×g离心5分钟，弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上，放置2分钟。
注意：在少情况下沉淀可能会松弛，所以要缓慢倒掉上清。
3、按照附表配制缓冲液FG2与蛋白酶K 的混合液(比例100:1)。
注意：此混合液zuì好现用现配，井在配好后1小时之内用完。
4、加入5ml Buffer FG2/蛋白酶K 混合液，立即涡旋混匀至溶液无团块。
注意：
1)如果有多个样品同时操作，加入Buffer FG2/蛋白酶K 混合液后立即涡旋震荡，不要等所有样品都加完后再震荡。
2)通常涡旋震荡3-4次，毎次5秒可以使沉淀充分悬浮，如果涡旋震荡后发现沉淀中含胶状物质可以再加入1ml BufferFG2/蛋白酶K 混合液，再次涡旋混匀。
5、65℃孵育30分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：如果样品颜色从红色变成橄榄绿说明蛋白消化完全。
6、加入5ml导丙醇，上下颠倒彻底混匀直至看到DNA。
注意：与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要，应该至少上下颠倒离心管20次确保沉淀完全。
7、2500×g离心5分钟。
注意：如果沉淀贴壁不牢，可以适当延长离心时间或増大离心力。
8、弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上吸干。
注意：在管底可见白色的DNA沉淀，在少情况下沉淀可能会松弛 ，所以要缓慢倒掉上清。
9、加入5ml的70%乙醇，涡旋震荡5秒，2500×g离心5分钟，弃上清。
注意：如果沉淀贴壁不牢，可以适当延长离心时间或増大离心力。
10、把离心管倒置于干净的吸水纸上5分钟，确保沉淀在管中 。
注意：在少情况下沉淀可能会松驰 ，所以要缓慢倒掉上清。
11、空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净(至少5分钟)。
注意：乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、 PCR等)实验，但避免过度干燥DNA沉淀，因过度干燥会使DNA难于溶解。
12、加入1ml的Buffer GE，低速涡旋5秒，65℃孵育1小时溶解DNA，期间轻弹数次助溶。-20℃保存DNA。
注意：如果DNA没有完全溶解.可室温过夜。如果使用少量的FG3溶解DNA，建议延长孵育时间。

附表：不同体积血液所需各种缓冲液用量

缓冲液	血液样品的体积(μl)
	100	300	1000	3000	5000	10000	20000
Buffer FG1(μl)	250	750	2500	7500	12500	25000	50000
Buffer FG2(μl)	50	150	500	1500	2500	5000	10000
蛋白酶K(μl)	0.5	1.5	5	15	25	50	100
异丙醇(μl)	50	150	500	1500	2500	5000	10000
70%乙醇(μl)	50	150	500	1500	2500	5000	10000
Buffer GE(μl)	100	200	200	300	500	1000	1000
补加FG2和蛋白酶K 混合液	10	30	100	300	500	1000	1000

储存条件：室温(15～30℃)。

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名称：柱式尿液DNA提取试剂盒
货号：BTN90314
规格：50次
尿液中的DNA主要是来自于尿道中脱落的细胞，用尿液DNA进行分子生物学基础研究和临床诊断有很多特殊的优点：
1)尿液收集物是非介入、无创伤性的。
2)从尿液中提取DNA要比从血液中提取DNA更加简单。本产品就是专门用于从尿液中提取基因组DNA的产品，提取的DNA可直接用于PCR反应。

产品特点：
1.操作简单，整个过程室温操作约20分钟，适合大规模样品处理。
2.DNA产率女性一般为53-200ng/mL尿液，男性一般为3-50ng/mL尿液。
3.所提取的DNA纯净，可直接用于PCR、DNA甲基化鉴定、癌症检测等。
4.安全，本试剂盒对人体，无腐蚀性和刺激性气味。
5.高，质量和国外同类产品相当，但价格更。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	20mL
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50mL
通用洗脱液	5mL
说明书	1份

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.收集1.5-50mL尿液样品到适当的离心管中，室温2000rpm离心10分钟。
2.小心吸弃上清，加入300μL溶液A，漩涡震荡，直到溶液变得澄清。
3.将液体转移到离心吸附柱中并静置2-5分钟，以使DNA与膜充分结合。
4.12000rpm离心半分钟，DNA将吸附到膜上，弃收集管中的废液。
5.加入0.7mL的通用洗柱液，12000rpm离心半分钟，弃收集管中的废液。
6.加入0.3mL的通用洗柱液，12000rpm离心半分钟，弃收集管中的废液。
7.12000rpm离心半分钟，甩干残留液体。此步很重要，以去除膜上残留通用洗柱液，否则会影响后续反应。
8.将离心吸附柱置于一新的1.5mL塑料离心管(自备)中，加入30μL通用洗脱液，室温放置2分钟。如果将通用洗脱液在65℃预热后再使用，洗脱DNA的效果会更好。
9.12000rpm离心半分钟，离心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或放冰箱长期保存。

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货号	名称	规格
BTN3660	非冻型组织DNA保存液	250mL
BTN101111	柱式软体动物DNA提取试剂盒	50次
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WE0398	游离DNA样本保存管(10ml)	5ml×5支|5ml×50支
WE0402	唾液DNA样本保存管	20套
ALH122	细胞/组织基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附)	50次|100次|200次
ALH133	细菌基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附)	50次|100次|200次

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