YT373 YT Taq DNA聚合酶

产品简介
YT Taq DNA聚合酶由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品用于科研目的,本品质量稳定,价位合理,需要YT Taq DNA聚合酶等核酸扩增(PCR)产品的客户,请到我公司官网联系我们。...
产品详细介绍
特别提示:包括YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)
英文名称:YT Taq DNA Polymerase
产品货号:YT373
产品规格:200U|1000U
YT Taq DNA Polymerase简称YT Taq酶,是一种兼顾了高保真性和高扩增效率的DNA聚合酶,是我司优先推荐的基因PCR克隆用酶。
YT Taq 酶可以催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。同时YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性(proofreading activity)。另外,YT Taq 酶有5’至3’外切酶活性,但YT Taq 酶没有反转录酶活性。
由于YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性,因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降低,出错率为1.6×10-6,略低于Pfu酶的2.6×10e-6
。
YT Taq 酶的DNA扩增效率大大高于Pfu酶,和Taq酶的扩增效率比较接近。因此YT Taq 酶很好地兼顾了扩增效率和扩增的准确性。
用途:高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、T载体克隆等各种常规PCR反应。
1)用YT Taq 酶扩增产生的PCR产物带有3’-dA overhangs,可以用于基于T载体的PCR片断克隆。
2)YT Taq 酶可以扩增长度达5kb的DNA片断,zuì长可以扩增长达10kb的DNA片断。通常适合扩增3kb以下的DNA片断。
活性定义:One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribo
polynucleotide fraction (adsorbed on DE-81) in 30 min at 72℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 20 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 2 mM MgSO4, 10 mM (NH4)2SO4, 10 mM KCl, 0.1% (v/v) Triton X-100, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP.
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.1% (v/v) No
10×YT Taq Buffer (with Mg2+):200 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 100 mM (NH4)2SO4, 100 mM KCl, 20mM MgSO4, 1% (v/v) Triton X-100, 1 mg/ml BSA。
失活或抑制:酚氯fǎng抽提可以使YT Taq 酶失活。
储存条件:-20℃
注意事项:
1)由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在使用YT Taq 酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
2)YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性,在没有dNTP的情况下可以降解引物。因此YT Taq 酶一定要zuì后加入,并且要在冰浴上操作。
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储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
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规格:5μg
本产品为长度为6nt的随机引物,序列为5′-(NNNNNN)-3′,主要用于以任何RNA为模板合成cDNA,也可以用于DNA探针的随机引物标计。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
疑难解答:
Q:在合成cDNA时,使用Oligo dT12-18和用随机引物有何区别?
A:只有当以带polyA尾巴的RNA作为模板才能使用Oligo dT作为引物,而任何RNA模板都可以使用随机引物。使用后者的序列覆盖率比使用Oligo dT更高。
名称:2×PCR Master Mix(含Taq酶,buffer,dNTP)
货号:YT378
规格:400次
2X PCR Master Mix中含有2X Taq DNA Polymerase,2X PCR Buffer,2XdNTP,只需加入适量引物、模板和水即可进行PCR扩增。大大简化了PCR操作,使操作更加快捷,也减少了PCR操作过程中可能导致的污染,使PCR的重复性更好。
利用2X PCR Master Mix可以进行各种常规的PCR扩增,特别适合用于定性和半定量的PCR扩增,以及2kb以下DNA片段的T载体克隆。
2X PCR Master Mix可以扩增出长达8kb的片段,但通常更适合用于扩增2kb以下的DNA片段。
本产品稳定性高,经测试,反复冻融15次后对PCR的扩增效果无显著影响。
本试剂盒用于50微升的PCR反应体系,足够用于160个反应;用于20微升的PCR反应体系,足够用于400个反应。
注意事项:
1)由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在使用Taq酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
2)Taq DNA polymerase在PCR过程中每循环的出错几率约为2.2×10-5,对于大于1kb的DNA片段的克隆推荐使用出错几率更低的DNA聚合酶,例如Pfu DNA polymerase、YT Taq DNA polymerase等。对于普通的PCR或RT-PCR定性检测或定量检测,Taq DNA polymerase是zuì佳选择。
3)尽管本产品经过15次反复冻融后仍具有和冻融前几乎相同的PCR扩增效果,但仍宜适当避免反复冻融本产品,多次反复冻融可能使产品性能下降。
4)使用本产品前,一定要完全融化,并上下颠倒轻轻混匀后才能使用,尽量避免起泡。
储存条件:-20℃。
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