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产品详情

MQ0002 0化学感受态细胞

  • 产品/服务:MQ0002 0化学感受态细胞
  • 型 号:MQ0002
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-04-21
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:921
产品简介

0化学感受态细胞由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品仅用于生物化学研究方面,我公司的0化学感受态细胞品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...

产品详细介绍

特别提示:包括0化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:0化学感受态细胞
英文名称:0?Chemically Competent Cell
产品货号:MQ0002
产品规格:20×100μl/100×100μl

0菌株来源于MC1061菌株,是目前实验室zuì常用的感受态细胞之一,基因型与DH10B高度类似(DH10B为galE15型,而0为galU型)。
0生长速度快(比DH5α快,但比Mach1-T1生长速度慢),10小时可见克隆,recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
可用于构建克隆,蓝白斑筛选等实验,具有链霉素抗性。0感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率>108cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZΔM15Δ lacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(StrR)endA1 nupG
操作说明:
1.0感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少13h。
注意事项:
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。

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货号 名称 规格
BTN140430 pression/BTN140430.html" target="_blank">大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞 0.1mL*10
BTN80910 pression/BTN80910.html" target="_blank">X-gal溶液 10mL
BTN60207 pression/BTN60207.html" target="_blank">氯霉素溶液 10mL
BTN120685 pression/BTN120685.html" target="_blank">先锋霉素溶液 1mL
YT442 pression/YT442.html" target="_blank">pGL6报告基因质粒 1μg
ALH351 pression/ALH351.html" target="_blank">通用型T载体克隆菌落PCR检测试剂盒 80次|400次
SY0023 pression/SY0023.html" target="_blank">pCMV/myc/mito 线粒体定位表达载体(哺乳动物细胞) 1μg


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名称:平末端DNA加A试剂盒
货号:BTN60105
规格:50次
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性,在只有dATP 存在的情况下,在平末端的DNA片段加上一个dA 尾巴,使平末端片段也能被T载体克隆。其流程图如下:
加A试剂盒流程图

产品特点:
1. 简单,2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
3.产物可以直接用于与T载体的连接。

试剂盒组成:
成分 规格
Taq DNA polymerase(5U/μL) 50μl
2×Tailing Buffer 1.25ml
说明书 1份


储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

使用方法:

一:反应前纯化处理:
用Vent,Deep Vent,Pfu,Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段,必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/氯fǎng抽提或Proteinase K处理),否则它们将在加A反应时,切除掉加上的A尾巴,干扰反应。可以采取胶回收和酚/氯fǎng抽提法等常规方法纯化,zuì后溶解在水或TE中,终浓度以0.1μg/μL为宜。
二:加A反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中,分别加入下列成分:
回收的DNA片段 0.2-2ug
2×dA Tailing Buffer 25μL
Taq DNA polymerase(5U/μL) 1μL
补水到 50μL
72℃保温2小时

三:反应后处理
加A反应后,Taq DNA pol

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