WE0186 鼠尾基因组DNA提取试剂盒

鼠尾基因组DNA提取试剂盒的品牌是百奥莱博，是优质的DNA提取纯化产品，本制品用于生化实验研究等领域，我公司专注于DNA提取纯化产品的研发、生产和供应，为您提供的鼠尾基因组DNA提取试剂盒质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括鼠尾基因组DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：鼠尾基因组DNA提取试剂盒
英文名称：Mouse&Rat Tail Genomic DNA Extraction Kit
产品货号：WE0186
产品规格：50次

  本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的小鼠或大鼠鼠尾中提取高纯度的总DNA。该试剂盒提供的方法简单易行，纯化过程无需苯酚或lǜ仿抽提，可获得zuì大为50 kb的DNA片段，同时对100 bp的片段也能有效回收。本试剂盒采用独特的裂解液，有效裂解鼠尾样本，优化的缓冲体系使裂解鼠尾后产生的DNA结合到硅基质吸附柱上，而其他污染物可流过膜；PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除，zuì后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可得到高纯度的DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。

试剂盒组成：

组份	50次
Buffer GTT	15ml
Buffer GL	15ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml
Buffer GE	15ml
蛋白酶K	25 mg
蛋白酶K 储存液	1.25ml
吸附柱DM及收集管	50套

自备试剂：无水乙醇

产品特点
1、专用于从大鼠或小鼠的鼠尾中分离纯化高纯度总DNA。
2、无需有机溶剂提取以及乙醇沉淀，彻底去除污染物及下游反应抑制物，快速提取高品质DNA。

实验前准备及重要注意事项：
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
3、次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GL于56℃水浴重新溶解。

操作步骤：
1、取一段大鼠或两段小鼠长度为0.4-0.6 cm的尾巴，在液氮中研磨成细粉或剪碎放入离心管(自备)中。加入180μl Buffer GTT，振荡混匀。
注意：确保组织的起始量不要超出推荐范围。
2、加入20μl 蛋白酶K ，涡旋振荡，彻底混匀。
3、置于56℃水浴，直至组织溶液完全清澈，一般情况下需要消化6-8小时，孵育过程中涡旋震荡，使样品均匀分散。
注意：1)如果孵育和涡旋震荡后仍然有胶状物质，必要时过夜消化或再加入20μl 蛋白酶K 消化，不会影响后续操作。
2)如需去除RNA，在上述步骤完成后加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(货号：WE0225S)，震荡混匀，室温放置5-10分钟。
4、12000rpm(~～13400×g)离心1分钟，以除掉未消化的类似于鼠毛等组织。将上清转移到一个新的离心管(自备)中。
5、加入200μl Buffer GL，涡旋震荡，充分混匀。加入200μl无水乙醇，涡旋震荡，充分混匀。短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
注意：
1)加入Buffer GL和无水乙醇后要立即涡旋震荡混匀。
2)如果多个样品一起操作，Buffer GL和无水乙醇可以等比例混匀后一起加入样品。
3)加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀，不会影响后续实验。
6、将步骤5中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μlBuffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤10；若洗脱体积小于200μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。

根据您的关注的鼠尾基因组DNA提取试剂盒，您可能还对以下产品有需求：



名称：红细胞裂解液A型(核酸纯化)
货号：BTN60403
规格：250mL
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性。由于红细胞是血液的主要细胞成份，不含DNA和RNA，其所含血红素能抑制PCR反应，所以先用本产品裂解红细胞，再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。

产品特点：
1.快速，一次处理只需要2-3分钟。处理后提取血液DNA可以不需要酚/lǜ仿去蛋白质。
2.，一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞，一般样品zuì多只需要处理两次。
3.扩容性好，可以一次处理多达几十毫升的样品，也可以处理100μL的血液。
4. 兼容性好，可以与市场上大多数血液DNA提取试剂盒结合使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在装有抗凝血液的离心管中，按1:1的比例加入红细胞裂解液A型并轻柔颠倒混匀。
2. 5000-10000 g室温离心2分钟，小心吸弃弃上清。
3. 将细胞沉淀重悬于1/2 体积的红细胞裂解液A型中，轻柔吹打混匀后5000-10000g室温离心2分钟。
4.沉淀即为去除了红细胞的血液细胞，可以直接用于后续的实验。

名称：一管式植物DNA提取试剂盒
货号：BTN60705
规格：50次
本试剂盒是一管式超快植物叶片和种子基因组DNA提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的PCR筛选。

产品特点：
1.快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA沉淀。
2.一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染，。
3.裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4.便于高通量和自动化，适合于科研单位、海关和企业对叶片和种子进行大规模的PCR筛选。
5.适用于大多数植物叶片和种子。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	5ml
溶液B	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
准备工作：溶液A有少量絮状物，用前zuì好37℃水浴10分钟使其溶解。

1.在0.5mL塑料离心管加入0.1mL溶液A。
2.将直径约为0.5-0.7cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到溶液A中。叶片样品可以用直径为6毫米的办公用打孔器获得，叶片不需要捣碎。如果使用种子，需要先将种子敲碎，然后取一碎片(约1/4粒豌豆大小)直接使用。
3.95℃保温10-15分钟。如果保温时间不够，容易产生非特异扩增。
4.加入0.1mL溶液B，用手摇晃约10次混匀。
5.不离心而直接取上清液作为模版进行PCR，模板的体积占PCR体积的1/10为宜。
6.剩余样品可以放4℃保存。
 注意:本产品提取的DNA不能用电泳方法检测。

疑难解答：
Q：为何PCR没有扩增产物？
A：1.可能是植物的PCR抑制剂浓度较高，建议用TE将上清液稀释5-10倍后再扩增。
2.建议使用已经优化好的PCR扩增条件。
3.建议使用百奥莱博PCR抑制物清除剂。
Q：用本产品是否跟Sigma的Extrac-N-Amp PCR Kit一样含有PCR试剂？
A：本产品不含PCR试剂，但用户可以选购百奥莱博的植物专一性PCR试剂盒(含植物专一性引物)或即用型PCR试剂盒(不含植物专一性引物)。

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