WH0002 抗凝血液基因组DNA提取试剂盒（

抗凝血液基因组DNA提取试剂盒（的品牌是百奥莱博，是优质的DNA提取纯化产品，本制品仅用于生物化学研究方面，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多抗凝血液基因组DNA提取试剂盒（等DNA提取纯化产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括抗凝血液基因组DNA提取试剂盒（0.1-20ml全血)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：抗凝血液基因组DNA提取试剂盒（0.1-20ml全血)
英文名称：Extraction kit for genomic DNA from Blood anticoagulated
产品货号：WH0002
产品规格：50mL血|200mL血

本试剂盒采用独特的缓冲液系统，提取0.1-20ml加入各种抗凝剂的新鲜血液和冻存血液样品基因组DNA。本缓冲液系统可zuì大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染。提取的基因组DNA片段大，产量高，纯度好，稳定可靠。本试剂盒避免使用苯酚、氯fǎng等有机溶剂，回收的DNA可适用于各种常规操作，如酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

试剂盒特点：
1．纯净：所得DNA沉淀为无色透明。在裂解过程中可将核酸与色素等杂质分离，全新漂洗液使杂质去除更彻底，更适合于高纯度要求的下游实验和长期保存。
2．快速：经过升级的CLA溶液处理配合独特的FGA缓冲液，既可以更好的裂解红细胞释放DNA提高得率，又对基因组DNA损伤小，可以保护DNA的完整性。
3．应用广泛：可处理0.1-20ml血液样本，既可以获得高得率的DNA，OD₂₆₀/230比值稳定在2.0以上，盐离子及蛋白质等杂质残留可以满足芯片杂交，高通量测序等更多对DNA纯度高的下游应用。

试剂盒组成：

组分	可处理50ml血液	可处理200ml血液
细胞裂解液CLA	125 ml	2×250 ml
缓冲液FGA	40 ml	160 ml
洗脱缓冲液TB	30 ml	60 ml
Proteinase K	250μl	1ml

保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。

注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．血液样品反复冻融，会导致提取的DNA片段较小、且提取量下降。所得基因组DNA也应尽可能避免反复冻融，以免断裂。
2．血液样品的储存：
  a)短期保存：已加入抗凝剂的血液样品可在2-8℃储存zuì多10天，对于某些实验例如Southern杂交等，需要得到完整全长的基因组DNA，请将血液样品在2-8℃储存不超过3天，此时基因组DNA的降解程度较轻。
  b)长期保存：已加入抗凝剂的血液请置于-70℃保存（如果提取的是高分子量的DNA，推荐使用EDTA作为抗凝剂）
3．所有离心操作均可在室温下完成。

提取得率（根据血液样品中白细胞数量的不同，DNA产量有所差异）

材料	保存时间	提取量	DNA产量	OD260/OD280
人类全血	4℃一周	300 μl	3-10μg	1.7～1.9
人类全血	4℃一周	1 ml	4-30 μg	1.7～1.9
人类全血	4℃一周	5 ml	100-200 μg	1.7～1.9
人类全血	4℃一周	10 ml	200-400 μg	1.7～1.9

