SV0043 AlwNI限制性内切酶

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特别提示：包括AlwNI限制性内切酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：AlwNI限制性内切酶
英文名称：AlwNI Restriction Endonuclease
产品货号：SV0043
产品规格：2500U|500U|250U

在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1:
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer:
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dcm甲基化敏感。
注意事项:
如下条件可能出现星号活性:低离子强度、高酶浓度、甘油浓度＞5% 或 pH 值＞8.0。

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名称：λ核酸外切酶
货号：BTN130628
规格：1000U
λ核酸外切酶作用于双链DNA，沿 5´→3´方向逐步切去 5´单核苷酸。zuì适底物是5´磷酸化的双链DNA，也能缓慢降解单链DNA和非磷酸化底物。该酶不能从 DNA的切刻或缺口处起始消化。

产品特点：
1．5´→3´核酸外切酶；
2．切下双链DNA的5´单核苷酸。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期半年。

活性定义：1单位指在50μl反应体系中，37℃条件下，30分钟内能从双链DNA底物上催化产生10nmol酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。

备注：5´-0H端的切割速度比5´-PO4端慢20倍。单链DNA比双链DNA慢100倍。

名称：蛋白酶K
货号：WE0212
规格：100mg
  蛋白酶K是一种以丝氨酸为活性中心的枯草类蛋白酶，具有广泛的底物特异性，特别优先分解与疏水性氨基酸、含硫氨基酸、芳香族氨基酸C末端邻接的酯键和肽键。可在多种不同盐、变性剂、去污剂、pH值和温度条件下进行分解蛋白作用。在提取DNA和RNA的缓冲液中具有很高的活性，主要用于DNA、RNA制备过程中蛋白的消化。

实验前准备及重要注意事项：
1、向蛋白酶K 中加入5ml的蛋白酶K 储存液使其溶解,溶解后的蛋白酶K 浓度为20mg/ml。
2、孵育温度为25℃～65℃，理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时；理想孵育时间为2小时。
3、配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。-20℃长期保存。

储存条件：室温(15～30℃)

名称：DNase I(不含RNase)
货号：WE0213
规格：1000U
  DNase I是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶，可用于降解单链或双链DNA。其原理为DNase Ⅰ水解磷酸二酯键产生带有5"-磷酸基团和3"-OH的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或Mn2+都可以激活DNase I的活性，而Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时可在双链DNA的每条单链上随机地产生切口；而在 Mn2+存在下可使双链DNA断裂，使DNA片段化。用于无DNA污染的RNA的制备，逆转录及体外转录等实验。

产品组成：

组份	1000U
DNaseⅠ(RNase Free),1 U/μl	1ml
Reaction Buffer(with MgCl2),10×	1ml
200 mM EDTA	1ml

实验前准备及重要注意事项：
1、因为DNase I 经常用于需要保持RNA完整性的DNA消化实验，所以在酶制备过程中zuì大限度的避免了RNase污染，可以安全地用于RNA的提取，但由于该酶中不含RNase 抑制剂，提醒使用时注意防止外源RNase的污染。
2、DNase I受剪切力的影响比较大，使用前可以将离心管上下颠倒混匀，避免涡旋震荡。
3、每处理1μg RNA，DNase I用量不要超过1U。

使用说明：
1、以制备用于RT-PCR的RNA样品为例，配置10μl反应体系，如下表：

组分	体积	终浓度
RNA	Xμl	1μg
Reation Buffer(with MgCl2)，10×	1μl	1×
DNaseⅠ(RNase Free)	1μl	1 U
RNase Free Water	Yμl	补足至10μl

2、37℃孵育30分钟。
3、加入1μl 200 mM EDTA，65℃孵育10分钟，使DNase Ⅰ失活，终止反应。
4、处理后的RNA可用于RT-PCR。

储存条件：室温(15～30℃)

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