SY0456 牛血清白蛋白

产品简介
牛血清白蛋白由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的,我公司的牛血清白蛋白品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括牛血清白蛋白(低内毒素)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:牛血清白蛋白(低内毒素)
英文名称:BSA, Low Endotoxin
产品货号:SY0456
产品规格:25g
本品为低内毒素的牛血清白蛋白(BSA, Low Endotoxin),经热休克法处理外,另还经活性炭,去离子和透析处理,保证产品中内毒素含量低于1.0 EU/mg。在内毒素水平敏感的细胞培养中,该产品可作为内源性脂肪酸,微量元素和生长因子的天然载体蛋白;也非常适合用作无血清或化学成分限定的细胞和组织培养中的营养物质的载体蛋白;还是一种有效成分来稳定和稀释敏感蛋白。也可用于ELISA等诊断检测。
牛血清白蛋白,英文名称为Bovine Serum Albumin,也称Bovine albumin,或Cohn Fraction V,简称BSA。BSA有着其广泛的实验室应用,在免疫实验中常用作封闭剂,包括ELISA、WB(Western Blot)。作为载体蛋白,将其交联于半抗原和其他弱抗原可以使它们在抗体生产中具有更强的免疫原性。在限制性内切酶消化反应中,BSA常常被用作一些酶的反应稳定剂,并且能防止它粘附到管壁和枪头上。BSA也常用于生物制药的生产过程或者作为营养物用于细胞和微生物培养。除此之外,还作为蛋白定量检测的标准品使用。我们提供的BSA产品,使用优质牛血浆,利用热休克法(Heat Shock)法制备而成。
CAS:9048-46-8
分子量(M. Wt.):66 kDa
外观:米色(灰白色)粉末
湿度::<5.0%
灰分(Ash):<2.0%
pH值(pH Value):6.5-7.5
白蛋白(Albumin):≥98%(电泳)
总蛋白(Protein):≥97%
重金属(Heavy me
内毒素:<1.0 EU/mg
溶解性:易溶于水(7%(w/v)in water)
储存条件:4℃密封,有效期至少5年
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名称:Protein A琼脂糖凝胶
货号:WE0271
规格:5ml
本产品可从血清,腹水,细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物丌同亚型的抗体或包含抗体 Fc片段的基因工程重组蛋白。具有高IgG结合特异性,高流速,低Protein A-Agarose脱落等特点。
注意事项:
1、凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温后装柱,避免产生气泡影响柱效。
2、装柱时尽可能维持凝胶长径比为5:3-2:1,长径比过大将导致洗脱峰拖尾,洗脱体积增大;长径比过小将导致样品与填料接触时间短,吸附不充分,填料吸附蛋白量小。
3、若上样液中抗体浓度过高,应使用平衡缓冲液稀释至1-2 mg/ml,抗体浓度过高影响柱效。
4、可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高纯化抗体量。
5、凝胶用低pH缓冲液洗脱时间应尽可能短,洗脱后用中性缓冲液尽快中和至pH中性,以延长亲和介质的使用寿命。
6、洗脱后,应立刻用如中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性(pH7.4左右),以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活。
7、填料使用后应用0.1 M柠檬酸钠缓冲液(pH3.0)做再生处理,长期采用端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命。
使用方法:
I 缓冲液的准备
1、平衡缓冲液:纯化不同动物和不同亚型抗体时所用平衡缓冲液是不同的,部分参照如下。
| 抗体 | 平衡缓冲液成分 |
| 人IgG1、人IgG2、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b | 20 mM PBS,300 mM NaCl,pH7.4-8.5 |
| 人IgG3、人IgG4、小鼠IgG1、大鼠IgG3 | 50 mM Tris-Cl,3 M NaCl,pH7.8-8.5 |
2、洗脱缓冲液:0.1 M柠檬酸钠缓冲液,pH4.0。
3、再生缓冲液:1 M NaCl。
4、中和缓冲液:1 M Tris-Cl,pH9.0。
注意:
1)以上缓冲液使用前均需0.45μM滤膜过滤。
2)为提高抗体和介质的吸附力。可适当提高平衡缓冲液中的盐浓度和ph值。
II 样本制备
1、样品用平衡缓冲液稀释5-10倍。
2、细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰,去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。
注意:样品在上柱前需0.45μM微孔滤膜过滤。
III 操作步骤
1、将Protein A-Agarose填料混匀后加入层析柱,室温静置10分钟,待凝胶与溶液分层后,把底部的出液口打开,让乙醇通过重力作用缓慢流出。
2、向装填后的柱中加入3-5个柱床体积的超纯水将乙醇冲洗干净,用平衡缓冲液流洗5-10个柱床体积平衡柱子。
3、将样品上柱,上样流速60 cm/h。
4、平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积,直至基线平稳。
5、洗脱缓冲液洗脱,收集洗脱峰,用中和缓冲液将洗脱收集样品中和到中性。
6、立即用5-10个柱床体积平衡缓冲液平衡柱子到中性。
7、再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。
注意:收集洗脱峰时可以分阶段收集到多个管中,zuì后根据测定结果重新调整收集方式。
8、本产品使用10次以上后先用20%乙醇洗5个柱床体积,再用70%乙醇洗脱5-10个柱床体积,再用20%乙醇流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。
储存条件:2~8℃,避免冷冻
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