WE0185 血块基因组DNA提取试剂盒

血块基因组DNA提取试剂盒的品牌是百奥莱博，是优质的DNA提取纯化产品，本制品用于生化实验研究等领域，血块基因组DNA提取试剂盒是我司众多优质DNA提取纯化之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括血块基因组DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：血块基因组DNA提取试剂盒
英文名称：BloodClot Blood DNA Extraction Kit
产品货号：WE0185
产品规格：50次

  本试剂盒供了一种快速、简单、的从血片中提取基因组DNA的方法。既适用于未加抗凝剂的血液，也可用于加入EDTA、柠檬酸盐、肝素等抗凝剂的血液样本。样品裂解后，DNA被选择性的吸附到硅基质膜上。两步漂洗后，高质量的DNA被溶解到洗脱液中。纯化得到的DNA无酶抑制剂和其他杂质的残留，A260/A280的比值在1.5-2.3。DNAzuì长可达50 kb，适用于PCR，Real-time PCR、Southern blotting等实验。

试剂盒组成：

组份	50次
Buffer GTL	15ml
Buffer GC	15ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml
Buffer PW2(浓缩液)	18ml
Buffer GE	15ml
蛋白酶K	25mg
蛋白酶K 储存液	1.25ml
吸附柱DC及收集管	50套

自备试剂：无水乙醇

产品特点
1、适用于凝固血液样本的高纯度总DNA分离纯化。
2、无需有机溶剂提取以及乙醇沉淀，彻底去除污染物及下游反应抑制物，快速提取高品质DNA。

实验前准备及重要注意事项：
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer PW2中加入无水乙醇，混合均匀，并在试剂瓶标签上做好标记。
3、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GC是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GC和Buffer GTL于56℃水浴重新溶解
4、将一个水浴锅预热至56℃，另一个水浴锅预热至70℃。
5、可将洗脱缓冲液Buffer GE预热至70℃。

操作步骤：
1、向1.5ml离心管中加入20μl 蛋白酶K 溶液，然后再加入180μl Buffer GTL。
注意：若样品数量较多，蛋白酶K 和Buffer GTL可按比例混合，然后将200μl混合物加入到1.5ml的离心管中。
2、将取下的干血片放入上一步中的离心管中，剧烈涡旋混匀并短暂离心。56℃孵育30-60分钟，期间每隔10分钟将离心管涡旋10秒。
3、加入200μl Buffer GC，彻底涡旋混匀。短暂离心后，70℃孵育10分钟，期间每隔3分钟将离心管涡旋10秒。
注意：加入Buffer GC后可能会产生白色沉淀，大部分情况下，在孵育过程中，沉淀会消失，沉淀不会影响后续的实验。
4、待步骤3离心管中样品降为室温后加入100μl无水乙醇，轻轻颠倒混匀样品，室温放置5分钟。短暂离心，将管壁内壁的液体富集于离心管底。
注意：
1)需要将样品和乙醇混合均匀。
2)当室温高于25℃时，需要先将乙醇预冷。
5、将上一步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中，12000rpm(～13400×g)离心1分钟。倒掉收集管中的废液，将Spin Column DC放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟。倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer PW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8、重复步骤7。
9、12000rpm离心2分钟，倒掉废液，将吸附柱置于室温放置2-5分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
10、将吸附柱置于一个无菌的1.5ml离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入20-100μl BufferGE，室温放置2-5分钟。12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用去离子水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用去离子水做洗脱液应该保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时会降低洗脱效率。
2)离心前室温孵育5分钟可以增加产量；用另外的20-200μl Buffer GE再次洗脱可以增加产量。
3)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，室温放置5 min后再次离心；若洗脱体积小于20μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或去离子水洗脱。
4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。

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名称：柱式毛发DNA提取试剂盒
货号：BTN80805
规格：50次
动物毛发不容易降解，同时含有大量的线粒体，所以是考古研究、法医研究和线粒体研究等领域的重要性实验材料。目前市场上专门用于毛发样品DNA提取的产品很少，为此我们研发了本产品。

产品特点：
1.充分的酶法降解和快速的柱式提取相结合，前者使DNA充分释放，后者使杂质充分被去除。
2.DNA回收率一般在0.5μg/100mg左右(理论产率一般是0.1-1.5μg之间)。
3.DNA纯度高，OD比值一般在1.6-1.8之间。
4.提取的DNA能够用于电泳、酶切、杂交检测和PCR。
5.适合于动物的各种毛发。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50mL
蛋白酶K溶液(10mg/ml)	1mL
溶液B	15mL
溶液C	50mL
离心吸附柱(15层膜)	50套
通用洗柱液	50mL
DNA洗脱液	5mL
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1.将30-50mg左右毛发充分剪碎(成芝麻大小就可以)，zuì后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意：zuì好从靠近根部的地方剪取样品。
2.加入1mL溶液A(使用之前需取本次实验所需的溶液A现加入自备的β-巯基乙醇，β-巯基乙醇的终浓度为5%)和20μL蛋白酶K溶液(20mg/mL)，37℃保温10小时(一般过夜保温就可以)。
 注意：zuì好让反应体系处于摇晃状态，此保温长度一般可以让毛发溶化。
3.加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备氯fǎng，振荡器上振荡30秒充分混匀。
4.12000rpm室温离心3分钟，小心将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液C，上下颠倒30秒充分混匀。
6.将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-0.8mL混合液转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm室温1分钟，弃穿透液。再把剩余的一半上柱，重复此操作。
7.将0.7mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
8.将0.3mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12000rpm离心半分钟(此步为第二次洗涤，一般可以省略)。
9.空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10.将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加入30μL通用洗脱液。
11.12000rpm离心1分钟，管底即为毛发DNA溶液，可立即用于PCR，也可长期保存在－20℃。
 注意：由于头发中DNA的含量十分少，所以电泳检测时即使全部上样也只能看见十分微弱的DNA条带。

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