ZN1871 BCA蛋白浓度测定试剂盒

BCA蛋白浓度测定试剂盒是高品质的免疫检测产品，由北京百奥莱博供应，本产品仅用于生物化学研究方面，BCA蛋白浓度测定试剂盒是我司众多优质免疫检测之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括BCA蛋白浓度测定试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：BCA蛋白浓度测定试剂盒
产品货号：ZN1871
产品规格：250次/500次/2500次

主要成份：
A 液 50ml
B 液 2.5ml
蛋白标准品 10ml(2mg/ml)
产品描述：应用试管法可以测量 25 管，微孔板法可以测量 250 孔。
产品保存：室温保存，一年内有效。
产品说明：碱性条件下，蛋白将 Cu2+还原为Cu+,Cu+与 BCA 试剂形成紫颜色的络合物，吸光度强度与蛋白浓度成正比。测定其在 562nm 处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。
1.准确灵敏，线性范围广，BCA 试剂的蛋白质测定范围是 20－2000μg/ml。
2.快速：45分钟内完成测定。
3.经济实用：在微孔板中进行测定，可大大节约样品和试剂用量。
4.不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
注意事项：
1.低温或长期保存，若发现 BCA 试剂 A或者试剂 B 有沉淀发生。请 37ºC 温育并伴随搅拌促使其充分溶解。如发现细菌污染，则应丢弃，避免对实验结果造成影响。
2．不受大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中 5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20，60，80 等。(详情见附录)
3 每次测量蛋白浓度均应做标准曲线。
4.当试剂 A和 B 混合时会有浑浊，混匀后就会消失。
5.需准备 37℃水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计，测定波长为540-595nm 之间，562nm zuì佳。酶标仪需与 96 孔酶标板配套使用。使用分光光度计测定蛋白浓度时，试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。
6.使用 BCA 蛋白测定法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关，因此需注意保持定时和定温，以确保定量。
7.实验操作规范，提高上样量的度。
使用方法：
一．配制 BSA 标准品
注：标准品稀释液为蛋白样品的溶解液，原则上蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但也可用0.9%的NaCl或1×PBS 进行稀释。
二.配制 BCA 工作液
A.计算所需要的总 BCA 工作液体积。
总 BCA 工作液体积=(标准品+待测样品)×重复数×每个样品所需要的BCA 工作液
注意：试管法检测时每个样品加 2.0ml BCA 工作液，微孔板检测每个样品加 200μl BCA 工作液。
B.配制 BCA 工作液：50 体积的BCA 试剂 A 中加入 1 体积的BCA 试剂 B(A:B=50:1)，充分混匀。
注意：BCA 试剂 B 加入 BCA 试剂 A 中后，迅速浑浊，通过混匀后立即变澄清。BCA 工作液装入密封容器内，室温条件 24h 稳定。
三.试管法(样品：BCA 工作液=1:20)
1.各取 100μl 标准品和待测样品加入到反应管中。
2.每管加入 2.0ml BCA 工作液，混匀。37℃孵育30min。
注意：也可室温孵育2h，或者 60℃孵育30min。BCA 检测蛋白浓度，延长孵育时间会加深颜色反应。升高温度会加快显色反应。但是温度升高和时间延长会降低检测下限，以及降低工作线性范围
3.冷却到室温。在分光光度计上进行检测，设定波长为562nm。用装满水的比色皿对仪器校零。然后在 10分钟内对所有样品读数。
注意：由于 BCA 反应达不到真正的反应终点，即使温度降低至室温生色反应液会继续。但是，由于室温下生色比率相当低，因此若是 10min 内能对所有的样本进行 562nm 吸光度的测试，不会导致明显错误。
4.根据 BSA 标准品的吸光度(减去标准品中空白孔的OD 值即zuì终的读数)，绘制标准曲线(X-蛋白浓度 μg/ml；
Y-zuì终的OD562nm)。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白浓度。
四.微孔板法(样品：BCA 工作液=1:8)
1.各取 25μl 标准品和待测样品加入到微孔板中。
注意：样品与工作液比例为1:8，若样品有限，可使用 10μl 标准品和待检测样品进行检测(即 1:20)，这时试剂盒的检测范围为125-2000μg/ml。
2.每孔加入 200μl BCA 工作液，振荡 30s 充分混匀。盖上微孔板，37℃孵育30min。
3.冷却到室温，在酶标仪上的540～595nm 波长范围处检测吸光度，其中 562nm 波长为zuì佳。
注意：延长孵育时间或者提高样品：BCA 工作比会增高每个孔的OD562nm 净值，并且降低检测下限和工作线性范围。
4.根据 BSA 标准品的吸光度(减去标准品中空白孔的OD 值即zuì终的读数)，绘制标准曲线(X-蛋白浓度 μg/ml；
Y-zuì终的OD562nm)。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白浓度

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名称：Kisser封片液(不含苯酚)
货号：YT093
规格：10ml
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注意事项：封片液在温度较低时呈固态，使用前须在37-50℃温育，并在完全溶解后使用。

储存条件：4℃避光，有效期一年。

名称：Cy3抗兔免疫荧光染色试剂盒
货号：YT107
规格：>300次
本试剂盒含有Cy3标记的山羊抗兔IgG(H+L)抗体，可以用于检测兔来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的红色。Cy3是近年新开发的一种红色荧光探针。它比大部分其它的红色荧光探针更加明亮，更加不容易淬灭，而且背景更低。Cy3的吸收峰550nm、发射峰570nm。本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

试剂盒组份：
抗兔Cy3————————————30μl
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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