SY0489 JC-1线粒体膜电位检测试剂盒

JC-1线粒体膜电位检测试剂盒是高品质的细胞凋亡与增殖产品，由北京百奥莱博供应，本产品用于生化实验研究等领域，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多JC-1线粒体膜电位检测试剂盒等细胞凋亡与增殖产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括JC-1线粒体膜电位检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：JC-1线粒体膜电位检测试剂盒
英文名称：JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit
产品货号：SY0489
产品规格：100tests(6孔板)

JC-1线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit）是一种以JC-1 为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测，也是用来检测细胞早期凋亡的常用方法。

JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm 的理想荧光探针，JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内。正常线粒体内，JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物，聚合物发出强烈的红色荧光（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失，JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中，产生绿色荧光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。JC-1不仅可用于定性检测，因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测，因线粒体的去化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。观察时，只需使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。

线粒体膜电势的破坏是细胞凋亡早期发生的一个标志性事件。细胞受到凋亡诱导后线粒体膜电位的变化使得膜的通透性发生改变。膜通透性的增加，使得线粒体蛋白包括细胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸内切酶G（EndoG）、凋亡诱导因子（AIF）等从线粒体基质释放到细胞浆。细胞色素C的释放伴随膜电位的完全丧失，进而引发细胞凋亡酶的级联效应。

本试剂盒提供了CCCP 作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。对于六孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100 个样品；对于12 孔中的样品，本试剂盒共可以检测200 个样品。

试剂盒组份：

组分	规格	保存方法
JC-1(200×)	5× 100 μl/管	-20℃避光
JC-1染色缓冲液（5×）	80 ml	-20℃避光，也可4℃保存
CCCP（50 mM）	20 μl	-20℃避光
超纯水	90 ml	4℃保存

储存条件：20℃避光，尽量避免反复冻融，有效期一年

注意事项

1）JC-1（200×）在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20～25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
2）必须先把JC-1（200×）用试剂盒提供的超纯水充分溶解混匀后，才可以加入JC-1染色缓冲液（5×）。不可先配制JC-1染色缓冲液（1×）再加入JC-1（200×），这样JC-1会很难充分溶解，会严重影响后续的检测。
3）装载完JC-1后用JC-1染色缓冲液（1×）洗涤时，使JC-1染色缓冲液（1×）保持4℃左右，此时的洗涤效果较好。
4）JC-1探针装载完并洗涤后尽量在30分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。
5）请勿把JC-1染色缓冲液（5×）全部配制成JC-1染色缓冲液（1×），本试剂盒使用过程中需直接使用JC-1染色缓冲液（5×）。
6）如果发现JC-1染色缓冲液（5×）中有沉淀，必须全部溶解后才能使用，为促进溶解可以在37℃加热。
7）CCCP为线粒体电子传递链抑制剂，有毒，请注意小心防护。

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名称：Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒
货号：YT133
规格：20次|50次
本试剂盒是用EGFP标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。一个包装的本试剂盒共可以检测20个样品。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。

试剂盒组份：
Annexin V-EGFP—————————100μl
Annexin V-EGFP结合液——————12ml
碘化丙啶染色液—————————220μl

Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷酯结合蛋白，参与细胞内的信号转导。但仅Annexin V被报道可以调控一些PKC的活性。

Annexin V选择性结合磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine，简称PS)。磷酯酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷酯酰丝氨酸外翻到细胞表面，即细胞膜外侧。磷酯酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷酯酰丝氨酸结合后可以阻断磷酯酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。

用带有绿色荧光的荧光探针EGFP标记的Annexin V，即Annexin V-EGFP，就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷酯酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。

本试剂盒还提供了碘化丙啶染色液，碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞，呈现红色荧光。对于坏死细胞，由于细胞膜的完整性已经丧失，Annexin V-EGFP可以进入到细胞浆内，与位于细胞膜内侧的磷酯酰丝氨酸结合，从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。

综上所述，用Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色后，正常的活细胞不被Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色；凋亡早期的细胞仅被Annexin V-EGFP染色，碘化丙啶染色呈阴性；坏死细胞和凋亡晚期的细胞可以同时被Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色。

注意事项：
1. 如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
2. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
3. 如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-EGFP，zuì终导致染色失败。
4. 荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。

储存条件：4℃避光，有效期6个月。

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