ZN1848 免疫荧光试剂盒

免疫荧光试剂盒由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品仅用于生物化学研究方面，本品质量稳定，价位合理，需要免疫荧光试剂盒等免疫检测产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括免疫荧光试剂盒(小鼠源IgM型一抗)(DyLight488)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：免疫荧光试剂盒(小鼠源IgM型一抗)(DyLight488)
英文名称：Immunofluorescence kit For Primary Antibody From Mouse (DyLight 488)
产品货号：ZN1848
产品规格：2ml|4ml|10ml

本试剂盒采用SABC系统，是专为免疫化学而设计的，用以显示组织或细胞中的抗原分布。DyLight是一种近年来被广泛应用的荧光染料，由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的光学耐受性（抗淬灭性）和特异性，对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的，标记的抗体比Cy2和FITC标记的更亮，但背景更低；DyLight 488-SABC，将链霉亲和素—生物素引入荧光系统，能进一步提高敏感性及降低背景。DyLight 488zuì大吸收峰 493nm；zuì大发射峰518nm。呈黄绿色。

试剂盒组成：

组分	规格
正常浓缩山羊血清(稀释比 1:10)	2ml/4ml/10ml
生物素标记羊抗小鼠IgM(参考效价1:100)	0.2ml/0.4ml/1ml
SABC-DyLight488(参考效价1:200-800)	0.2ml/0.4ml/1ml

另附有三个滴瓶可供稀释试剂用

保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。

石蜡片染色步骤：
1. 切片脱蜡至水。
2. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3. 封闭：滴加稀释的正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10),室温 20 分钟。甩干，勿洗。
4. 滴加适当稀释的一抗(小鼠 IgM)，37℃孵育 1~2 小时或4℃过夜。PBS洗5分钟×3次。
5. 滴加稀释的生物素标记羊抗小鼠 IgM(参考效价1:100),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×3次。
6. 滴加稀释的 SABC- DyLight 488(参考效价 1:200-800)，37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×4 次。
7. 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。荧光显微镜观察。

建议：
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954，与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。

根据您的关注的免疫荧光试剂盒(小鼠源IgM型一抗)(DyLight488)，您可能还对以下产品有需求：



名称：EDTA抗原修复液(10×)
货号：ZN1951
规格：100ml
规格说明：一个包装的本产品可以配制成 1000 毫升抗原修复液(1×)。按照每张标本需 10ml 抗原修复液(1×)计算，一个包装的本产品约可用于100 个样品。
产品用途：本产品特别适合用于石蜡切片，也可以用于冰冻切片等其它样品。
保存条件：4℃或-20℃保存，一年有效
产品简介：
EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，组织中的许多氨基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。因此，对于石蜡切片，要求在进行 IHC 染色前，行抗原修复，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，恢复抗原的原有空间形态。EDTA 缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用的IHC 抗原修复液。有部分抗原用 EDTA 缓冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。特别是对于某些核抗原效果会更明显。
本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
使用方法：
1．对于石蜡切片：
①切片脱蜡至水。
②3%H2O2处理切片10分钟。
③自来水冲洗，蒸馏水洗。
④ 抗原修复：将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95-100℃加热约 15分钟(加热时间可以控制在 10-20分钟内，zuì佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2．对于冰冻切片：
用免疫染色洗涤液洗涤切片 5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95-100℃加热约 15分钟(加热时间可以控制在 10-20分钟内，zuì佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。
3．对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
注意事项：
1.本抗原修复液使用前必须用重蒸水稀释 10倍，配制成抗原修复液(1×)。
2.请使用足量的修复液，修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
3.根据你的切片具体情况选择修复时间，如组织粘片不牢，容易掉片，请酌情减少修复时间。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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