MT0032 HGFS Taq DNA聚合酶

HGFS Taq DNA聚合酶是高品质的核酸扩增(PCR)产品，由北京百奥莱博供应，本产品用于生化实验研究等领域，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多HGFS Taq DNA聚合酶等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括HGFS Taq DNA聚合酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：HGFS Taq DNA聚合酶
英文名称：HGFS Taq DNA Polymerase
产品货号：MT0032
产品规格：250U(200T)|2500U(2000T)

HGFS Taq DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶中的一种，其经过基因工程改造的Taq（R660D/F667Y) DNA聚合酶基因。该DNA聚合酶具有较强的ddNTP的渗入能力，因此其适用于终止法DNA测序或SNP分析。

产品组成：

组分	250U	2500U
Klenow Fragment(exo-)（5 U/μl)	50μl	500μl
*10×Klenow Buffer	1ml	1ml×2

*10×Klenow Buffer: 500 mM Tris-HCl（pH 8.0 at 25 ℃), 50 mM MgCl2, 10 mM DTT.该酶兼容PCR Buffer和内切酶Buffer。

保存条件：-20℃，有效期3年。

单位定义：一个活力单位即在在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

使用方法：
1．按下表配制反应液：

加入物	加入量
HGFS Taq DNA Polymerase（5 U/μl)	0.25μl
5×Power PCR Buffer	10μl
dNTP Mixture(2.5 mM each)	2μl
*模板DNA	Xμl
引物F(10μM)	2μl
引物R(10μM)	2μl
ddH2O	Up to 50μl

模板DNA用量参数(50μl反应体系)：gDNA 100-1000 ng；Plasmid DNA 5-30 ng；cDNA from RT reaction 1-5μl

2．PCR扩增循环参数：

温度	时间	循环
95℃	2分钟	1st Cycle
95℃	20s	30-40 Cycles
Tm	20s
72℃	1kb/1分钟
72℃	2分钟	Last Cycle

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名称：PCR级甲酰胺
货号：BTN100839
规格：250mg
本产品为PCR级的甲酰胺，其可以促进某些引物、模板退火，降低带有二级结构的DNA的变性温度，是一种常用的PCR增强剂。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

名称：可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂
货号：BTN60901
规格：0.3mL
Taq DNA聚合酶是进行PCR的zuì常用工具酶，但是由于它在常温下还是具有部分活性，所以经常会出现非特异的扩增产物，尤其是当PCR反应体系中有大量非特异DNA存在的时候。目前zuì常见的解决方法是使用抗Taq DNA聚合酶的抗体和使用经过化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶(如AmpliTaq Gold)，但前者的缺点是加热后抗体会不可逆失活，后者的缺点是需要预热处理使酶激活。

产品特点：
1.可逆抑制Taq DNA聚合酶的活性，即常温抑制Taq酶活性，在45℃以上抑制功能丧失，当温度降低到45℃以下后，抑制活性又得以恢复。
2. 耐热，产品本身为非蛋白质试剂，远比Anti-Taq抗体稳定，便于保存和运输。
3. 使用简单，在加Taq酶前将本产品按PCR反应体积的1/10直接加入即可。
4.适用范围广，除Taq DNA聚合酶外，还可用于抑制其他DNA聚合酶的活性，如：Tth pol、Stoffel片段、Tfl pol、Tbr pol等。而一种酶的抗体一般对另一种酶的活性没有抑制作用。
5.与后续的RT-PCR兼容。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
在加入Taq或Tth DNA聚合酶之前，按PCR反应终体积1/10的比例将本产品加入到反应体系中混匀，然后再加入DNA聚合酶，启动PCR反应。

名称：双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)
货号：BTN91202
规格：50次
本产品是经过精心优化的、基于MMLV 逆转录酶和Taq DNA聚合酶的双酶一管式RT-PCR试剂盒，它含有除模版RNA和其专一性引物以外的所有RT-PCR试剂，包括MMLV 逆转录酶、Taq DNA聚合酶、RT-PCR缓冲液等，可以在同一反应管内完成RNA→cDNA→PCR反应(RT-PCR反应)。

