SV1619 SNAP-Cell 阻断剂

产品简介
北京百奥莱博供应的SNAP-Cell 阻断剂用于科学研究,我公司专注于分子生物学试剂产品的研发、生产和供应,为您提供的SNAP-Cell 阻断剂质量可靠,批间差小,且价格公道,热切盼望您选购我们的产品。...
产品详细介绍
特别提示:包括SNAP-Cell 阻断剂在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:SNAP-Cell 阻断剂
产品货号:SV1619
产品规格:100 nmol
特性:
不可逆阻断
适用于脉冲追踪实验
概述:
阻断剂是非荧光底物,在细胞内(SNAP-Cell Block和 CLIP-Cell Block)或活细胞表面(SNAP-Surface Block 和 CLIP-Cell Block)阻断 SNAP- 或 CLIP-tag 的反应。在 SNAP- 或 CLIP-tag 融合蛋白的活细胞和体外标记实验中,可以用阻断剂制备无荧光对照。
SNAP- 和 CLIP-Cell 阻断剂可顺利透过细胞膜,一旦进入细胞,即与 SNAP- 或 CLIP-tag 反应,使之在后续的标记反应中不可逆地失活。
SNAP-Surface 阻断剂也与 SNAP-tag 发生不可逆反应,使之在随后的标记步骤中失活。该阻断剂不能透过细胞膜,仅可阻断暴露于细胞表面的SNAP-tag。
根据您的关注的SNAP-Cell 阻断剂,您可能还对以下产品有需求:
名称:dNTP 混合液
货号:SV0989
规格:每种40μmol|每种8μmol|每种4μmol
概述:
dNTP 套装:
四种包装的超纯脱氧核苷三磷酸的溶液(dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP)。每种的浓度为 100 mM。
dNTP 混合液:
含相同摩尔数的超纯 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP。每种的浓度为 10 mM。
rNTP 套装:
四种包装的核苷三磷酸溶液(ATP、CTP、GTP 和 UTP),pH 7.5,以钠盐形式存在。
rNTP 混合液:
含相同摩尔数的四种核苷三磷酸:rATP、rCTP、rGTP 和 rUTP。每种浓度为 25 mM(rNTP 总浓度相当于 100 mM)。
7-去氮-dGTP:
含有 5 mM 7-去氮-dGTP 的二锂盐溶液。
5-甲基-dCTP:
10 mM 溶液,pH 7.0。
dATP 溶液:
含有 100 mM dATP,pH 7.4 的钠盐溶液。
acyNTP 套装:
四种包装的 acyNTP (acyATP、acyCTP、acyGTP 和 acyTTP)。以干粉形式提供,加入 50 μl 蒸馏水或去离子水(Milli-Q®)后,acyNTP 的终浓度为 10 mM。
acyNTP 可作为链终止基团,因而可用于一般采用 ddNTP 的实验,如 DNA 测序和 SNP 分析。acyNTP 尤其适用于古生菌 DNA 聚合酶的反应,特别是 Therminator DNA 聚合酶。Therminator DNA 聚合酶经过基因工程改造后,拥有更强的掺入核苷酸类似物的能力,这些类似物的糖环发生了改变,如 rNTP,ddNTP,2´ 脱氧核苷酸,特别是 acy 碱基类似物。
名称:T4 多聚核苷酸激酶(3′磷酸酶活性缺失)
货号:SV1045
规格:1KU|200U
特性:
DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化,以便进行连接反应。
DNA 或 RNA 的末端标记,用作探针和进行 DNA 测序
用 T4 多聚核苷酸激酶(M0201)除去 3´ 磷酸基团
T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化,制备pNp 底物,用于添加到 DNA 或 RNA的 3´ 端
用 T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记
概述:
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链 DNA 或 RNA)的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶(M0201)还具有 3´ 磷酸酶活性,将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶(M0236)具有所有激酶的活性,但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
来源:
重组 E. coli 菌株,克隆有 T4 多聚核苷酸激酶或修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
反应条件:
1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),10 mM MgCl2,5 mM DTT],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
注意事项:
达到zuì佳酶活力,需要新鲜缓冲液(在旧缓冲液中,由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力)。
放射性标记反应:
50 μl 反应体系中,用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应(放射性和非放射性)操作流程请联系我们咨询。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率,可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前,先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟,然后冰上冷却,并加入 5%(W/V)的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性,但是为了适用于高活力的放射性标记反应:,在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
一般来说,进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下,T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接,无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态,则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。
质保声明:
T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)经过严格的质控检测,确保该产品具有zuì高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位即 1 个 Richardson 单位,指 37℃条件下,30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量(1)。
浓度:
10,000 units/ml。
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