ALH331 TA克隆试剂盒

TA克隆试剂盒由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品用于科研试验，TA克隆试剂盒是我司众多优质克隆与表达之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括TA克隆试剂盒(不含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：TA克隆试剂盒(不含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)
英文名称：Zero Background TOPO TA Cloning Kit(without MCS)
产品货号：ALH331
产品规格：20次|80次

本试剂盒和传统的T4连接酶原理不同，它根据用拓扑异构酶可以在瞬间（几秒钟-几分钟）、（接近）连接DNA片段的原理，采用本公司独特的工艺制成。

试剂盒组份(20次)：
TOPO-Ta Simple Vector(30ng/μl)—————20μl
1000bp Control（30ng/μl）————5μl
10×Enhancer———————————20μl

产品特点：
1. 可以在瞬间（几秒钟-几分钟）完成连接。
2. 无需冰浴和热休克，室温5分钟内完成转化；无需1小时复苏，只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。
3. 无自连、零背景，无需繁琐蓝白斑筛选，见到长出的克隆便是有插入的（接近）。
4. 可以连接长达10kb片段（即使连接5kb片段，挑10个菌落，至少8个是有插入的），是目前上zuì简单、zuì快速、零背景免筛选的TOPO TA克隆载体。

储存条件：-20℃，有效期12个月。

本制品别名：TA克隆载体连接试剂盒

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名称：DNA粘转平试剂盒
货号：BTN60107
规格：20次
本产品利用Pfu DNA polymerase所具有3′到5′的聚合酶活性和5′到3′外切酶活性，将3′或5′突出的DNA片段转化成平末端，用于克隆工作。

产品特点：
1. 简单，精心优化过的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分，不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA载体。

产品组成：

成分	规格
Pfu DNA Polymerase(3U/μL)	20μl
2×Polishing Buffer	0.5ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。

使用方法：

1. DNA片段的准备：
无论是来源Taq，Tth,T7，Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA片段，还是用限制性内切酶制备的DNA片段，粘转平之前均需要将DNA沉淀以便去除反应液中的无关成份。沉淀DNA的方法包括经典的盐/纯沉淀法，离心柱DNA 吸附法和百奥莱博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2. 设置粘转平(Polishing)反应：

在一个干净的离心管中，分别加入
3′或5′突出的DNA片段	10-500ng
2×Polishing Buffer	25μL
Pfu DNA polymerase	1μL
补水到	50μL
72℃保温2小时。

注意：如果不使用热盖式PCR 仪器加热，则需要在反应管中再加入适量液体石蜡以防反应过程中水份蒸发。
3.反应后处理
粘转平反应后，样品可以放-20℃长期保存，也可以直接用于T4 DNA连接酶催化的连接反应。对10μL的连接反应体系，一般需要加入1-2μL粘转平反应液。由于Pfu DNA polymerase在连接反应的温度条件下几乎没有活性，所以不必去除。但文献报道，去除后连接效率更高。

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