HR8616 细胞膜完整性检测试剂盒

细胞膜完整性检测试剂盒由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的，本品质量稳定，价位合理，需要细胞膜完整性检测试剂盒等细胞组织染色产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括细胞膜完整性检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：细胞膜完整性检测试剂盒
产品货号：HR8616
产品规格：500T

E42细胞膜完整性检测试剂盒是利用E系列探针进行细胞染色的试剂盒。本试剂盒中的E42 细胞染色探针为红色荧光标记的细胞探针，具有550/683nm 的zuì大激发/发射波长。
E42探针是对细胞膜损伤细胞进行染色的试剂，不能穿透正常细胞膜，只有当细胞膜完整性受到影响时才可以染色细胞，进入细胞后会与细胞内蛋白质紧密结合，可有效标记膜不完整细胞。

储存条件：染料-20℃避光保存；避免反复冻融；稀释液2-8℃保存。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要zuì新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● HBSS ● 离心机 ●荧光显微镜/激光共聚焦显微镜

使用方法：

使用注意事项：
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定zuì佳条件。以下方法仅供参考。
●染色后立即进行分析。

1．细胞染色
1.1对于贴壁细胞
1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的染色液。于生长状态下孵育5分钟～10分钟(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。
【注】:
● 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。

1．2对于悬浮细胞
1)离心，吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育5分钟～10分钟(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。
【注】:
●对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经细胞粘合剂处理过的盖玻片上，然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
● 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
2．观察结果：
在荧光显微镜(含合适滤片)下观察细胞。zuì大激发/发射波长为550/680nm。

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货号：SNM372
规格：可染20～30张片

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货号：KFS258
规格：100T
溴化乙啶（Ethidium Bromide EB）是一种DNA 结合性荧光色素，其激发波长510nm。发射波长595nm。产生桔红色荧光。

EB 不具有膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞，因此用EB 单染时，正常细胞不着色，早期凋亡细胞呈微弱桔红光，晚期凋亡细胞桔红色荧光增强。死细胞呈强桔红光。EB 常与吖啶橙合用双染进行凋亡检测，与吖啶橙双染时，正常细胞中EB 不能透膜着色，而吖啶橙可透过细胞膜，使细胞呈绿色均匀荧光，细胞圆形均匀；而在凋亡细胞中，细胞皱缩、染色质凝聚、固缩或断裂，出芽，凋亡小体形成。染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色颗粒；而坏死细胞被EB 染成桔红色，由此荧光颜色和细胞形态可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

储存：2-8℃，避光，有效期12个月。

名称：酸性磷酸酶染色试剂盒
货号：HR8332
规格：30T
胞质内的酸性磷酸酶在酸性条件下，磷酸萘酚AS-BⅠ被细胞内酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)水解产生萘酚AS-BⅠ，再与重氮盐偶联，形成不溶性有色沉淀。
本试剂盒适用于细胞涂片、细胞爬片、血涂片、骨髓涂片、冰冻切片及石蜡切片等的染色。阳性反应为鲜红色或深红色颗粒，定位于胞浆当中。

储存条件：2-8℃密封保存。
有效期：三个月。工作液现用现配，一次用完。

注意事项：
1．使用前请仔细阅读说明书。
2．所有的工作液请使用前新鲜配制，配制后立即使用，一次使用完。
3．石蜡切片不需要固定。
4．水洗后不要太干即放入孵育液中孵育，太干后染色效果会变差。
5．用底物孵育液孵育时要注意避光。
6．如果样本为骨片的石蜡切片，不可用酸脱钙法脱钙，酸脱钙对蛋白质酶类的影响较大，使细胞中的特异性酶失活，从而影响特异性的酶染色，导致酶不能跟底物结合，会使染色失败。请使用其他对蛋白质的影响小的脱钙方法。

使用方法：
工作液的配制：
1．底物反应液一配制：使用前用移液器将试剂B 吸入试剂A中，溶解混匀，配成甲液；将试剂D 吸入试剂C中，溶解混匀，配成乙液。将甲液和乙液混匀即成底物反应液一。
2．底物反应液二配制：使用前用移液器将试剂F 吸入试剂E中，溶解混匀，即成底物反应液二。
3．底物孵育液的配制：在染色缸中加入 30ml 蒸馏水，37℃水浴10分钟。将底物反应液一、二、三依次加入已预温的蒸馏水中混合并充分混匀。
4．将样本玻片固定，水洗后还未完全干前，立即放入已准备好的底物孵育液中避光孵育60分钟。
5．新鲜血涂片、细胞涂片爬片、冰冻切片用固定液固定2-10分钟。石蜡切片脱蜡后不需要再固定。
样本的染色处理：
一、血涂片及骨髓涂片
1．推片：取全血或骨髓3μl 左右置载玻片上，将推玻片保持与载玻片30°角，置于血滴正前方，稍微往后移与血滴接触，血滴沿推片下缘散开，再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动，至血滴铺完血膜为止。不要太薄，以免细胞太少，也不要太厚，以免太重叠。
2．固定：让涂片在空气中自然晾干，再放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟，水洗30-60秒。
3．孵育：水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
4．复染：孵育完后，取出水洗1分钟，在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟，或者用甲基绿复染2-3分钟，两者任选其一即可。
二、细胞涂片及细胞爬片
1．固定：将细胞涂片或细胞爬片放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟，水洗30-60秒。
2．孵育：水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
3．复染：孵育完后，取出水洗1分钟，在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟，或者用甲基绿复染2-3分钟，两者任选其一即可。
三、冰冻切片
1．回温：将保存在-20℃冰箱中的冰冻切片放置到切片架上回温5-10分钟。可以放在37℃孵箱中进行回温，或者将切片架放置在一个小盒子中，将盒子置于37℃水浴锅中进行回温。
2．水合：将回温好的切片，水中浸泡1-2分钟。
3．固定：让切片在空气中自然晾干，再放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟，水洗30-60秒。
4．孵育：水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
5．复染：孵育完后，取出水洗1分钟，在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟，或者用甲基绿复染2-3分钟，两者任选其一即可。
四、石蜡切片
1．脱蜡：二甲苯中脱蜡5-10分钟。再换用新鲜的二甲苯脱蜡5-10分钟。
2．无水乙醇浸泡5分钟。再分别用90%、70%乙醇各2分钟。
3．水合：蒸馏水中浸泡2分钟。
4．孵育：还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
5．复染：孵育完后，取出水洗1分钟，在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟，或者用甲基绿复染2-3分钟，两者任选其一即可。

结果分析：
阳性反应为鲜红色或深红色颗粒，定位于胞浆中。

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