SY0286 多片段一步法快速克隆试剂盒

多片段一步法快速克隆试剂盒的品牌是百奥莱博，是优质的克隆与表达产品，本制品用于科研目的，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多多片段一步法快速克隆试剂盒等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括多片段一步法快速克隆试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：多片段一步法快速克隆试剂盒
英文名称：Plus Multi One Step Cloning Kit
产品货号：SY0286
产品规格：10T|5×10T

本试剂盒是一款简单、快速、的多片段DNA定向克隆产品，该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点。将载体在克隆位点进行线性化，并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列，使得插入片段PCR产物5’和3’zuì末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列(15 bp～20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合，在重组酶的催化下，仅需反应15-50 min即可进行转化，完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆，大的简化了实验步骤。

试剂盒中2×Enzyme Premix预混了重组酶和重组反应所需缓冲液，并添加了独特的重组增强因子，可显著提高重组克隆效率，即便使用低效率感受态细胞 (107cfu/μg)也可实现克隆 (100cfu/ng Vector)，使用该试剂盒，可以一次实现多至5个片段的顺序拼接克隆。重组体系还兼容常规酶切、PCR反应体系。

产品用途：该试剂盒可用于多片段拼接克隆、全基因合成和DNA定点突变。

产品组份：
2×Enzyme Premix*————100μl
pUC 19 control vector, linearized (50ng/μl)————5μl
Control insert Mix (0.5kb, 10ng/μl; 1kb, 20ng/μl; 2kb, 40ng/μl)————5μl

实验流程概览

1）线性化克隆载体制备；
2）插入片段扩增引物设计；
3）插入片段PCR扩增；
4）进行重组反应；
5）反应产物转化、涂板；
6）克隆鉴定。



根据您的关注的多片段一步法快速克隆试剂盒，您可能还对以下产品有需求：



名称：胚胎裂解液
货号：BTN130806
规格：1mL
本产品是胚胎培养过程中分离单个胚胎细胞的裂解液。可用于分离得到不同时期的胚胎的单细胞，得到的单细胞可用于各种单细胞分析，核酸提取等实验。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

名称：大肠杆菌JM110化学感受态细胞
货号：BTN130511
规格：10*100μl
 本产品是采用大肠杆菌JM110菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品，转化效率可达106。本产品为dam-，dcm-的菌株，排除dam，dcm甲基化的影响。
 菌株基因型为：dam dcm supE44 hsdR17 thi leu rpsLlacY galK galT ara tonAthrtscΔ(lac-proAB)F-[traD36 proAB+ lacIq cZΔM15]

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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货号	名称	规格
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BTN60209	pression/BTN60209.html" target="_blank">盐酸四环素溶液	10mL
BTN120702	pression/BTN120702.html" target="_blank">衣霉素溶液	1mL
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