产品特点：
1.一管式完成RT-PCR反应，避免样品交叉污染。
2. 即开即用，用户不需要单独准备RT-PCR所需的各种试剂。
3. 主要成分只有两个RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix，将加样步骤减少到zuì低，大降低了加样误差，增加了可重复性。
4. 使用范围广，适用于从病毒RNA 到人RNA的各种RNA 模板。
5.高灵敏度，每个RT-PCR 体系zuì低可以检测200拷贝的RNA分子，可扩增的模版RNA的zuì长达2000nt。
6. 所得RT-PCR产物可以直接用于AT克隆。

试剂盒组成：

成分	规格
双酶一管式RT-PCR Buffer(2×)	750μl
MMLV-Taq Mix	100μl
RNase-free水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意：所有离心管用前zuì好全部短暂离心几秒使管壁上溶液沉淀到管底。下面以一个30μL 体系的RT-PCR 为例，如果体积不同，各成分用量需要适当调节。
1.在一干净的无RNase的PCR管中，先加入下列成分：

成分	阴性对照	样品
RNA模板(自备，分下面三种情况)	无	见下
总RNA	无	100-500ng
或poly(A)mRNA	无	10-500ng
或体外转录得到的专一RNA	无	0.01 pg-500ng
RNA特异性引物一(自备)	终浓度300nM	终浓度300nM
RNA特异性引物二(自备)	终浓度300nM	终浓度300nM
探针(仅对Realtime RT-PCR)	终浓度200nM	终浓度200nM
RNase-free水	补到13μL	补到13μL
双酶一管式RT-PCR Buffer(2×)	15μl	15μl
MMLV-Taq Mix	2μl	2μl

注：通常初次使用本试剂时，可用引物浓度300nM，探针浓度200nM进行实验，根据实验结果具体情况，在200～800nM 范围内调整引物浓度，在50～400nM 范围内调整探针浓度以达到zuì佳检测效果。引物、探针、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整，同时增减DEPC 水用量，保证总反应体积不变即可。
2. 轻柔混合均匀后放入PCR 仪中进行RT-PCR。
3. 设定RT-PCR反应条件时，一般将RT的条件设定成42℃，30 钟，后接94℃变性5分钟，然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm 值由用户自行决定注)、zuì后72℃，5分钟。对Realtime PCR，在复性步骤设置荧光检测，检测通道：FAM/HEX/VIC/ROX/CY5
4. RT-PCR结束后取5-10μL电泳检查。

注意事项：
1. 使用已校准的移液器，选用一次性PCR反应管、离心管、tip 头等进行样本处理及配液等操作，所有用具应不含DNA酶和RNA酶。
2.引物、探针设计过程中应尽可能避免发夹结构、二聚体等现象的发生，探针的位置尽可能靠近上游引物，PCR 目标片段zuì好小于200bp，尽可能在150bp以内。
3. 实验样品尽可能新鲜，提取过程应严防RNA酶污染及操作不当导致的RNA 降解。
4. 使用本产品时建议对RT-PCR扩增条件、引物浓度和样品用量进行调整，选择zuì适当的引物浓度、样品浓度和PCR扩增条件。
5. 本产品使用前应在室温充分融解，并用漩涡震荡器充分混匀。
6. 统一配液后分装以减少加样误差，每次实验应设置阴性对照。
7. 禁止标记PCR反应管，避免外源性荧光信号干扰。
8. PCR反应管中不能有气泡，否则会产生非特异的荧光信号。若有气泡，可先用手指将气泡弹破，然后再低速离心消除。
9. 实时荧光PCR 仪器连续进行实验时，zuì好间隔一小时以上再使用。
10. 实时荧光PCR 仪需经常校正和清洁载样板板孔。
11. 若使用Roch LightCyclerTM荧光PCR 仪，应将毛细管放在专门套管中，以便分装反应体系和加入待检样品。前述操作完毕应低速离心数秒再将毛细管垂直缓慢放入样品架，以免折断；若发生折断，应小心取出，用专用小毛刷擦拭干净后方可进行扩增。
12. 实验室应严格分区，避免PCR产物污染。

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货号	名称	规格
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WE0119	结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)	50次
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