ALH610 长片段DNA快速高保真PCR M

产品简介
长片段DNA快速高保真PCR M的品牌是百奥莱博,是优质的核酸扩增(PCR)产品,本制品用于科学研究,本品质量稳定,价位合理,需要长片段DNA快速高保真PCR M等核酸扩增(PCR)产品的客户,请到我公司官网联系我们。...
产品详细介绍
特别提示:包括长片段DNA快速高保真PCR MasterMix(含红色示踪染料)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:长片段DNA快速高保真PCR MasterMix(含红色示踪染料)
英文名称:Fast&HiFi Long DNA PCR MasterMix
产品货号:ALH610
产品规格:1ml|5ml
本产品包含高速高保真长片段DNA聚合酶、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×。使用时只需加入模板、引物,并补足水至Mix终浓度为1×即可。所含DNA聚合酶为多种采用zuì基因工程改造而来的超保真酶添加延伸因子混合而成,大的提高了扩增长度、扩增速度、保真性和产量。本品是长片段超保真快速扩增的选产品。本制品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。
产品特点:
1. 扩增速度快:延伸速度可以达到3~4kb/min,是pfu的6~8倍。
2. 扩增产量高:一般PCR产物量比传统pfu产量高50%-。
3. 优异保真性:保真度是taq的54倍以上。一般随机挑一个菌测序便是正确无突变落。
4. 扩增长度长:以复杂基因组DNA为模板适合扩增不超过10kb左右的产物,以简单基因组、质粒和噬菌体DNA为模板适合扩增不超过15kb左右的产物。
注意事项
1. 本系统扩增速度快,质粒和简单基因组等简单模板可以采用10~15秒/kb,复杂模板如人类基因组可以采用20~25秒/kb。
2. 如果电泳发现主带上下拖尾模糊现象,或者泳道出现从上样孔拖下来的涂抹带现象,一般提示延伸时间过长,梯度缩短延伸时间(建议10~15秒/kb为梯度减少延伸时间)直到获得满意结果。
3. 对于GC含量很高的模板,预变性和变性温度可以提高到98℃。本聚合酶耐热性强,98℃对本聚合酶的活性无改变。
4. 如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时,可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%~8%,按照1%梯度增加摸索zuì佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1~1.7 M。并采用降落PCR(Touchdown PCR)。
储存条件:-20℃,有效期2年。
本制品别名:2×PCR MasterMix|长片段PCR MasterMix|高保真PCR MasterMix
根据您的关注的长片段DNA快速高保真PCR MasterMix(含红色示踪染料),长片段PCR MasterMix,高保真PCR MasterMix,2×PCR MasterMix,您可能还对以下产品有需求:
名称:可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂
货号:BTN60901
规格:0.3mL
Taq DNA聚合酶是进行PCR的zuì常用工具酶,但是由于它在常温下还是具有部分活性,所以经常会出现非特异的扩增产物,尤其是当PCR反应体系中有大量非特异DNA存在的时候。目前zuì常见的解决方法是使用抗Taq DNA聚合酶的抗体和使用经过化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶(如AmpliTaq Gold),但前者的缺点是加热后抗体会不可逆失活,后者的缺点是需要预热处理使酶激活。
产品特点:
1.可逆抑制Taq DNA聚合酶的活性,即常温抑制Taq酶活性,在45℃以上抑制功能丧失,当温度降低到45℃以下后,抑制活性又得以恢复。
2. 耐热,产品本身为非蛋白质试剂,远比Anti-Taq抗体稳定,便于保存和运输。
3. 使用简单,在加Taq酶前将本产品按PCR反应体积的1/10直接加入即可。
4.适用范围广,除Taq DNA聚合酶外,还可用于抑制其他DNA聚合酶的活性,如:Tth pol、Stoffel片段、Tfl pol、Tbr pol等。而一种酶的抗体一般对另一种酶的活性没有抑制作用。
5.与后续的RT-PCR兼容。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
在加入Taq或Tth DNA聚合酶之前,按PCR反应终体积1/10的比例将本产品加入到反应体系中混匀,然后再加入DNA聚合酶,启动PCR反应。
名称:即用型荧光定量RT-PCR试剂盒
货号:BTN101219
规格:50次
