BTN111008 非酶多糖清除剂(DNA专用)

非酶多糖清除剂(DNA专用)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科学研究，我公司的非酶多糖清除剂(DNA专用)品质上佳，经过多年的开发生产，已然非常成熟，欢迎广大新老客户订购。...

特别提示：包括非酶多糖清除剂(DNA专用)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：非酶多糖清除剂(DNA专用)
英文名称：Non-enzymatic polysaccharide scavengers
产品货号：BTN111008
产品规格：50次

用很多方法提取的植物、真菌或细菌基因组DNA样品中经常会含有多糖(Polysaccharide)污染，这些污染会严重影响下游的酶切和PCR等实验。为此北京我公司开发了非酶法多糖清除剂(DNA专用)

产品特点：
1.，能有效地去除基因组DNA中的多糖污染,使DNA溶液不再粘稠。
2. DNA分子完整性不会受到任何影响。
3.快速，全部操作在样品管中完成，只需要二十多分钟。
4. 稳定，本产品为非酶产品，可以常温运输和保存。

产品组成：

成分	规格
溶液A	2.5ml
溶液B	5ml
微量核酸沉淀剂	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1. 如果DNA溶液的体积不够100μL，用水或TE补到100μL。如果超过100μL，可以用我公司的核酸浓缩液(需另买)浓缩到100μL，或者分成几个100μL再处理。
2. 将50μL溶液A加入到100μL待处理的DNA样品中，充分吹打混匀。
3. 15μL的溶液B，充分吹打混匀。如果溶液B过于粘稠，可以先在65℃保温后再取用。
4. 加入150μL的lǜ仿，充分振荡半分钟。
5. 12000～15000g离心2分钟，小心转移上清到一新的1.5mL塑料离心管中，交界处将有白膜样的多糖沉淀。
6. 重复上步操作，白膜样的多糖沉淀将减少。是否需要继续此步操作根据多糖污染严重程度决定。可以一直重复直到白膜不再出现。本产品提供的溶液B的量足够抽提5-6次。
7.在zuì后得到的上清液中加入两倍体积(200μL)的微量核酸沉淀剂，混匀后12000～15000g离心10-20分钟，小心弃上清。注意不要触及DNA沉淀。
8. 加入1mL自备的75%乙醇，振荡器上短暂振荡数秒后12000～15000g离心2分钟，小心弃上清。注意不要触及DNA沉淀。
9. 短暂离心数秒，用移液枪小心吸去残留液体(约50μL)后，加入适量自备TE，立即电泳检测，OD检测后放-80℃长期保存。

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名称：高纯游离DNA中量提取试剂盒(负压法)
货号：WE0189
规格：10次|50次
  本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、羊水、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。本试剂盒采用可以特异性结合核酸的吸附柱和独特的缓冲液系统，样品裂解后，游离DNA在高盐条件下与硅胶膜结合，在低盐、高pH值时游离DNA从硅胶膜上洗脱下来。本试剂盒使用负压法，同时配备延伸管，可处理多达5ml样本，纯化的DNA产量高、质量好，zuì大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。

试剂盒组成：

组份	10次	50次
Buffer CL	45ml	220ml
Buffer CB(浓缩液)	60ml	300ml
Buffer GTL	15ml	60ml
Buffer GW1(浓缩液)	3ml	13ml
Buffer GW2(浓缩液)	3ml	15ml
Buffer EBL	2ml	10ml
蛋白酶K	100 mg	3×180 mg
蛋白酶K 储存液	5ml	30ml
吸附柱DG及收集管	10套	50套
延伸管(20ml)	10个	50个
连接管	10个	50个
离心管(L-1.5 m l)	10个	50个

保存条件：吸附柱DG置于2～8℃，其他组分室温(15～30℃)

产品特点：
1、适合大体积样本：试剂盒使用负压法，配备延伸管，配套使用负压装置可将样品处理量提高至5ml。
2、提取得率高：使用微量吸附柱结合目的片段，有效提升核酸的回收率，洗脱体积可在10-150μl之间灵活变化，可浓缩低浓度核酸。
3、纯度高：经纯化和浓缩的游离DNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质，可即用于下游各种应用，包括PCR、荧光定量PCR、二代测序等。

自备试剂：无水乙醇、异丙醇

实验前准备及重要注意事项：
1、向每管蛋白酶K *末中加入用量(10次加5ml/50次每瓶加9ml)的蛋白酶K 储存液，使其完全溶解后-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。其它组分可以在干燥、室温(15～30℃)环境下稳定保存一年。如需保存更长时间，可置于2～8℃。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致DNA提取量下降。
3、本试剂盒zuì多可以从5ml血清血浆、4ml尿液中提取cfDNA。
4、次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer CB中加入异丙醇，混合均匀，并在试剂瓶标签上做好标记。
5、次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇，混合均匀，并在试剂瓶标签上做好标记。
6、使用前请检查Buffer CL、Buffer CB是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer CL、Buffer CB于56℃水浴孵育重新溶解，混匀后使用。
7、实验开始前将水浴锅预热至60℃。
8、可将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃。
9、负压装置。

操作步骤(血清、血浆样本1-5ml)：

1、样品处理：向离心管(自备)中加入1ml血清/血浆样本，若样本不足1ml，加入PBS溶液补至1ml体积。
注意：当样品量超过1ml时，请等比例增加蛋白酶K 、Buffer CL和Buffer CB试剂用量，具体
2、向以上溶液中加入100μl 蛋白酶K ，混匀。
3、加入800μl Buffer CL，剧烈震荡至少30秒。
4、60℃孵育30分钟，其间颠倒混匀数次。
5、加入1800μl Buffer CB(使用前检查是否加入异丙醇)，颠倒混匀10次或剧烈震荡15-30秒。
6、冰浴5分钟。
7、正确连接负压装置，将连接管插到负压装置的插口上。
8、将吸附柱插入到连接管上。
9、将延伸管插入开盖的吸附柱中。
注意： 确保连接管、吸附柱和延伸管连接稳固，防止发生漏液。
10、将冰浴后的混合溶液全部加入延伸管中，开启并调节负压至-900～-800 mbar，缓慢吸走管中溶液。待溶液完全吸走，关闭负压开关，当压力恢复至0 mbar时，小心移去延伸管。
11、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 开启并调节负压至-900～-800 mbar，待溶液完全吸走，关闭负压开关。
12、向吸附柱中加入750μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，开启并调节负压至-900～-800 mbar，待溶液完全吸走，关闭负压开关。
13、向吸附柱中加入750μl无水乙醇，开启并调节负压至-800～-900 mbar，待溶液完全吸走，关闭负压开关。
14、当压力恢复至0 mbar时，将吸附柱取下，置于新的收集管中，12000rpm离心3分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应。
15、将吸附柱置于新的1.5ml离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入20-150μl Buffer EBL，室温放置3分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。

附表1：不同血清/血浆样本量推荐加入试剂量

加入物	加入量(ml)
样本	1	2	3	4	5
蛋白酶K	0.1	0.2	0.3	0.4	0.5
Buffer CL	0.8	1.6	2.4	3.2	4
Buffer CB	1.8	3.6	5.4	7.2	9

储存条件：室温(15～30℃)。

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