HR0477 Caspase 6抑制剂

Caspase 6抑制剂的品牌是百奥莱博，是优质的细胞凋亡与增殖产品，本制品用于生化实验研究等领域，本品质量稳定，价位合理，需要Caspase 6抑制剂等细胞凋亡与增殖产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括Caspase 6抑制剂在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Caspase 6抑制剂
产品货号：HR0477
产品规格：200μl

Z-VEID-FMK是一种可逆的caspase-6的小分子抑制剂。可以抑制由Caspase 6激活导致的细胞凋亡。Z-VEID-FMK分子式为C31H45FN4O10，分子量为652.7。
Z-VEID-FMK采用进口高品质原料分装配制，浓度为5mM。本产品适用于需要用到Z-VEID-FMK的各种实验，请根据不同的实验需要进行配制和使用，具体请参考相关文献或实验指南。

储存条件：-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
本品为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。融解后离心至管底部再打开螺旋盖。

使用方法：
根据不同的实验需要进行配制和使用，具体请参考相关文献或实验指南。Z-VEID-FMK溶液可根据需要的浓度加入相应的培养基中，然后过滤培养基除菌，处理细胞。

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货号	名称	规格
BTN111105	MTT检测试剂盒	500次
YT119	细胞凋亡阳性对照试剂盒	200次
YT129	细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒	50次
KFS191	Annexin V-APC/PI双染双染细胞凋亡检测试剂盒	20T|100T|50T
KFS322	MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒	500T
KFS338	细胞毒性(死细胞)荧光检测试剂盒(FM、HCS法)	1000T

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名称：MTT检测试剂盒
货号：BTN111105
规格：500次
MTT广泛用于检测细胞生长，其原理是MTT可以被活细胞线粒体内的脱氢酶还原生成深紫色的formazan结晶，而死细胞则无此活性。深紫色的formazan结晶被溶解后可以通过测定490nm波长的光吸收而测定出其浓度，并由此推测出细胞的活力，细胞增殖越旺盛，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。其原理如下：


产品特点：
1．采用独特的Formazan溶解液，可以充分溶解formazan，减少误差。
2．背景低，灵敏度高，线性范围宽，重复性好。
3．本产品为足够500次(5个96孔细胞培养板)微孔板检测。
4．可用于生物活性因子活性检测、抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验、肿瘤放射敏感性测定等。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	5ml
溶液B	50ml
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存(但溶液B也可以常温运输和保存)，有效期一年。

使用方法：
下面操作是检测细胞毒性的试验，其他应用跟此类似或更简单(如生长曲线试验)，操作步骤可以以此为基础稍作修改即可，故不再赘述。

㈠、接种细胞
1．按常规胰酶消化法消化汇合的单层细胞，收集到含血清的培养基中。
2．200g离心5分钟收集细胞沉淀。
3．用培养基重悬细胞沉淀，制备成单细胞悬浮液并计数。
4．将细胞稀释到2.5×103个/mL～5×10个/mL之间(需要根据细胞的生长速度决定)，如果不知道生长数度，一般可以稀释到1×10个/mL。
5．将足够量的细胞悬液转移到培养皿中(便于用排枪取样)。一个96孔板的MTT检测需要约20mL的细胞悬液。
6．用排枪在96孔板除的第2-11列各孔正中央加入200μL细胞悬液(对正常细胞)。如果是肿瘤细胞，则加入100μL肿瘤细胞悬液和100μL培养基(总体积为200μL)。注意：一定要把细胞加在孔的正中，否则细胞会聚集在孔的角落处，影响试验。
7．用排枪在96孔板除的第1和第12各孔中加入跟细胞悬液等体积的培养基。第1 列各孔将作为+培养基-细胞+MTT对照(用于测OD时调零)，第12列加培养基的作用是减少边缘效应对第11 列反应的影响。
8．按常规细胞培养方法在37℃和5% CO2条件下孵育1-3天，使细胞进入指数生长期。

㈡、药物处理
9．用培养基将药物稀释到8个待测浓度(如果不知道待测浓度，则需要预试验确定)，一般一种药物需要做3块平行板。
10．去除第2到第11列(共10列)各孔中的培养基(不要触动细胞)，保留第1 列和第12列各孔中的培养基。
11．在第2和第11列(共2列)的各孔中加入200μL新鲜培养基，这些孔将作为+培养基+细胞-药物的对照。
12．在第3到第10列(共8列)各孔中加入8个浓度梯度的待测药物，每列加入一个浓度的药物。
13．按常规方法把96孔板继续放在在37℃和5% CO2条件下孵育一定的时间，此段时间即为药物处理细胞的时间，由用户自己决定。
14．处理结束后去除第2 到第11列(共10列，均含细胞)所有孔中的培养基，并再加入100μL新鲜培养基。
15．每天换培养使细胞数量扩增2-3倍(所需时间随细胞不同而不同)。

㈢、存活细胞计数
16．在生长末期，去除第1到第11列各孔中的培养基后，再加入100μL新鲜培养基和10μL溶液A(含MTT成分)，用锡箔包裹住96孔板后放在37℃和5% CO2条件下继续培养4-8小时。注意：溶液A在低温情况下会凝固，使用前请室温放置或20-25℃水浴至全部溶解，摇匀后使用。MTT有致癌性，一定要带手套操作。
17．小心吸弃孔内培养基(含溶液A)。由于培养基可能会影响光吸收，zuì好尽可能去除。
18．每孔加入100μL溶液B，置摇床上低速振荡10分钟，使MTT形成的formazan结晶物充分溶解。
19．由于产物不稳定，故需要立即在酶联免疫检测仪上选择490nm测定吸光度。
 注意：用第1 列各孔(+培养基-细胞+MTT对照)调零。
20．计数同样处理的各次重复的平均值。
21．以药物浓度为横轴，以吸光度为纵轴绘制曲线。由于各处理吸光度值差别很大，一般需将其转化成生长抑制率(以不加药物的第2和第11列各孔数据的平均数作为)，这样便于计算出IC50，用于各种药物处理效果的比较。注意：如果测生长曲线，则以时间为横轴。正常生长曲线一般呈现S型，具有促进作用的则斜率加大。

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