使用方法：
一、小体积全血操作流程（<600μl血样；以300μl血液处理量为例）
1．向300 μl抗凝剂的血液中加入750 μl细胞裂解液CLA，颠倒混匀20次。
  注意：为方便与离心机配套使用，可加入与血液等体积的细胞裂解液CLA,重复裂解两次。
2．12000rpm （~13400×g)离心1 min。倒弃上清，将离心管倒置在干净的吸水纸上停留2 min，确保沉淀在管中（此步骤应小心操作，为避免沉淀被倒出，推荐使用尖底离心管）。
  注意：在少的情况下沉淀可能会很松弛，所以要缓慢倒上清，将离心管倒置在吸水纸上是为了减少管壁上清的回流。
3．按照表1配制缓冲液FGA与Proteinase K的混合液。
  注意：此混合液zuì好现用现配，并在配好后1h之内用完。
4．加入200 μl缓冲液FGA与Proteinase K的混合液，立即上下剧烈震荡或涡旋混匀至溶液无团块。
  注意：当处理多个样品时，加入缓冲液FGA和Proteinase K的混合液后要立即上下剧烈震荡或涡旋混匀，不要等所有的样品加完后再混匀。有可能出现痕量的胶状沉淀难以混匀，此时可再次补加缓冲液FGA和Proteinase K的混合液（具体补加量见表1），再次涡旋混匀。
5．65℃水浴10min，其间颠倒混匀数次。
6．加入200 μl异丙醇，上下颠倒混匀50次至出现丝状或簇状基因组DNA。
注意：与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要，应该仔细观察。
7．12000rpm（~13400×g)离心5 min，倒弃上清。将离心管倒置在干净的吸水纸上，确保沉淀在管中。
  注意：在少的情况下沉淀可能会很松弛，所以要缓慢倒上清。如果样品的白细胞数量足够多，可以看到白色的DNA沉淀。
8．加入300 μl 70%乙醇，涡旋振荡5 sec，12000rpm（~13400×g)离心2 min，倒弃上清。
9．将离心管倒置在干净的吸水纸上停留至少5 min，确保沉淀在管中。
  注意：在少的情况下沉淀可能会很松弛，所以要缓慢倒上清，将离心管倒置在吸水纸上是为了减少管壁中上清的回流。
10．空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净（至少5 min）。
  注意：乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。但是要避免过分干燥DNA沉淀，因为过于干燥的DNA很难溶解。
11．加入200 μl缓冲液TB，低速涡旋5 sec，65℃加热20 min溶解DNA，其间轻弹数次助溶。
  注意：如有难溶性物质存在，可将65℃孵育时间延长至1h。
二、中量全血操作流程（1-10 ml血样；以5 ml血液处理量为例）
1．向5 ml含抗凝剂的血液中加入5 ml细胞裂解液CLA，颠倒混匀20次，3,600rpm（~2,000×g)离心2 min，倒弃上清。
2．再向其中加入7.5 ml细胞裂解液CLA，颠倒混匀20次，3,600rpm （~2,000×g)离心2min。倒弃上清，将离心管倒置在干净的吸水纸上停留2 min，确保沉淀在管中（此步骤应小心操作，为避免沉淀被倒出，推荐使用尖底离心管）。
  注意：在少的情况下沉淀可能会很松弛，所以要缓慢倒上清，将离心管倒置在吸水纸上是为了减少管壁上清的回流。
3．按照表1配制缓冲液FGA与Proteinase K的混合液。
  注意：此混合液zuì好现用现配，并在配好后1小时之内用完。
4．加入3.3 ml缓冲液FGA与Proteinase K的混合液，立即上下剧烈震荡或涡旋混匀至溶液无团块。
  注意：当处理多个样品时，加入缓冲液FGA和Proteinase K的混合液后要立即上下剧烈震荡或涡旋混匀，不要等所有的样品加完后再混匀。有可能出现痕量的胶状沉淀难以混匀，此时可再次补加缓冲液FGA和Proteinase K的混合液（具体补加量见表1)，再次涡旋混匀。
5．65℃水浴10-30 min，其间颠倒混匀数次。
6．加入3.3 ml异丙醇，上下颠倒充分50次至出现丝状或簇状基因组DNA。
  注意：与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要，应该仔细观察。
7．3,600rpm（~2,000×g )离心8 min，倒弃上清。将离心管倒置在干净的吸水纸上，确保沉淀在管中。
  注意：在少的情况下沉淀可能会很松弛，所以要缓慢倒上清。如果样品的白细胞数量足够多，可以看到白色的DNA沉淀。
