SY0001 蛋白酶K

产品简介
蛋白酶K是高品质的DNA提取纯化产品,由北京百奥莱博供应,本产品用于科学研究,本产品质量好,且具价格,深为用户称道,了解更多蛋白酶K等DNA提取纯化产品请联系我司咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括蛋白酶K在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:蛋白酶K
英文名称:Proteinase K
产品货号:SY0001
产品规格:100mg|1g
Proteinase K(蛋白酶K)是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,其相对分子量约为29.3 kDa,可切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,应用广泛,可用于制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶等实验,变性剂如SDS(1%)可提高其活性,常用工作浓度为50-100µg/ml,根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。
产品特性
1)不含RNase和DNase;
2)来源于基因重组酵母菌株;
3)在尿素和SDS中稳定存在;
4)稀释液:纯水。
5)在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性,zuì佳pH范围为pH 7.5-8.0
6)反应条件:反应缓冲液中37℃-56℃温育1h;推荐反应温度选择50- 55℃;
7)活力单位定义:在37℃,pH7.5的条件下,每分钟释放1µM酪氨酸所需要的蛋白酶K量定义为1个活性单位。
8)失活方法:反应体系中加入PMSF或DFP抑制剂即可失活,65℃温育10-15min可部分失活。
9)电泳纯度:≥99%
10)酶活性值:≥30U/mg冻干粉
11)比活性值:≥40U/mg 蛋白
储存条件
粉末4℃干燥保存,2年有效。粉末长期不用,可置于-20℃冷冻保存。储存液需≤-20℃保存,避免反复冻融,短期使用可在4℃保存。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)启用后如需长期保存,需置于-20℃~-80℃冰箱冷冻或者过滤除菌。
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名称:痰液DNA提取试剂盒
货号:BTN111201
规格:50次
痰液是重要的检测样品,可以用于诊断肺癌,肺结核等各种疾病。但是从痰液中纯化DNA十分棘手,为此本公司开发了本产品,专用于从痰液或其他上呼吸道分泌样品中纯化DNA,用于后续的分子生物学分析。
产品特点:
1. 每次可以处理10-20mL痰液,得到2-5μg DNA。
2. 纯度高,可直接用于后续得PCR检测。
3.一管式操作,减少污染,节约成本。
4.含痰液保存液(溶液A),便于取样和运输。
5. 环保,不需要使用苯酚和氯fǎng等有毒的有机溶液。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A(痰液细胞固定液) | 500ml |
| 溶液B(痰液解稠剂) | 500ml |
| 溶液C | 30ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
一:痰标本的获取与保存(注意:痰液以及下列操作的废弃液都可能含有致病性的结核杆菌等致病菌,需按传染源相关规定流程进行操作)
1. 每例患者在常规痰标本采样时,zuì好连续三天采集三次样品以防误差。具体做法是先在每个50mL的痰液收集管内新鲜加入10mL溶液A和10mL溶液B,待患者晨起漱口后,咳深部痰7~8口(约10-20mL),收集到装有溶液A和溶液B混合液的痰液管收集内,混匀后储于4℃冰箱或阴凉处。第二、三天重复此操作。取足三管后一起送实验室,4℃冰箱保存直到使用。
2. 使用时,在室温反复振摇装有样品(总体积约30-40mL)的痰液收集管5~10分钟,充分混匀直到痰液中无粘稠痰块而呈均匀的液相。
3. 4℃2500g离心5分钟,弃上清。
4.沉淀再用自备的PBS液洗两遍。
5. 所得沉淀可以直接用于涂片,用于比较细胞形态学分析。也可以将细胞沉淀在0.2mL PBS缓冲液中重悬后转入1.5mL螺旋盖塑料离心管,-20℃冰箱长期保存,或立即用于下步的DNA提取。为避免盖子崩开而出现交叉污染或痰液的分枝杆菌污染环境,建议不要使用压盖式塑料离心管。同时zuì好设置一个阳性和一个阴性对照。
二:DNA提取
6.在上步所得的0.2mL样品中加入0.6mL溶液C。溶液C容易形成沉淀,用前需37℃加热融化并摇晃均匀。
7.室温放置10分钟。此间可以在每个管外壁上做个标记,以在下步区别向心面和离心面。
8. 振荡数秒后加入0.7mL自备的异丙醇,旋紧盖后振荡30秒混匀。
9. 把离心管的向心面对向转头,13,000-15000g室温离心至少15分钟。
10.小心移弃上清,注意不要触及管底和管壁离心面的DNA沉淀(此时可能看不见)。
11. 加入1.0mL 70%乙醇,振荡数秒后 15000g室温离心5分钟。注意:在离心机中放置离心管时将其向心面对向转头的中央。
12.小心移弃上清,注意不要触及管底和管壁离心面的DNA沉淀(此时呈膜状沉淀)。
13. 将离心管放回离心机再短暂离心数秒,然后用移液器移弃约50μL残留液体(70%乙醇),否则它会影响后续反应。
14. 加入200μl RNase-free水,用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁离心面的膜状DNA沉淀,溶液将呈混浊状,含少量不溶,短暂离心后存上清(含DNA)。
15. 直接取适量用于PCR,样品使用量不超过PCR体系的1/2。剩余DNA样品可以室温放置2小时,也可保存于-80℃保存一个月。
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