BTN120692 硫酸庆大霉素

北京百奥莱博供应的硫酸庆大霉素用于生化实验研究等领域，本品质量稳定，价位合理，需要硫酸庆大霉素等克隆与表达产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括硫酸庆大霉素在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：硫酸庆大霉素
英文名称：Gentamycin Sulfate Solution
产品货号：BTN120692
产品规格：2mL

本产品为浓度为15mg/mL的硫酸庆大霉素溶液。有效浓度为5μg/mL，在大于300μg/mL时具备细胞毒性，推荐使用终浓度：0.5-50μg/mL；WHO推荐在鼻咽拭子样本处理中使用终浓度为10㎎/mL。硫酸庆大霉素又叫庆大霉素硫酸盐，分子式：C21H43N5O7·H2SO4，分子量：575.67，CAS号：1405-41-0。溶于水。

作用原理：庆大霉素靠结合到30S核糖体亚单位上引起密码读错，阻断肽酰-tRNA(peptidyltRNA)从受体位点到供体点点的转移。庆大霉素对假单胞杆菌的杀菌效果靠结合到细胞膜的外膜部分，置换本来存在的阳离子，使膜不稳定，在细胞表面形成空洞。抗菌谱: 革兰氏阴性细菌，葡萄状球菌和其它的革兰氏阳性细菌。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

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货号	名称	规格
BTN140374	pression/BTN140374.html" target="_blank">大肠杆菌DH10B化学感受态细胞	0.1mL*10
BTN120520	pression/BTN120520.html" target="_blank">大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞	10*100μl
YT445	pression/YT445.html" target="_blank">AP1荧光素酶报告基因质粒	1μg
QN1060	pression/QN1060.html" target="_blank">pET-28a(+)载体	20ug
QN1062	pression/QN1062.html" target="_blank">pEGFP-N1 哺乳动物表达载体	20μl
MQ0024	pression/MQ0024.html" target="_blank">F-0化学感受态细胞	20×100μl/100×100μl

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名称：DNA磷酸化试剂盒
货号：BTN130813
规格：20次
人工合成的PCR引物、linker和adaptor的5′端一般都是-OH基团而不是-PO4基团(除非额外付费要求在人工合成时加上-PO4基团)，而任何DNA连接酶都不能将一个DNA分子5′端的-OH基团和另一个DNA分子3′端的-OH基团进行连接，因此通过人工合成的DNA片段和天然DNA 之间的连接效率一般都比天然DNA 彼此的连接效率低(天然DNA 4个端口均可连接，人工合成的DNA跟天然DNA 有2个端口可以连接，人工合成的DNA之间没有任何端口可以连接)，尤其是在平末端连接时。本公司开发的DNA 磷酸化产品能将DNA分子5′端的-OH基团磷酸化。

产品特点：
1.可以快速把DNA的5′端的-OH基团变成-PO4基团，使人工合成的DNA(包括PCR产物)跟天然DNA一样有高的连接效率。
2. 既可以对单链DNA进行磷酸化处理，也可以对双链DNA片段同时磷酸化处理。
3.处理后的DNA可以直接用于连接反应、克隆等，不需要纯化。
4. 本产品足够20次DNA的磷酸化实验。

成分	规格
10×TPK缓冲液	50μl
ATP溶液(10mM)	100μl
T4 多核苷酸激酶(10U/μL)	20μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期为6个月。

使用方法：

一：双链DNA片段(5′端为-OH基团的)的磷酸化
注意：如果是PCR产物，一定要先胶回收，不能使用没经过纯化的PCR反应液，因为其中的残留PCR引物会耗掉大量的激酶，降低PCR产物的磷酸化效率。
1、在微量离心管中配制下列反应液(20μL)：

成分	用量
PCR胶回收片段	2μL(不超过10pmol)
10×TPK缓冲液	2μl
ATP溶液(10mM)	5μl
T4 多核苷酸激酶(10U/μL)	1μl
超纯水到	20μl

2、37℃反应30分钟。
3、70℃热处理5分钟，灭活酶。
4、可直接用于后续克隆(加入量不要超过总体积的1/5)。

二：单链DNA片段的磷酸化
注：单链DNA 包括局部双链的DNA。引物，linker，adaptor，Oligo探针等均按此操作处理。
5、在微量离心管中配制下列反应液(20μL)：

成分	用量
单链DNA片段	5-10 pmol
10×TPK缓冲液	2μl
ATP溶液(10mM)	1μl
T4 多核苷酸激酶(10U/μL)	1μl
超纯水到	20μl

6、37℃反应30分钟。
7、70℃热处理5分钟，灭活激酶。
8、可直接用于后续克隆(加入量不要超过总体积的1/5)。如果使用浓度高，则可能需要乙醇沉淀法浓缩DNA。如果单链DNA的浓度低于5pmol，还需要在乙醇沉淀时加入核酸助沉剂。沉淀得到的DNA可溶解在适量的水中。

附：乙醇沉淀浓度DNA(本试剂盒不提供相关试剂，下列操作仅供参考：
1、在DNA溶液中加入0.1倍体积的3 M 乙酸钠溶液(pH5.2)。
2、再加入2.5倍体积的无水乙醇和4uL 核酸助沉剂。
3、混匀后12000g 4℃离心10分钟，小心弃上清。
4、加入1mL 70%乙醇，短暂离心3分钟后小心弃上清。
5、短暂离心5秒，吸弃残留液体(约30-50μL)。
6、室温放置2分钟干燥后加入适量的超纯水溶解DNA，立即使用或放-20℃长期保存。

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