8．加入5 ml 70%乙醇，涡旋振荡5 sec，3,600rpm（~2,000×g )离心3 min，倒弃上清。
9．将离心管倒置在干净的吸水纸上停留至少5 min，确保沉淀在管中。
  注意：在少的情况下沉淀可能会很松弛，所以要缓慢倒上清，将离心管倒置在吸水纸上是为了减少管壁中上清的回流。
10．空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净（至少5 min）。
  注意：乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。但是要避免过分干燥DNA沉淀，因为过于干燥的DNA很难溶解。
11．加入500 μl缓冲液TB，低速涡旋5 sec，65℃加热30 min溶解DNA，其间轻弹数次助溶。
  注意：如果使用少量的缓冲液TB溶解DNA，孵育时间可能需要延长。
三、大量全血操作流程（10-20ml血样；以10 ml血液处理量为例）
1．处理样品：
a．离心富集有核细胞进行核酸提取：将血样3,600rpm（~2,000×g )离心15-20 min，抽弃血浆，取中间白膜层细胞加入到15 ml离心管中，加入10 ml细胞裂解液CLA，涡旋混匀10 sec，3,600rpm（~2,000×g )离心2 min，倒弃上清。再加入15 ml细胞裂解液CLA，涡旋混匀10 sec，3,600rpm（~2,000×g )离心2 min，倒弃上清。
b．细胞裂解液CLA处理血液标本分次富集有核细胞进行核酸提取：在15 ml离心管中添加细胞裂解液CLA和血液样本（比例2.5:1），多次富集进行下游实验。
  （例10 ml全血处理方式：在两个15 ml离心管中分别加入5 ml的全血和10 ml细胞裂解液CLA，颠倒混匀5次，3,600rpm （~2,000×g )离心3 min，倒弃上清；再向其中加入2.5ml细胞裂解液CLA，涡旋混匀10 sec，混合到一支离心管里，3,600rpm（~2,000×g )离心3 min，倒弃上清；进行下游操作。）
  注意：细胞裂解液CLA处理步骤应小心操作，为避免沉淀被倒出，推荐使用尖底离心管。在少的情况下细胞裂解液CLA处理得到的沉淀可能会很松弛，所以要缓慢倒上清。
2．按照表1配置缓冲液FGA与Proteinase K的混合液，对于10-20ml的全血标本，每个样品需要6.7 ml缓冲液FGA与Proteinase K工作液。
  注意：此混合液zuì好现用现配，并在配好后1h之内用完。
3．加入6.7 ml缓冲液FGA与Proteinase K的混合液，立即上下剧烈震荡或涡旋混匀至溶液无团块。
  注意：当处理多个样品时，加入缓冲液FGA和Proteinase K的混合液后要立即上下剧烈震荡或涡旋混匀，不要等所有的样品加完后再混匀。有可能出现痕量的胶状沉淀难以混匀，此时可再次补加1 ml缓冲液FGA和Proteinase K的混合液，再次涡旋混匀。
4．65℃水浴30 min，其间颠倒混匀数次。
  注意：随着蛋白的消解，溶液的颜色从红色变为黄绿色。
5．加入6.7 ml异丙醇，上下颠倒混匀50次至出现丝状或簇状基因组DNA。
  注意：与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要，应该仔细观察。
6．离心3,600rpm（~2,000×g )离心10min，倒弃上清。将离心管倒置在干净的吸水纸上，确保沉淀在管中。
  注意：如果得到的团块过于松弛，可以延长离心时间或者增大离心力。
7．加入10 ml 70%乙醇，涡旋振荡5 sec，离心3,600rpm（~2,000×g )离心3 min，倒弃上清。
  注意：如果得到的团块过于松弛，可以延长离心时间或者增大离心力。
8．将离心管倒置在干净的吸水纸上停留至少5 min，确保沉淀在管中。
  注意：在少的情况下沉淀可能会很松弛，所以要缓慢倒上清，将离心管倒置在吸水纸上是为了减少管壁中上清的回流。
9．空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净（至少5 min）。
  注意：乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。但是要避免过分干燥DNA沉淀，因为过于干燥的DNA很难溶解。
10．加入1 ml缓冲液TB，低速涡旋5 sec，65℃加热1h溶解DNA，其间轻弹数次助溶。
  注意：如果使用少量的缓冲液TB溶解DNA，孵育时间需要延长。

