SY0025 PCR Master Mix

PCR Master Mix 由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品用于科研试验，PCR Master Mix 是我司众多优质核酸扩增(PCR)之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括PCR Master Mix (含染料)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：PCR Master Mix (含染料)
英文名称：PCR Master Mix (With Dye)
产品货号：SY0025
产品规格：1ml

PCR Master Mix是即用型的常规PCR预混合溶液，含有Taq DNA Polymerase，dNTP混合物，MgCl2以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤，提高了高通量操作和实验结果的重现性。

Mix中加入电泳缓冲液和染料，使得PCR产物可以直接进行电泳，染料的存在不会干扰扩增效率。体系中含有的保护剂使得Master Mix 4ºC条件下长期放置，或经过反复冻融后仍可维持酶的活性以及产品的稳定性。PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子作为模板/引物，在74ºC，30min内摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

质量控制
核酸外切酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸外内酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时, DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中，以ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
功能检测：50 μl体系中，以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的360 bp条带。
稳定性检测： PCR Master Mix 分别在-20 ºC放置1年、4 ºC放置3个月、25 ºC放置1个月后，菌落PCR扩增1.2 kb片段。电泳结果显示2×PCR Master Mix具有非常好的稳定性。

操作注意事项
由于Taq DNA Polymerase室温下也有一定的反应活性，PCR反应体系配制需在冰上进行。体系混匀后快速置于PCR仪进行反应。这样可以减少反应准备阶段的非特异扩增，有助于得到更好的PCR结果。

引物设计注意事项
1.引物3’端zuì后一个碱基选择C或G；
2.引物3’端zuì后8个碱基应避免出现连续错配；
3.引物3’端尽量避免发卡结构的出现；
4.引物Tm值控制在55℃-65℃之间；
5.引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算；
6.引物GC含量控制在40%-60%之间；
7.正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。

根据您的关注的PCR Master Mix (含染料)，您可能还对以下产品有需求：


BTN131212 PCR Mix染料 10mL
BTN130985 免DNA提取PCR试剂盒(细胞组织裂解物直接PCR试剂盒) 100次
YT385 dATP溶液(100mM) 250μl
WE0143 快速实时荧光定量PCR预混体系(高含量ROX校正染料) 5ml
SY0029 2×PCR Plus Master Mix(不含染料) 5×1ml
JN0024 热启动Taq Plus DNA聚合酶 250U
JN0041 2×Ultra Taq PCR MasterMix 0.5ml×5

关注PCR Master Mix (含染料)，的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：



名称：dNTP溶液(10mM)
货号：BTN51208B
规格：0.5mL
本产品是dATP、dTTP、dGTP、dCTP四种核苷酸的混合液，每种核苷酸的浓度为10mM，纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。使用浓度根据具体的反应决定，请参考相关手册。



储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

DNA为何使用2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶？
 DNA为何不选择现成的光合作用产物核糖和合成RNA的原料尿嘧啶(uracil)分别作为其糖分子和碱基，而去选择需要额外的合成步骤才能得到的2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶(thymine)，其原因何在呢？目前的主流观点是：DNA不能选择核糖的原因之一是由于核糖2"位置上的OH基团会使得到的双螺旋骨架结构不均匀、不平行，难以有效地折叠进染色体结构中，而使用2"-脱氧核糖则能得到均匀平行的双螺旋结构；原因之二是核糖2"位置上的OH基团会对邻近的磷酸二酯键进行分子内亲核攻击，降低分子的稳定性，而对遗传物质来说稳定性十分重要，所以DNA选择了失去分子内亲核攻击能力的2"-脱氧核糖。对信使分子而言，稳定性并不重要，所以RNA仍然使用核糖。
 DNA使用胸腺嘧啶的原因是DNA中的胞嘧啶(cytosine)会缓慢水解变成尿嘧啶，如果尿嘧啶也是DNA的正常组成成份，则DNA修复系统就不能区分哪些尿嘧啶是正常的，哪些是需要修复的。使用胸腺嘧啶(比尿嘧啶分子多一个甲基)不但能保持跟尿嘧啶一样的形成碱基对的能力，同时又能跟尿嘧啶区别开来，使DNA分子中出现的任何尿嘧啶都能被尿嘧啶DNA糖苷酶(uracil-DNA glycosylase)发现和修复。

名称：PCR级绿如蓝DNA染料
货号：BTN70909
规格：0.1mL
第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I)在高浓度下会抑制荧光PCR，所以反应重复性很不稳定，并且不能用于要求严格的Tm分析。本产品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一样，是第三代饱和型荧光染料，在饱和浓度下也不抑制荧光PCR反应。

产品特点：
1. 饱和浓度不抑制PCR反应，因此得到的荧光信号更强。
2. 抗水解、抗热解和抗光解的能力强于目前zuì常用的SYBR Green I。
3. 饱和浓度下染料分子没有机会在DNA分子间发生移位，因此荧光强度跟DNA变性程度呈线性关系，可以用于精细的Tm 测定实验，如High-resolution melting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR 仪器(包括iCycler、LightCycler、ABI 测序仪)兼容。激发和发射光谱跟FAM和SYBR Green I 接近，可以使用SYBR Green I的光学设置参数。
5. 不能渗透进入细胞内，毒性和致突变性远低于SYBR Green I。
6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲线分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛细管电泳等研究。

储存条件：常温运输、-20℃避光保存，有效期一年。

使用方法：
先将本产品放置在室温融化，然后震荡10秒钟，短暂离心后待用。下面以50μL的标准PCR反应体系为例说明其使用：

1.在一干净的PCR 管中，加入下列成分：

试剂	加入量
10×PCR Buffer(No Mg2+)	5μl
MgCl2 50mM	2.5μl
dNTP 10mM	1μl
本产品(PCR级绿如蓝染料)	2.5μl
Taq DNA聚合酶	1-5U
DNA模板	适量
PCR引物	5-50 pmol each
补水到	50μl

2. 放入荧光PCR 仪中进行qPCR，并在退火或延长反应时记录荧光信号。使用的光学参数可以跟FAM或SYBR Green I 完全一样。

注意事项：
1. 如果使用iCycler，可以不加FAM；如果使用ABI系统，需要在Well Inspector选项下的非特异参照中选择“无”；使用LightCycler时，zuì好在PCR 体系中再加入终浓度为0.5mg/mL的BSA以降低仪器对染料和模板的非特异吸附。
2. 如果使用化学修饰过的Taq DNA聚合酶，可能需要减低KCl的浓度并提高Tris的浓度。

如果您觉得“SY0025 PCR Master Mix”描述资料不够齐全，请联系我们获取详细资料。(联系时请告诉我从给览网看到的，我们将给您最大优惠！)
本页链接：http://www.geilan.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-8573459.html
已经有753位访客查看了本页.