JN0025 UltraTaq DNA聚合酶

产品简介
我公司致力于为客户提供高纯度、低成本的活性重组蛋白,包括UltraTaq DNA聚合酶在内的各类受体、细胞因子、生长因子、转录因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...
产品详细介绍
特别提示:包括UltraTaq DNA聚合酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:UltraTaq DNA聚合酶
英文名称:UltraTaq DNA Polymerase
产品货号:JN0025
产品规格:250U
百奥莱博采用分子进化技术在普通Taq酶基础上进行改造、制备的聚合酶UltraTaq酶具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点,是新一代的PCR聚合酶。使用UltraTaq能获得更理想的扩增结果,并大幅度缩短扩增反应时间。
产品组成:
| 组份 | JN0025-250U |
| UltraTaq DNA 聚合酶(5U/μl) | 50μl |
| dNTP混合液(各10mM) | 200μl |
| 5×UltraTaq Buffer with Mg2+ | 2ml |
产品特点:
1、快速:UltraTaq扩增速度为普通Taq酶的4倍,72℃保温10-15秒可延伸1kb以上。
2、:以λDNA为模板,扩增长度可达8kb,能扩增≤6kb片段;对于人基因组DNA等复杂模板,能有效扩增出3kb特定基因片段(图例一)。
3、高灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段(图例二)。在同样条件下对于基因组DNA的扩增显著优于Taq酶。
4、独特配方的5×Buffer:使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、。
产品用途:
1、常规PCR鉴定;
2、小片段目标基因克隆;
3、基因组片段扩增;
4、平端PCR产物加A;
5、双脱氧法测序;
6、荧光定量PCR。
使用建议:
1、使用本试剂扩增得到的PCR产物3′ 端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。
2、由于UltraTaq酶的准确度低于Pfu/Fast Pfu聚合酶,如需扩增克隆较长片段建议换用Pfu/Fast Pfu酶。当扩增大片段时,UltraTaq酶的扩增效率低于UltraTaq Plus酶,在扩增大片段时建 议换用UltraTaq Plus酶。
应用实例:

图例一)50μl扩增体系中,以50ng 人基因组DNA为模板,对3kb片段的扩增结果。
泳道M:1KB DNA Marker; 泳道1:泳道2:扩增3kb片段结果;

图例二)50μl扩增体系中,分别以50ng~0.05ng人基因组DNA为模板,可对特定基因片段(1.2kb)进行很好的扩增。
泳道1:50ng;泳道2:5ng; 泳道3:0.5ng;泳道4:0.05ng; 泳道M:DNA Ladder 2000;
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带。PCR方法检测无大肠杆菌DNA残 留、无核酸内、外切酶污染。
活性定义:在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的 掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
常用反应体系(50μl)
| 5×UltraTaq Buffer* | 10μl |
| 上游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| 下游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| dNTP(各10mM) | 1.0μl |
| 模板 | 1-50ng(质粒) |
| 10ng-1μg(基因组) | |
| UltraTaq | 0.25μl(1.25U) |
| ddH2O | 至50μl |
| *Mg2+终浓度为2mM | |
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1.基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和链取代能力。
2.可以扩增基因组达上万倍,具有高产量和高保真性的特点。
3.可使用各种来源的样品,包括全血,干血,发根,口腔粘膜刮液培养细胞,真菌和病毒等。
4. 操作简便快捷,恒温(30℃)反应,无须PCR仪即可实现扩增。
5.产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异,微卫星差异,SNP,STR)等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| WGA溶液A | 75μl |
| WGA溶液B | 30μl |
| dNTP(10mM) | 20μl |
| BSA | 10μl |
| 超纯水 | 1ml |
| Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL) | 15μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
本产品适用于纯化好的基因组DNA。
1.在PCR塑料管中加入1μL纯化好的基因组DNA,用量在100pg-100ng之间。可以同时做一个不加DNA模板的阴性对照。
2.在PCR管中依次加入2.5μL WGA溶液A,1μL WGA溶液B,超纯水4.3μL,轻柔吹打混合均匀(现在PCR管中总体积为8.8μL)。
3. 95℃保温3~5分钟,室温短暂离心半分钟,然后冰上放置15分钟。
4. 然后依次向上述反应液中加入0.5μL dNTP,0.2μL BSA,0.5μL Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL),轻柔吹打混合均匀。
5. 30℃保温3-12小时。zuì好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,zuì好在样品管中加入30-50μL石蜡油以防水分蒸发,因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。
6. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注:由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性,所以zuì好将其灭活以免干扰后续反应。
7. 立即取3μL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。注意:WGA缓冲液中不含有甘油和电泳染料,所以需要先加上样缓冲液。
8.扩增的DNA可以用于后续试验或冰箱长期保存。
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