根据您的关注的抗凝血液基因组DNA提取试剂盒（0.1-20ml全血)，抗凝血液gDNA提取试剂盒，全血gDNA提取试剂盒，全血基因组DNA提取试剂盒，您可能还对以下产品有需求：

货号	名称	规格
BTN3660	非冻型组织DNA保存液	250mL
BTN70502	石蜡包埋组织DNA提取试剂盒	30次
BTN80801	柱式拭子DNA提取试剂盒	50次
BTN60705	一管式植物DNA提取试剂盒	50次
BTN130831	丝状真菌线粒体DNA提取试剂盒	15次
BTN80101	一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒	50次
BTN3674	一管式病毒DNA提取试剂盒	50次

关注抗凝血液基因组DNA提取试剂盒（0.1-20ml全血)，抗凝血液gDNA提取试剂盒，全血gDNA提取试剂盒，全血基因组DNA提取试剂盒的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：



名称：红细胞裂解液A型(核酸纯化)
货号：BTN60403
规格：250mL
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性。由于红细胞是血液的主要细胞成份，不含DNA和RNA，其所含血红素能抑制PCR反应，所以先用本产品裂解红细胞，再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。

产品特点：
1.快速，一次处理只需要2-3分钟。处理后提取血液DNA可以不需要酚/氯fǎng去蛋白质。
2.，一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞，一般样品zuì多只需要处理两次。
3.扩容性好，可以一次处理多达几十毫升的样品，也可以处理100μL的血液。
4. 兼容性好，可以与市场上大多数血液DNA提取试剂盒结合使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在装有抗凝血液的离心管中，按1:1的比例加入红细胞裂解液A型并轻柔颠倒混匀。
2. 5000-10000 g室温离心2分钟，小心吸弃弃上清。
3. 将细胞沉淀重悬于1/2 体积的红细胞裂解液A型中，轻柔吹打混匀后5000-10000g室温离心2分钟。
4.沉淀即为去除了红细胞的血液细胞，可以直接用于后续的实验。

名称：柱式土壤DNA提取试剂盒
货号：BTN71205
规格：50次
本试剂盒专门用于从各种土壤样品和河海沉积物中提取高质量的DNA的试剂。

试剂盒特点：
1. 去污染效果更好，得到的DNA可以直接作为PCR模板或酶切，不需要再进行去腐殖酸处理。
2. 操作过程更加简单快速，整个操作只需要10多分钟，扩容性好。
3.产量高，每克土壤一般可以提取到5-50μg DNA，片段长度在20-50 Kb，OD260/280一般都在1.8以上。
4.适合于各种土壤(包括河海沉积物)。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	25ml
溶液B	25ml
溶液C	40ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，保存期为一年。