本产品是基于荧光染料检测的即用型双酶一管式RT-PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量RT-PCR分析(quantitative RT-PCR、qRT-PCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、MMLV-Taq DNA聚合酶混合物、dNTPs、MgCl2及荧光染料DNAgreen等所有一管式实时定量RT-PCR所需要的成分,用户只需加入RNA模板和引物即可进行实时定量RT-PCR反应,具有广泛的用途。
产品特点:
1.一管式完成qRT-PCR反应,避免样品交叉污染,尤其适合临床应用。
2. 即开即用,用户不需要单独准备qRT-PCR所需的各种试剂。
3. 主要成分只有两个(RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix),将加样步骤减少到zuì低,大降低了加样误差,增加了可重复性。
4. 使用范围广,适用于从病毒RNA到人RNA的各种RNA模板。
5.高灵敏度,每个RT-PCR体系zuì低可以检测200拷贝的RNA分子,可扩增的模版RNA的zuì长达2000nt。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 双酶一管式qRT-PCR Buffer,2× | 750μl |
| MMLV-Taq Mix | 100μl |
| RNase-free水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。
使用方法:
1.在一干净的无RNase的PCR管中,先加入下列成分(下面只列出样品管的设置情况,用户可自己根据需要设置阳性和阴性对照):
| 成分 | 样品 |
| 自备RNA模板(分下面三种情况) | 见下 |
| 总RNA | 100-500ng |
| 或poly(A)mRNA | 10-500ng |
| 或体外转录得到的专一RNA | 0.01pg-500ng |
| RNA特异性引物一(自备) | 终浓度300nM(注1) |
| RNA特异性引物二(自备) | 终浓度300nM |
| RNase-free水 | 补到10μL |
| 双酶一管式qRT-PCR Buffer(2×) | 15μl |
| 自备ROX(某些荧光PCR机型需要) | 3μL(注2) |
| MMLV-Taq Mix | 2μl |
注1:通常初次使用本试剂时,可用引物浓度300nM进行实验,根据实验结果具体情况,在200~800nM范围内调整引物浓度。引物、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整,同时增减RNase-free水用量,保证总反应体积不变即可。
注2:如果使用ABI公司的7500,7700和7900三种型号的荧光PCR仪器,则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900,ROX的zuì佳浓度为1×(即在每30μl反应体系中加3μl 10×ROX)。对ABI 7500,ROX的zuì佳浓度为0.05-0.1×(每30μL反应体系加0.3μL 10×ROX;也可将10×ROX稀释到1×,然后每个反应体系加入3μL 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。对于iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000,RotorGene3000,RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器,ROX不是必须的,但加入的话也不会影响整个PCR分析。
2. 轻柔混合均匀后放入PCR仪中进行荧光定量RT-PCR。
3. 设定RT-PCR反应条件时,一般将RT的条件设定成42℃ 30分钟,后接94℃变性5分钟,然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm值和PCR产物长度由用户自行决定注)、zuì后72℃ 5分钟。并在退火或延长步骤中记录荧光信号。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时,zuì大吸收光谱在471nm,结合DNA时的zuì大吸收光谱在500nm,zuì大发射光谱在530nm。
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| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN90805 | 即用型PCR试剂盒(含染料) | 1ml×10|5mL×20 |
| YT387 | dGTP溶液(100mM) | 250μl |
| YT399 | 矿物油(石蜡油) | 20ml |
| WE0113 | BaHF高保真DNA聚合酶 | 500U|2500U |
| ALH193 | 两步法耐热RT-qPCR试剂盒 | 50μl×25次|50μl×50次 |
| SY0025 | PCR Master Mix (含染料) | 1ml |
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