YT143 Caspase 8 活性检测试剂

Caspase 8 活性检测试剂由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品用于科研目的，本品质量稳定，价位合理，需要Caspase 8 活性检测试剂等细胞凋亡与增殖产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括Caspase 8 活性检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Caspase 8 活性检测试剂盒
英文名称：Caspase 8 Activity Assay Kit
产品货号：YT143
产品规格：20次|100次

本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 8酶活性或纯化的caspase 8酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时，除标准曲线外可以检测20个样品。

Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 8也称FLICE、MACH或Mch5，有时被写作caspase-8或caspase 8，通常以酶原的形式存在，在细胞凋亡的信号转导过程中被激活。Caspase 8被认为是细胞凋亡信号转导过程中比较上游的一个caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介导的细胞凋亡过程中caspase 8被激活，形成一个由p18和p10组成的二聚体，进一步激活下游的caspase 4，caspase 6，caspase 9和caspase 10。

本Caspase 8活性检测试剂盒是基于caspase 8可以催化底物Ac-IETD-pNA(acetyl-Ile-Glu-Thr-Aspp-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline)，从而可以通过测定吸光度来检测Caspase 8的活性。pNA在405nm附近有强吸收。

试剂盒中提供了caspase 8催化产生的黄色产物pNA，可以作为定量caspase 8酶活性的标准品。

试剂盒组分：
裂解液——————8ml
检测缓冲液——————8ml
Ac-IETD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl

注意事项：
1. 须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405，如有困难可以测定A400。
2. Ac-IETD-pNA需尽量避免反复冻融，请注意适当分装。
3. 测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034)，可向百奥莱博订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度，以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。
4. pNA(中文名为4-硝基苯胺)有毒，请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
5. 本试剂盒的裂解液可以和百奥莱博的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用，即本试剂盒裂解液制备的蛋白样品可以用于百奥莱博其它caspase活性检测试剂盒的检测。

储存条件：-20℃。

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名称：线粒体膜电位检测试剂盒
货号：YT148
规格：>100次
本试剂盒是一种以JC-1为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测。

JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体(monomer)，可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去化的比例。

线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。

JC-1单体的zuì大激发波长为514nm，zuì大发射波长为529nm；JC-1聚合物(J-aggregates)的zuì大激发波长为585nm，zuì大发射波长为590nm。实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。

本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。对于六孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100个样品；对于12孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。

试剂盒组分：
JC-1(200X)——————100μl/管，共5管
超纯水————————90ml
JC-1染色缓冲液(5X)——80ml
CCCP(10mM)——————20μl

注意事项：
1. JC-1(200X)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
2. 必须先把JC-1(200X)用试剂盒提供的超纯水充分溶解混匀后，才可以加入JC-1染色缓冲液(5X)。不可先配制JC-1染色缓冲液(1X)再加入JC-1(200X)，这样JC-1会很难充分溶解，会严重影响后续的检测。
3. 装载完JC-1后用JC-1染色缓冲液(1X)洗涤时，使JC-1染色缓冲液(1X)保持4℃左右，此时的洗涤效果较好。
4. JC-1探针装载完并洗涤后尽量在30分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。
5. 请勿把JC-1染色缓冲液(5X)全部配制成JC-1染色缓冲液(1X)，本试剂盒使用过程中需直接使用JC-1染色缓冲液(5X)。
6. 如果发现JC-1染色缓冲液(5X)中有沉淀，必须全部溶解后才能使用，为促进溶解可以在37℃加热。
7. CCCP为线粒体电子传递链抑制剂，有毒，请注意小心防护。

储存条件：-20℃。

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