HR8433 细胞膜染色试剂盒-M01

产品简介
细胞膜染色试剂盒-M01由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品用于科研目的,我公司的细胞膜染色试剂盒-M01品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括细胞膜染色试剂盒(绿色荧光)-M01在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:细胞膜染色试剂盒(绿色荧光)-M01
产品货号:HR8433
产品规格:1000T|5000T
细胞膜染色试剂盒是用一种亲脂性的绿色荧光探针进行细胞膜染色。染色液O 进入细胞膜后,在整个细胞膜上扩散,zuì佳浓度时可以使整个细胞膜染色。染色液O在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。可以用标准的FITC滤光片检测。
染色液O 通常不会明显影响细胞的活力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了zuì简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
储存条件:4℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期:六个月。
注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● PBS ●培养基 ● 移液器及吸头 ●荧光显微镜/流式细胞仪
使用方法:
使用注意事项:
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●染色后立即进行分析。
●染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
●本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
A:染色工作液的配制:
根据样品数用纯水将试剂B 进行10倍稀释,放入37℃培养箱预热。用稀释后的试剂B将染色液O 进行200-1000倍稀释,配制成染色工作液。
【注】工作液zuì佳zuì终浓度建议根据不同细胞系和实验体系做预实验来优化。
B:悬浮细胞染色
1.用PBS 洗涤细胞2次。
2.加入适量体积的染色工作液重悬细胞,使其密度大约为1×106/mL。
3.37 ℃孵育细胞 5~20min,不同的细胞zuì佳培养时间不同。可以20min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
4.孵育结束,500 Xg离心5min。
5.倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的培养液重悬细胞。
6.重复(4),(5)步骤两次以上
C:贴壁细胞染色
1.用PBS 洗涤细胞2次。
2.细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
3.37 ℃孵育细胞 5~20min,不同的细胞zuì佳培养时间不同。可以20min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
4.吸干染色工作液,用培养液洗培养板或盖玻片2~3次,每次用预热的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸干培养基。
D:用荧光显微镜或流式细胞仪检测
zuì大激发波长为488nm,zuì大发射波长为500nm。
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神经元又称神经细胞,是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元具有长突触(轴突)的细胞,它由细胞体和细胞突起构成。在长的轴突上套有一层鞘组成神经纤维,它的末端的细小分支叫做神经末梢。神经元及神经纤维的染色方法比较多,主要采用镀银染色、焦油紫染色等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 250ml |
| 溶液C | 50ml |
| 溶液D | 50ml |
| 溶液E | 50ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,4℃避光保存,其中溶液B和溶液E室温保存,有效期3个月。
使用方法:(以下步骤仅供参考)
1.石蜡切片8~15μm,脱蜡至水洗。
2.蒸馏水洗1~2min。
3.入溶液A中,并置于37℃温箱内避光浸染25~35 min。
4.蒸馏水洗2~3min。
5.用溶液B还原数秒,至切片呈现黄色为止。
6.蒸馏水洗3~5min。
7.用溶液C滴染20~40s。
8.倾去染液直接用溶液B再次还原1~2min,更换两次溶液,使切片呈棕黄色为止。
9.蒸馏水洗3~5min。
10.用溶液D调色3~5min。
11.蒸馏水洗1~2min。
12.用溶液E固定3~5min。
13.水洗3~5min,然后用滤纸吸干切片周围水分。
14.95%乙醇及无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果:
神经元、轴突、神经纤维→深紫色至黑色
注意事项:
1.所用的玻璃器皿要很清洁,反复用水冲洗及蒸馏水洗。
2.浸银染色中切片注意要展平避免皱褶,以免着色不匀。
3.切片染完后,裱片时要轻拿轻放,以免切片弄碎。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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