使用方法：
1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后充分混匀，取0.5mL加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取0.1-0.3 g的土壤，加入到含预热溶液A的离心管中，震荡器上剧烈震荡5-10分钟。如果是扩量操作，可以使用更多土壤和较大离心管。也可以将同一种土壤在较大离心管中震荡处理，然后再分到1.5mL离心管中。注意:不论使用大的还是小的离心管，一定要让管底的土壤震荡起来。
3. 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4. 12000～15000g室温离心3分钟，将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈淡黄色或深棕色，实际颜色取决于腐殖酸的含量，上清液的体积一般为300-400μl)。
5.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀，溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少5分钟。
7. 12000～15000g室温离心3分钟，转移上清到新的1.5mL离心管中，上清液颜色将比第4步得到的上清的颜色稍淡，体积在0.7mL左右。
 注意：下面第8-第9步的氯fǎng抽提操作可以省略，直接进入第10步，但DNA的产量会低50%左右，OD260/280在1.7-1.8。如果直接进入第10步，则转移的溶液体积不要超过0.6mL，否则没有空间加溶液C。
8. 加入0.2mL的氯fǎng(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9. 12000～15000g室温离心3分钟，小心转移上清到新离心管中。说明：离心后两相交界面将有白色膜状物，其中有机相部分颜色较深，一般呈淡棕色。上清的颜色取决于土壤中腐殖酸的含量。将上清转移到新的1.5mL离心管时，不要超过0.6mL，否则没有空间加溶液C。如果有多余的可以弃之不用。
10. 加入1.5倍体积的溶液C，上下颠倒30秒混匀。
11. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液)。
12. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
13. 如果有必要，可以再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。增加一步洗涤能使zuì后得到的DNA的纯度稍有提高，但产量稍微有所降低。
14. 12000～15000g室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
15. 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中，加入50-100μL DNA洗脱液2.0。
16.室温放置离心吸附柱1-2分钟。
17. 12000～15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。

疑难解答：
Q: 如何判断提取的DNA没有腐植酸污染？
A：方法一是目测法，即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色，说明可能是少量残留的未除尽的腐植酸。方法二是检测zuì大光吸收。注意：有腐植酸污Q: 如何判断提取的ＤＮＡ没有腐植酸污染？
A：方法一是目测法，即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色，说明可能是少量残留的未除尽的腐植酸。方法二是检测zuì大光吸收。注意：有腐植酸污染并不表示 DNA 不能使用，有的腐殖酸并不抑制 PCR扩增。
Q: 腐殖酸的zuì大吸收波长是多少？
A：腐植酸(humic acid)是一大类呈棕黑色或黑色的物质，其结构千差万别，土壤中腐殖酸的组成和特点随土壤不同而不同，所以其zuì大吸收波长也各不相同，有的土壤的腐殖酸在 260nm 有zuì大吸收(见 Appl.Environ. Microbiol.，63：4993，1997)，有的则在 340nm。所以用特定的波长测定 OD 值时波长的选定要根据土壤而决定。Sigma，Fluke等公司出售的腐植酸产品成分一般比较简单，其zuì大吸收波长不能推广到成分更为复杂的土壤腐殖酸样品。
Q:是否腐植酸都会抑制后续的DNA反应？
A：否，因为腐植酸是一大类物质的统称，他们的结构和特性各不相同，所以是否对后续反应有影响zuì好通过实验来验证。如果用提取的DNA溶液原液进行反应而反应没发生，而对照样品(已知的不含污染的DNA)能够发生，说明可能抑制作用。
Q：如果得到的DNA样品还是含有抑制后续反应的腐植酸，如何去除？
A：如果提取的DNA原液不能扩增，可以将样品稀释10倍和100倍再进行 PCR，抑制作用一般可以解除。如果仍然抑制，可以使用我公司的PCR Inhibitor Scavenger(BTN60804)。如果仍然不能解除，则可以通过柱式腐殖酸清除剂(BTN60801)或先电泳，再用片段胶回收试剂 Magic Gel DNArc(BTN60706)纯化土壤 DNA，去除残留抑制剂。其中后两方法zuì有效，得到的原液一般可以直接扩增。
Q：在用土壤 DNA进行细菌专一性 PCR时，为何没加 DNA 模版的阴性对照有扩增产物出现？
A：这是由于使用的Taq DNA聚合酶一般从E.coli表达菌株中提取，提取过程中污染了E.coli的基因组 DNA，而使用的广谱细菌专一性引物可以识别所有细菌DNA基因组DNA模版，所以会产生扩增。建议使用高质量的Taq DNA聚合酶。

如果您觉得“WH0002 抗凝血液基因组DNA提取试剂盒（”描述资料不够齐全，请联系我们获取详细资料。(联系时请告诉我从给览网看到的，我们将给您最大优惠！)
本页链接：http://www.geilan.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-8563285.html
已经有872位访客查看了本页.