JN0007 两步法RT-PCR试剂盒

我公司致力于为客户提供高纯度、低成本的活性重组蛋白，包括两步法RT-PCR试剂盒在内的各类受体、细胞因子、生长因子、转录因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...

特别提示：包括两步法RT-PCR试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：两步法RT-PCR试剂盒
英文名称：Balbscript Two-Step RT-PCR UltraMix
产品货号：JN0007
产品规格：RT(50次)&PCR(200次)

  本试剂盒基于本公司生产的Balbscript Reverse Transcriptase反转录酶（百奥莱博货号：JN0011）和HotStart Taq DNA聚合酶（百奥莱博货号：JN0023），具有的合成能力和高扩增效率。该试剂盒能以动物、植物和微生物的总RNA或mRNA为模板，用2×Balbscript PreMix 1st Strand cDNA Synthesis UltraMix进行反转录，2×HotStart Taq PCR MasterMix进行扩增。本试剂盒含有从RNA反转录至cDNA并以cDNA为模板进行扩增的全部试剂。

产品特点：
1、反转录反应操作简单，通过减少实验步骤降低了污染几率。
2、使用HotStart Taq酶进行扩增，减少非特异性反应。

试剂盒组成：

组份	JN0007-50次
2×Balbscript PreMix 1st Strand cDNA Synthesis UltraMix	500ul
2×HotStart Taq PCR MasterMix	1ml×2支
RNase Free Water	1ml

操作方法：

链cDNA合成：
1、融化后，将试剂盒中各组分混匀并稍微离心后置于冰上。
2、按顺序加入下面的反应物

模板RNA	总RNA(0.1 ng -5μg) poly(A) mRNA(10 pg) 特异性RNA(0.01 pg)
2×Balbscript PreMix 1st Strand cDNA Synthesis UltraMix	10μl
RNase Free Water	至20μl

3、可选优化步骤。如果RNA模板GC含量高或者含有二级结构，可先将RNA模板和RNase Free Water混匀后，65℃孵育5分钟，冰上冷却后再加入其它组分。
4、轻柔混匀后离心，于42℃条件下孵育60分钟。 如果RNA模板中不含poly A结构，可先在25℃条件下孵育5分钟，随后转到42℃条件下孵育60分钟。
5、70℃加热5min终止反应。
反应产物可直接用于PCR反应，如果不立即使用，在-20℃可保存一周左右。如想延长保存时间，建议使用-70℃保存。

链cDNA的PCR扩增：
合成的链cDNA可直接用于PCR或qPCR。链cDNA反应液体积不能超过PCR反应体系的1/10。通常50 μl的PCR反应体系中，链cDNA反应液加入2μl。

常用反应体系（20μl）：

2×HotStart Taq PCR MasterMix	10μl
上游引物	0.2-1.0μM（终浓度）
下游引物	0.2-1.0μM（终浓度）
模板	1μl
Taq
ddH2O	至20μl

储存条件：-20℃

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名称：25mM氯化锰溶液(PCR级MnCl2溶液)
货号：BTN130307
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本产品为专门用于易错PCR的MnCl2水溶液，浓度为25mM，可用于调节MnCl2的zuì佳浓度。由于Mg2+在PCR过程中可以稳定非互补的碱基对，Mn2+能够降低聚合酶对模板的特异性，因而调整两种离子的浓度，可获得不同突变频率的多样性文库。

氯化锰分子量为125.8，CAS号为7773-01-5，水合氯化锰外观为玫瑰色单斜晶体；无水氯化锰外观为桃红色结晶。密度为2.977g/cm3。熔点是650℃。在高于熔点温度下升华。沸点1190℃。易溶于水，溶于醇，不溶于醚。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

名称：石蜡油，PCR级
货号：BTN130841
规格：10mL
本产品是PCR级石蜡油试剂，专门用于PCR扩增、WGA扩增等实验时添加到反应体系中，封闭反应成分，防止溶液的挥发。

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

名称：免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)
货号：BTN130957
规格：100次
本产品是一种免RNA提取的RT-PCR的试剂盒，它使用精心优化的细胞裂解液直接裂解培养细胞和痕量组织块，然后直接在细胞裂解液中进行RT，再用cDNA进行PCR或荧光定量PCR。

产品特点：
1. 免RNA提取，从细胞裂解到得到RT-PCR或real-time RT-PCR结果只需3个步骤约3小时，省略了整个RNA提取过程。
2. 灵敏度不低于常规方法(先提总RNA再进行RT-PCR)，不但可以检测到低拷贝的RNA，还可用于检测miRNA。
3. 整合了去除基因组DNA的步骤，只检测RNA，无需担心基因组DNA的污染。
4. 每次只需要10-10000个培养细胞或含相应细胞数的痕量组织(如LCM样品)，验证过的细胞包括Hela、CHO、293、COS-7等，但不能用于U937细胞系。
5. 两步法RT-PCR，后续使用灵活。得到的cDNA既可用于普通PCR，也可用于基于SYBR的荧光定量PCR，也可用于其他定量PCR(如TaqMan)，非常灵活。
6. 有单管操作和多孔板操作两种模式，前者适用于少量样品，后者适用于平行处理大量样品，适用于高通量筛查。
7. 本产品足够100次50μL体系的RT反应和600次30μL体系的PCR反应。

试剂盒组成：

成份	规格
细胞裂解液成分一	3.8mL
细胞裂解液成分二	300μL
细胞裂解液成分三	100μL
Oligo(dT),0.5ug/uL	50μL
随机引物,0.2ug/uL	50μL
MMLV逆转录酶(含RI)	300μL
PCR MagicMix3.0	9mL
RNase-free 水	10mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

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货号	名称	规格
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