YT137 TUNEL细胞凋亡检测试剂盒

TUNEL细胞凋亡检测试剂盒的品牌是百奥莱博，是优质的细胞凋亡与增殖产品，本制品用于科学研究，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多TUNEL细胞凋亡检测试剂盒等细胞凋亡与增殖产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)
英文名称：Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit
产品货号：YT137
产品规格：20次|50次

本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品，经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤，即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。

试剂盒组分：
TdT酶———————————40μl
Biotin-dUTP————————960μl
TdT酶稀释液(选用)—————500μl
Streptavidin-HRP——————22μl
Streptavidin-HRP稀释液———1ml
DAB显色液A————————6ml
DAB显色液B————————6ml
标记反应终止液——————6ml

细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3"-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP)，随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合，zuì后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞，从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。

本试剂盒有如下优点：
(1)高灵敏度：背景染色低，阳性染色强，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有 DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性好：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。
(3)快速：仅需约2-3个小时即可完成。
(4)应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。

TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。

少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下，zuì好同时检测多个凋亡指标。

注意事项：

1. 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS，用于封片的抗荧光淬灭封片液(YT097)等适当的封片液，用于固定的4%多聚甲醛或向百奥莱博订购免疫染色固定液(YT086)，同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向百奥莱博订购免疫染色洗涤液(YT089)。 需自备过氧化氢，除石蜡切片外需自备甲醇。
2. 如果用于石蜡切片的检测，需自备蛋白酶K，二甲苯。

储存条件：-20℃。

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名称：TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(荧光及显色法，细胞样本)
货号：SNM531
规格：50T|20T

名称：Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒
货号：KFS208
规格：100T|50T
凋亡早期的重要特征之一是半胱氨酸特异性蛋白酶——caspase家族蛋白的活性激活。这一类酶可以参与到一系列的生化反应中，响应凋亡早期信号并导致相应的蛋白底物剪切，继而引发细胞解体。目的底物可识别的序列包含天门冬氨酸残基，剪切发生在序列的羰基段。

Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒采用的荧光底物为原料，可以检测凋亡细胞中激活的caspase3/7.这种具有膜亲和型的检测试剂盒由一个4氨基的小肽（DEVD）和一种核酸结合染料。凋亡发生时，caspase3/7蛋白被激活，从而剪切caspase3/7识别序列DEVD肽段。剪切底物后，游离的核酸染料与DNA结合，从而发出亮绿色荧光信号。

操作步骤
1.1 以合适的培养基悬浮细胞或贴壁细胞，加入合适的化合物或药物，刺激细胞诱导凋亡。
1.2 去除药物或化合物，以新鲜培养基洗涤细胞2-3次，更换新鲜培养基后，以1μL/mL的量加入caspase3/7检测液，使得caspase3/7检测试剂工作液浓度为1μM。（注意： Caspase3/7 检测试剂工作液浓度为0.5μM~2μM，您根据细胞量以及培养液的体积进行调整优化。）
1.3 37℃，避光孵育30min，或室温孵育45-60min。
1.4 荧光显微镜观察拍照或荧光光度计读数。

名称：DAPI染液(即用型)
货号：SY0496
规格：10ml
本产品浓度已经过优化，确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用特定浓度的DAPI，请选购DAPI（SY0495）或DAPI染液（5mg/ml）（SY0496）。

DAPI，也称DAPI dihydrochloride，是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂，它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。

DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。

CAS：28718-90-3
分子式：C16H17Cl2N5
分子量：350.25
储存条件：4℃，有效期六个月

注意事项
1)DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2)荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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