JN0183 改良Lowery法蛋白质定量试剂

我公司致力于为客户提供高纯度、低成本的活性重组蛋白，包括改良Lowery法蛋白质定量试剂在内的各类受体、细胞因子、生长因子、转录因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...

特别提示：包括改良Lowery法蛋白质定量试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：改良Lowery法蛋白质定量试剂盒
产品货号：JN0183
产品规格：100T

  该法是已知的被引用zuì多的蛋白质定量方法。在酒石酸存在条件下，碱性硫酸铜的二价Cu2+与蛋白作用被还原生成一价Cu+。Cu+ 与蛋白质肽键形成蓝色的四元复合物（双缩脲反应），加入菲林酚红试剂后，使浅蓝色变成深蓝色，zuì后在750nm检测该颜色反应的吸光值，与标准对照计算出蛋白质的浓度。本试剂盒采一种改进的稳定碱性铜试剂代替经典Lowry法的Reagent A、B、和C。这种铜试剂在室温下稳定至少6个月；反应蛋白复合物颜色在120分钟内的变化不超过0.3%；反应曲线几乎与经典方法吻合。

试剂盒组成：

组份	规格（100T）	保存
蛋白标准（2mg/ml BSA）	0.5ml×2	-20℃
改进型Lowry蛋白质分析试剂	100ml	4℃
2N Folin-Ci℃alteu 试剂	10ml	4℃

产品特点：
1、稳定可靠，是稳定的终点法检测，也是已知的被引用zuì多的蛋白质定量方法。
2、比Coomassie更准确，蛋白间差异更小。
3、检测的线性范围1-1500μg /ml。

使用建议：
该反应20～30min即可达到饱和，需要把握Folin酚红试剂的加入时机，分析时间较长，不适合多个样品同时处理。Lowery法测定蛋白浓度容易受到还原剂、金属离子，鳌合剂碳水化合物，甘油，Tris以及K+等非蛋白物质的影响；含EDTA，Triton X-100，ammonia sulfate 等物质的蛋白不适合此种方法。

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名称：牛血清γ球蛋白标准品(2mg/mL)
货号：BTN131071
规格：1mL
牛血清γ球蛋白标准品(BGG)经过滤除菌，质量稳定。本产品是考马斯(Bradford)分析实验的理想标准品，是使用任何方法测定抗体浓度的理想标准品。本产品浓度为2mg/mL。本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备试剂：0.9% NaCl溶液或PBS缓冲液、BCA工作液。

使用方法：
本产品可应用于蛋白分析定量(BCA蛋白分析、考马斯-Bradford分析等)、抗体脱盐回收或其他层析操作的对照、SDS-PAGE电泳和分光光度计紫外灯的常规校准(吸收峰在280nm)等实验。由于蛋白操作彼此差别太大，本手册只列出此产品用于BCA蛋白分析的实验流程，其他流程不在此详述。

1．标准品溶液的稀释方法见下表。此标准品溶液的稀释可使用去离子水、0.9% NaCl或PBS。

2mg/mL本品(μL)	稀释液(μL)	稀释后产品终浓度(μg/mL)
120	0	2000
90	30	1500
60	60	1000
45	75	750
30	90	500
15	105	250
10	110	125
0	120	0(空白对照)

2．本产品标准曲线的制备
1)分别取50μL稀释后的本标准品溶液加入到1.5mL离心管中，每个浓度取2个平行样。
2)在每管中各加入1mL工作液后，立即混匀。
3)37℃水浴槽中反应30分钟后，冷却至室温。
4)使用分光光度计测定562nm处的吸光度值。测定时，使用1mL比色皿，用水校零。尽可能在20分钟内检测完毕所有样品。
5)各浓度本标准品溶液的吸光度值减去空白对照的平均值，绘制本标准品溶液的标准曲线。
3．检测样品的测定
 检测样品建议与本标准品溶液同时进行测定，测定方法同上，与本标准品的测定方法一致。如果必要也可选择与本标准品溶液相同的稀释方法稀释检测样品后测定。


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