SY0176 GLI-GFP报告基因质粒

GLI-GFP报告基因质粒的品牌是百奥莱博，是优质的报告基因检测产品，本制品用于科研目的，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多GLI-GFP报告基因质粒等报告基因检测产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括GLI-GFP报告基因质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：GLI-GFP报告基因质粒
英文名称：GLI GFP Reporter Plasmid
产品货号：SY0176
产品规格：1μg

GLI-GFP报告基因是用于检测GLI转录活性水平为目的的报告基因。GLI是Hedgehog(HH)通路直接调控靶基因的转录因子，是该通路不同水平激活的zuì后共同通道，在致瘤过程中起着重要作用。HH信号通路参与胚胎发育、成人组织再生及修复，且在肿瘤细胞生长及转移过程中发挥重要作用。已有大量研究证实该信号通路的异常激活与多种肿瘤的发生发展密切相关。

GLI-GFP报告基因主要用于检测细胞中Sonic hedgehog信号通路活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMGLI-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个GLI结合位点，可以地检测GLI的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得GLI-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM GLI -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMGLI-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

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名称：萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒
货号：SY0058
规格：100T|500T|1000T
报告基因检测是现代分子生物学研究领域中分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件（如启动子、增强子和沉默子等）和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具。本萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒（Firefly Luciferase Reporter Gene Aassy Kit），是通过萤火虫荧光素（luciferin）为底物来检测萤火虫荧光素酶。荧光素酶在 Mg2+和 O2 参与下催化荧光素氧化成oxyluciferin，在荧光素的氧化过程中，发出生物荧光（bioluminomescence），然后通过化学发光仪或液闪测定仪测定生物荧光。

产品特点
1）简便，快捷。
2）灵敏度高，可检测10-20 mol的荧光素酶。
3）安全，非放射性。
4）酶的浓度线性范围可达8个数量级。

产品组份：

组分	100T	500T	1000T
细胞裂解液	60ml	60ml×5	60ml×10
萤火虫荧光素酶检测试剂	10ml	10ml×5	10ml×10

保存：未拆封试剂盒-20℃避光保存，有效期为 6 个月。-70℃避光保存，有效期为一年。试剂盒内萤火虫荧光素酶检测试剂（Firefly luciferase assay reagent）避光保存，不能反复冻融。

实验步骤

1. 细胞裂解：
1）将转入报告基因的细胞中的培养基移除，加PBS轻轻洗涤。按如下方案加入细胞裂解液（Cell lysis buffer），然后将培养板放在微型振荡器上室温振荡15min，充分裂解细胞。

细胞培养板	96孔板	48孔板	24孔板	12孔板	6孔板
细胞裂解液（µl/孔）	30µl	60µl	120µl	250µl	500µl

【注】：裂解产物可室温保存6h，4℃保存16h，-70℃可长期存放。（裂解产物不能多次反复冻融）。
2）将充分裂解后的裂解产物，10000-15000rpm离心3-5min。离心后将上清液移入新的EP管中进行后续检测。
2.荧光素酶检测：
1）按照仪器说明书要求将荧光测定仪打开，设定参数，测定时间为10s，测定间隔为2s。
2）将样品按照20～100µl的体积（如果样品量足够，请加入100µl）加入测量管中（保持每次样品的加样量一致），另外加入萤火虫荧光素酶检测试剂（Firefly luciferase assay reagent）混匀 2-3 次（不能漩涡混匀），充分混匀后测定RLU（Relative light unit），同时设置细胞裂解液（Cell lysis buffer）为对照孔。

注意事项
1）温度会对酶的活性会产生影响，因此所有试剂应放置室温后再使用。
2）如用单管荧光测定仪测定，每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致。
3）萤火虫荧光素酶催化的生物发光的zuì强发光波长为 560nm。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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