ALH027 细菌RNA提取试剂盒

细菌RNA提取试剂盒是高品质的RNA提取纯化产品，由北京百奥莱博供应，本产品用于科学研究，本品质量稳定，价位合理，需要细菌RNA提取试剂盒等RNA提取纯化产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括细菌RNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：细菌RNA提取试剂盒
英文名称：Bacterial total RNA Extraction Kit
产品货号：ALH027
产品规格：20次|50次

本试剂盒适用于快速提取细菌总RNA。采用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， zuì后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,lǜ仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

试剂盒组份：

组份	20次	50次
TE (PH8.0)	6ml	6ml
溶菌酶	20mg	20mg
裂解液RLT	20ml	50ml
去蛋白液RW1	15ml	40ml
漂洗液RW	5 ml	10ml
RNase-free H2O	10ml	10ml
吸附柱和收集管	20套	50套

注意事项：
1.次使用前请先在漂洗液RW瓶加入量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇。
4. 裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 预防RNase 污染，应注意以下几方面：
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA在裂解液RLT中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时，塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。）
6. 关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本公司的RNA 提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数RT-PCR 扩增过程中其微量的DNA 残留（一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁,请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上进行DNase I处理。请联系我们索取具体操作说明书。
7. RNA纯度及浓度检测：
完整性： RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb，分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中zuì大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。

纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9
之间，但这并不表示RNA 不纯。

浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40

储存条件：室温，有效期12个月

本制品别名：细菌RNA提取试剂盒|细菌总RNA提取试剂盒|细菌RNA纯化试剂盒|细菌RNA抽提试剂盒

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货号	名称	规格
BTN3070	动物RNA提取试剂(TRIzol)	100mL
BTN101121	软骨RNA柱式提取试剂盒	50次
BTN160907	植物RNA提取试剂盒2.0(无lǜ仿柱式提取)	50次
BTN130699	RNase抑制剂(小鼠源)(40U/μL)	3000U
BTN81209	去离子水	250mL
ALH069	DNA/RNA/miRNA分离提取试剂盒	50次

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名称：病毒沉淀剂
货号：BTN110810
规格：100mL
生物医学实验中，常常需要从液体样品(如血浆，培养基)中纯化病毒，但由于病毒颗粒十分细小，传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来，此操作非常繁琐，并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点，本公司开发了本产品。

产品特点：
1. 能浓缩病毒100倍以上，适合各种病毒。
2. 比超速离心法、密度梯度离心分离法和过滤法更温和，回收率更高，并且大部分病毒能保持活性，适合各种后续实验，包括转染实验和核酸纯化。
3. 比超速离心法和密度梯度离心分离法简单，不需要大型离心机等设备。
4.适合水样、细胞培养基上清和其他不含细胞的样品。本产品100mL可以处理400mL含病毒的溶液，可以将病毒浓缩100倍以上。
5. 已经成功用于coronaviruses 、rhabdoviruses 、parainfluenzaviruses 、respiratory syncytial virus、rubella virus、picornaviruses等病毒。
6. 对环境水样，请不要使用本产品，而是使用水体病毒沉淀剂。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂：PBS缓冲液或TES缓冲液(用于重悬病毒)

使用方法：
注意：需要尽量减少含病毒溶液中蛋白的浓度。收集培养细胞分泌的病毒前，zuì好换上不含血清蛋白和其他蛋白成分的培养基。
1. 将培养细胞刮下，和培养基一起全部转移到干净的离心管中，10000rpm 4℃离心20分钟。转移上清(含病毒)到新离心管中。如果培养细胞内还有病毒颗粒，并且病毒颗粒可以抵抗冻融，则可以把细胞冻融数次，释放出包浆的病毒，然后再转移到干净的离心管中，10000rpm 4℃离心20分钟。转移上清(含病毒)到新离心管中。如果病毒溶液不含细胞成分，则直接进入下一步。
2.在含病毒的上清中加入1/4 总体积的本产品(4mL 病毒溶液则加1mL 本产品)，4℃冰箱中放置过夜或12小时以上。病毒在此期间将形成沉淀。
3. 10000rpm 4℃离心20分钟收集病毒沉淀，尽可能弃掉所有上清(可以暂时保留上清，等确认病毒浓缩成功后再丢弃)。
4. 将离心管放回离心机短暂离心数秒，再次小心去除残留上清。
5. 将沉淀(病毒颗粒)溶于适量预冷的自备的缓冲液(如PBS缓冲液、TES缓冲液和培养基中，取决于后续实验)，立即使用或者-20℃长期保存。

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